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α-硫辛酸对老年大鼠外周血细胞线粒体的抗氧化作用被引量：1: 2012年; 目的探讨α-硫辛酸(α-LA)对老年大鼠线粒体活性氧及膜电位的影响。方法以18月龄老年大鼠为研究对象,6月龄大鼠作为青年对照。不同浓度硫辛酸灌胃饲养7 d、停止灌胃3 d、再次恢复灌胃7 d,用双氢罗丹明123(DHR123)标记外周血细胞线粒体活性氧,罗丹明123(Rh123)指示线粒体膜电位,借助流式细胞仪评价LA对老龄大鼠体内细胞活性氧及膜电位的改变。结果老年大鼠外周血细胞线粒体活性氧水平高于青年对照,线粒体膜电位低于青年对照。LA灌胃饲养7d后,实验组老年大鼠活性氧水平低于老年对照组(P<0.05),线粒体膜电位高于老年对照组(P<0.05)。停止灌胃3 d后,各实验组活性氧水平不同程度回升,高剂量组较明显;各实验组线粒体膜电位变化不明显。继续用LA灌胃7 d,各实验组活性氧水平不同程度下降,线粒体膜电位变化无统计意义。结论 LA能清除活性氧,稳定线粒体膜电位;LA对活性氧的抑制有浓度依赖性,对线粒体膜电位的稳定作用较持久。; 田芳赵鹏袁准孙宇立邵春海刘景芳; 关键词：Α-硫辛酸血细胞线粒体流式细胞术抗氧化

线粒体DNA缺失A549细胞与其母本细胞核蛋白质组差异分析(英文): 2012年; 目的比较线粒体DNA(mtDNA)缺失A549细胞(Rho0细胞)与其母本细胞(Rho+细胞)核蛋白表达谱,并探讨细胞核对线粒体功能缺陷的应答反应。方法二维凝胶电泳(2-DE)和表面增强激光法解吸电离-飞行时间(SELDI-TOF)蛋白芯片测定Rho0细胞和Rho+细胞核蛋白表达谱,基质辅助激光解吸电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱结合数据库检索鉴定差异表达的蛋白点,Western印迹法测定核磷蛋白和P53表达,激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位。结果 2-DE显示Rho0细胞核中11个蛋白点表达下调,21个蛋白点表达上调。基于NP20蛋白质芯片的SELDI-TOF质谱分析发现4个蛋白质峰在Rho0细胞核中明显下降。其中1个表达下调的蛋白点被鉴定为eIF-6,4个表达上调的蛋白点被鉴定为核磷蛋白,SFRS1,SFRS3和hnRNP G。Western印迹实验结果显示,Rho0细胞中核磷蛋白表达增加。P53和线粒体膜电位(MMP)测定结果显示,Rho0细胞中P53表达高于Rho+细胞,两种细胞MMP基本一致。结论 mtDNA缺失诱导了细胞核蛋白质组改变。Rho0细胞可以作为研究线粒体与核交互作用的模型。; 赵鹏张朝晖仲伟鉴应贤平袁准姚碧云傅娟玲周宗灿; 关键词：P53 膜电位线粒体

纳米二氧化钛颗粒诱导人肺Ⅱ型上皮细胞活性氧的研究: 2010年; [目的]观察纳米二氧化钛(Nano-TiO2)颗粒诱导细胞内活性氧(ROS)的产生情况。[方法]采用直径5nm锐钛型Nano-TiO2颗粒和直径<10nm、长度40nm金红石型Nano-TiO2颗粒为研究材料,选择细胞质和线粒体部位ROS特异荧光探针二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)及双氢罗丹明123(DHR123),用流式细胞仪测定10、20、40μg/mL不同晶型和粒径的Nano-TiO2颗粒在人肺Ⅱ型上皮(A549)细胞作用不同时间所产生的荧光强度。并在5～160μg/mL浓度下,用中性红方法测定两种Nano-TiO2颗粒的细胞毒性。[结果]锐钛型Nano-TiO2颗粒和金红石型Nano-TiO2颗粒诱导细胞质和线粒体内ROS结果基本相同,作用5min就可检测到ROS,一直持续到2h,而高剂量组诱导ROS大于低剂量组。锐钛型Nano-TiO2颗粒产生ROS峰值在30min,而金红石型Nano-TiO2颗粒产生ROS峰值在60min。用流式细胞仪检测ROS实验中意外出现纳米颗粒峰,峰值高低与纳米颗粒诱导ROS荧光强度反应一致,表明ROS反应与染毒剂量成正比关系,可在同一检测中得到证明。而在实验中未发现两种Nano-TiO2颗粒存在细胞毒性。[结论]Nano-TiO2颗粒可以诱导细胞质和线粒体内ROS产生。; 应贤平孙宇立袁准赵鹏田芳仲伟鉴项翠琴; 关键词：活性氧流式细胞仪细胞毒性

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袁准