李艺楠
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
- 供职机构：扬州大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 季铵盐壳聚糖三维支架复合GNDF载间充质干细胞向神经样细胞分化被引量：2
- 2013年
- 背景:壳聚糖类水凝胶因其良好的生物相容性、可降解性及对药物的缓释作用,作为支架材料近年来在组织损伤修复领域逐渐成为研究热点。目的:探索大鼠骨髓间充质干细胞在季铵盐壳聚糖温敏凝胶支架上生长、向神经样细胞定向分化的可行性,为治疗神经系统损伤寻找理想的组织工程材料。方法:季铵盐壳聚糖与β-甘油磷酸钠复合制成温敏凝胶,扫描电镜观察凝胶的三维结构,MTT法评价凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞活力的影响;将牛血清白蛋白加载于凝胶支架,紫外光谱吸收法分析凝胶支架对牛血清白蛋白的缓释效果。接种大鼠骨髓间充质干细胞于凝胶支架,扫描电镜观察在支架缓释胶质细胞源性神经营养因子作用下,骨髓间充质干细胞的生长、分化情况,免疫荧光技术检测神经元烯醇化酶的表达。结果与结论:季铵盐化壳聚糖与甘油磷酸钠复合所得凝胶支架,其多孔性特点明显,有温敏特性,对蛋白的缓释效果良好,承载大鼠骨髓间充质干细胞后,对其增殖无明显不利影响。在凝胶支架缓释的胶质细胞源性神经营养因子作用下,骨髓间充质干细胞呈现神经样细胞形态,表达神经元特异性标记物神经元烯醇化酶。说明季铵盐壳聚糖温敏凝胶对胶质细胞源性神经营养因子的缓释效果良好,其凝胶支架具有多孔径、良好生物相容性特点,可承载大鼠骨髓间充质干细胞体外生长和向神经元定向分化。
- 黄成杨建东冯新民李广峰李艺楠肖海祥孙钰
- 关键词：神经元
- 骨髓间充质干细胞复合温敏水凝胶支架的制备被引量：3
- 2013年
- 背景:壳聚糖及其衍生物制备的支架对细胞迁移和神经轴突再生有重要作用。壳聚糖及其衍生物的组织相容性好,易使干细胞在其表面附着生长,在神经组织工程具有较为广阔的应用前景。目的:制备适宜骨髓间充质干细胞生长的壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠温敏性水凝胶细胞支架,观察骨髓间充质干细胞在细胞支架中的生长情况。方法:将壳聚糖进行季铵盐化改性处理,通过傅里叶变换红外光谱分析谱检测确定其生成。实验以壳聚糖与壳聚糖季铵盐配比为8∶1成功制备出较为稳定的壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠温敏性温敏水凝胶细胞支架,观察成胶情况,并进行生物安全性检测。结果与结论:实验在傅里叶变换红外光图谱上发现了季铵基基团的特征峰。细胞毒性实验显示,水凝胶浸提液干预的大鼠骨髓间充质干细胞无毒性。急性全身毒性实验显示,浸提液对大鼠体质量增加无明显影响,支架生物安全性较好。扫描电镜观察显示,骨髓间充质干细胞在细胞支架中能正常的生长和增殖。结果证实,实验成功制备了壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠温敏性水凝胶细胞支架,适合骨髓间充质干细胞生长和增殖。
- 李艺楠李艺楠李广峰黄成黄成肖海祥
- 关键词：水凝胶间质干细胞骨髓壳聚糖
- 不同血清浓度及培养时间对成年大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞的影响
- 2014年
- 背景:课题组前期实验曾报道血清及神经生长因子对嗅鞘细胞体外增殖的影响,但对于嗅鞘细胞体外培养的血清浓度的选择及培养时间的掌握,这一方面的实验研究却报道较少目的:通过研究不同血清浓度及体外培养时间对来源于成年大鼠嗅黏膜的嗅鞘细胞生长曲线的影响,从而了解不同实验条件对嗅鞘细胞体外生存和生长情况的影响。方法:取成年大鼠嗅黏膜,进行体外分离培养,鉴定嗅鞘细胞,并用磺基罗丹明B酶标仪法测量各孔的吸光值(A值),转化为嗅黏膜嗅鞘细胞的生长曲线。结果与结论:血清浓度0%组的A值明显低于其他浓度组。血清浓度10%-90%组细胞均可以正常生长。特别是血清浓度在10%-40%,对细胞生长起到明显的促进作用。随着细胞生长时间的延长,血清浓度0%组A值呈微弱的降低,其余各浓度组A值呈现增加状态。开始几天的A值增加趋势较弱,第9天之后增加趋势明显增强。血清浓度10%-40%组,在第13天,细胞生长迅速增快,第19天左右进入平台期,第23天A值有减弱的趋势。而血清浓度在50%-90%组,在第13天细胞生长达到峰值,随着时间的延长,A值逐渐变小。说明不同血清浓度及不同培养时间等体外培养环境对大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞生长和生存有明显影响,因而利用血清进行体外细胞培养时应充分考虑所添加血清的浓度以及细胞培养的时间。
- 张志强李艺楠周颖杨建东冯新民
- 关键词：嗅鞘细胞血清浓度细胞培养细胞生长曲线嗅黏膜
- 胶质细胞源性神经营养因子基因修饰后间充质干细胞的生长与分化被引量：4
- 2013年
- 背景:近年来,研究表明外源性神经营养因子或化学诱导剂可诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化,但外源性诱导剂诱导作用短暂且化学性物质不可避免的对细胞活力造成负面影响,一定程度上限制了骨髓间充质干细胞的基础研究与临床应用空间。目的:以载胶质细胞源性神经营养因子和绿色荧光蛋白基因重组腺病毒(Ad-rGDNF-GFP)转染大鼠骨髓间充质干细胞,观察目的基因在靶细胞内的表达、对细胞的营养作用及对骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的影响。方法:转染组中以Ad-rGDNF-GFP转染骨髓间充质干细胞,感染复数分别为10,50,80,100,150,200;对照组加入等量的培养液作为对照。转染后12 h,倒置荧光显微镜观察2组中绿色荧光蛋白的表达情况;转染后72 h,流式细胞仪测定转染组中转染效率;MTT法测定2组中细胞活力;转染后5,10 d,PCR检测转染组中胶质细胞源性神经营养因子mRNA的表达;转染后5 d免疫荧光鉴定2组中神经元烯醇化酶的表达情况,转染后10 d鉴定微管相关蛋白2的表达。结果与结论:转染后12 h,细胞中可观察到绿色荧光蛋白的表达,随时间延长荧光强度逐渐加强。以感染复数=100时绿色荧光蛋白的表达强度、稳定性较好,转染后3 d,转染效率近90%;转染后转染组细胞活力增加;转染5 d后,骨髓间充质干细胞表达神经元烯醇化酶,细胞伸出神经样细胞突起;转染10 d后,胶质细胞源性神经营养因子mRNA表达显著增强,骨髓间充质干细胞表达神微管相关蛋白2,细胞突触样结构明显且相互连接成网,呈现典型神经样细胞形态。说明以Ad-rGDNF-GFP转染骨髓间充质干细胞,感染复数=100时,可获得较高的转染效率,胶质细胞源性神经营养因子表达后明显提高了骨髓间充质干细胞活力,并诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞定向分化。
- 黄成杨建东冯新民徐薇李艺楠肖海翔顾加祥
- 关键词：干细胞骨髓干细胞胶质细胞源性神经营养因子分化基因修饰
- 后路椎板开窗减压加对侧椎板植骨融合治疗胸腰椎爆裂性骨折伴不全瘫被引量：16
- 2012年
- [目的]探讨后路椎板开窗减压加对侧椎板植骨融合治疗胸腰椎爆裂性骨折伴不全瘫的临床疗效。[方法]回顾分析本院从2007年2月～2011年2月收治的48例胸腰椎骨折伴不全瘫的患者,均行后路椎板开窗减压加对侧椎板植骨融合治疗,观察患者疗效。并选择同期分级相似胸腰椎骨折伴不全瘫的患者51例行椎板切除减压作为对照组,将两者出血量、手术时间及术后疗效做一对比。[结果]椎板开窗组术后未出现神经损伤加重及死亡病例。脊柱后凸角度(Cobb角)、伤椎椎体前缘高度、椎管占有率与术前相比,具有统计学意义;患者脊髓及神经损伤ASIA分级术后部分有明显改善;术后1年患者影像学资料显示骨折骨性愈合。无内固定物松动及断裂发生。与椎板切除组相比,椎板开窗组手术时间及手术出血量(术中+术后引流)具有统计学意义。[结论]与后路椎板切除组相比,后路椎板开窗减压加对侧椎板植骨融合治疗胸腰椎爆裂性骨折伴不全瘫具有创伤小、出血少,操作简单、手术时间相对较短,能较大限度保持后结构完整等优势,术中脊髓也能得到有效减压,术后疗效可靠。
- 胡龙驹冯新民陈鹏涛陶玉平王永祥杨建东李小磊徐薇黄成李艺楠
- 关键词：胸腰椎骨折椎板开窗植骨融合
