董晓蕾
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金国家中医药管理局课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 运用抑制性消减杂交技术构建糖尿病肾阳虚证DNA消减文库被引量：1
- 2006年
- 目的:运用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建糖尿病(Diabetic mellitus,DM)肾阳虚证DNA消减文库。方法:选择汉族中医辨证为肾阳虚证的DM患者以及正常人做对照组,进行正向和反向消减杂交。用RsaⅠ酶切用硅胶法抽提基因组DNA成大小不等的片段,分别连接两种不同的接头,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将PCR产物与U/A载体连接,经蓝白斑筛选及菌液PCR筛选出阳性重组质粒,构建DM肾阳虚证DNA消减文库。结果:用SSH方法筛选出DM肾阳虚证的差异DNA片段,经克隆及PCR筛选出阳性重组质粒,从而成功地构建了DM肾阳虚证的DNA消减文库。结论:SSH技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建DM肾阳虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆DM肾阳虚证相关基因奠定了基础。
- 崔丽娟赵晓山罗仁董晓蕾周琳孙晓敏
- 关键词：糖尿病肾阳虚证抑制性消减杂交
