王丹阳
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：西北大学生命科学学院西部资源生物与生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省教育厅省级重点实验室科研与建设计划项目陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 黄瓜生殖细胞分离及其线粒体DNA的观察与拷贝数定量分析被引量：1
- 2016年
- 该研究以6~8月上午10点左右摘取的新鲜黄瓜花朵为材料,采用渗透压冲击的方法分离黄瓜生殖细胞,并应用竞争型定量PCR技术测定其线粒体DNA数量,分析生殖细胞在发育过程中线粒体DNA的变化,以明确高丰度线粒体DNA的来源,为进一步研究被子植物调控线粒体DNA扩增的分子机制奠定基础。结果显示：（1）DAPI染色观察发现,黄瓜生殖细胞的细胞核周围存在大量的细胞器DNA荧光点,表明黄瓜生殖细胞的细胞质中存在大量的线粒体DNA。（2）成熟黄瓜生殖细胞平均包含（1 037±126）个线粒体DNA拷贝。（3）成熟生殖细胞内线粒体DNA含量为早期生殖细胞的14.5倍,表明成熟生殖细胞中的线粒体DNA主要来自于生殖细胞形成后其内活跃的线粒体DNA扩增。研究认为,黄瓜生殖细胞内活跃的线粒体DNA是黄瓜线粒体父系遗传的基础。
- 唐绮蔺祯高龙郭雪王丹阳
- 关键词：线粒体DNA拷贝数父系遗传黄瓜生殖细胞
- 利用PCR方法鉴定hiTAIL-PCR扩增产物中的质粒骨架片段
- T-DNA突变体是研究基因功能的重要资源,高效热不对称交错PCR(hiTAIL-PCR)是克隆突变体中T-DNA插入位点侧翼序列的常用方法.然而,我们发现,利用hiTAIL-PCR克隆到的一些侧翼序列并不对应于宿主的染色...
- 曹媛杨云徐化全刘洋王丹阳
- 关键词：侧翼序列克隆
- 利用PCR方法鉴定hiTAIL-PCR扩增产物中的质粒骨架片段被引量：1
- 2018年
- T-DNA突变体是研究基因功能的重要资源。高效热不对称交错PCR(hiTAIL-PCR)是克隆突变体中T-DNA插入位点侧翼序列的常用方法。然而我们发现,利用hiTAIL-PCR克隆到的一些侧翼序列并不对应于宿主的染色体DNA序列,而是质粒的骨架DNA片段。通过设置1组RB-S4/AC1或者LB-A4/AC1对照反应,用PCR方法鉴定了hiTAIL-PCR扩增产物中位于T-DNA侧翼的质粒骨架片段。在后续分析中,通过排除这些片段,提高了利用hiTAIL-PCR获得宿主染色体DNA片段的效率。同时,通过调整反应程序,使得整个PCR的反应时间也大为缩短。在拟南芥(Arabidopsis thaliana)T-DNA突变体drf1侧翼序列的克隆实例中,对照反应的引入将hiTAIL-PCR中需鉴定的22条扩增产物降至4条,效率提高了81.8%。
- 曹媛杨云徐化全刘洋王丹阳
- 关键词：侧翼序列克隆
- 金鱼草中央细胞中线粒体DNA拷贝数的定量被引量：1
- 2016年
- 为探究金鱼草(Antirrhinum majus)中央细胞的线粒体DNA拷贝数,采用竞争型定量PCR技术进行了测定。结果表明,金鱼草中央细胞的体积为(61570±732)μm^3,平均携带(783±25)个拷贝的线粒体DNA,并且中央细胞与卵细胞具有相似的体积/线粒体DNA拷贝数比值。推测金鱼草中央细胞包含如此高丰度线粒体DNA可能是为早期胚乳细胞的发育而储备的。
- 曾紫风孙欢郭雪高龙王丹阳
- 关键词：中央细胞线粒体DNA定量PCR金鱼草
