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杜德尧
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中国科学院微生物研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
李金娥
中国科学院微生物研究所
王璐
天津科技大学生物工程学院
牛国清
中国科学院微生物研究所
刘浩
天津科技大学生物工程学院
田宇清
中国科学院微生物研究所
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作者
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谭华荣
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田宇清
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刘浩
1篇
牛国清
1篇
王璐
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李金娥
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杜德尧
传媒
1篇
微生物学报
年份
1篇
2015
共
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尼可霉素生物合成基因簇的改造及其异源表达
被引量:3
2015年
【目的】异源表达尼可霉素生物合成基因簇,为尼可霉素核苷和肽基缩合机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素的组合生物合成奠定基础。【方法】以含有尼可霉素生物合成基因簇的pNIK为出发质粒,通过PCR-targeting的方法,将基因簇中san G和san F的启动子替换为组成型hrd B启动子,构建重组质粒pNIKm。通过接合转移的方法分别将pNIK和pNIKm导入天蓝色链霉菌M1146中,获得异源表达菌株M1146-NIK和M1146-NIKm,并通过RT-PCR检测基因簇的表达情况。最后通过抗菌活性实验和产物的分离鉴定,比较M1146-NIK和M1146-NIKm的抗菌活性和尼可霉素的产生情况。【结果】pNIK和pNIKm在异源宿主天蓝色链霉菌M1146成功表达;M1146-NIK和M1146-NIKm均有明显的抗菌活性;M1146-NIK和M1146-NIKm均能产生少量的尼可霉素X、Z和假尼可霉素Z;M1146-NIK大量积累尿苷,而M1146-NIKm大量积累尿苷、核糖基-4-甲酰-4-咪唑-2-酮和吡啶同型苏氨酸。【结论】尼可霉素生物合成基因簇成功异源表达,并分离鉴定了尼可霉素产物及其生物合成中间体。本研究将为尼可霉素核苷和肽基缩合的酶学机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素组合合成新型杂合抗生素提供理论依据和指导。
王璐
杜德尧
李金娥
田宇清
刘浩
牛国清
谭华荣
关键词:
圈卷产色链霉菌
尼可霉素
生物合成基因簇
异源表达
抗菌活性
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