宛菲
- 作品数：1 被引量：35H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马铃薯腐烂茎线虫特异性分子检测技术研究被引量：35
- 2008年
- 本研究利用通用引物(rDNA1/rDNA2)研究了21个国内甘薯茎线虫(Ditylenchus destructor)群体和1个韩国马铃薯茎线虫(D.destructor)群体的rDNA-ITS序列,从21个国内群体中扩增出2个大小不同的ITS片段,分别约为940 bp和1 100 bp;经克隆、序列测定和分析比对发现其ITS区存在特异性差异,分别命名为A型和B型,其中18个群体DdTH、DdCL、DdJN、DdMY1、DdYX1、DdZZ、DdLN、DdDX1、DdFN、DdYX2、DDSX1、DdDX2、DdXY、DdLL、DdSX2、DdLY、DdMY2和DdPY的ITS扩增产物约为940 bp,称之为A型马铃薯腐烂茎线虫(940 bp),3个群体DdSH,DdTS,DdYS为B型马铃薯腐烂茎线虫(1 100 bp)。设计构建并筛选出A型和B型马铃薯腐烂茎线虫2对特异性引物DdS1/DdS2和DdL1/DdL2,分别扩增出A型马铃薯腐烂茎线虫、B型马铃薯腐烂茎线虫群体的特异片段252 bp和485 bp;引入D3A/D3B作为内标,设计出一步双重PCR检测技术;同时优化了检测体系和PCR反应程序。该技术具有较高的特异性和灵敏性,能快速、准确地检测出不同型的马铃薯腐烂茎线虫群体。
- 宛菲彭德良杨玉文何月秋
- 关键词：马铃薯腐烂茎线虫双重PCR特异性引物
