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易性病女转男的乳房切除术被引量：2: 2011年; 目的:回顾分析易性病女转男型患者乳房切除术的临床资料,探讨乳房切除术在女转男易性病中的疗效及安全性。方法:选择2008年1月～2010年7月间在长征医院整形35例易性病女转男型患者,共70侧乳房切除,主要采用乳晕下"C"形切口、跨乳晕"S"形切口、双环法切口及乳头乳晕游离移植等不同手术方法进行转型手术的乳房切除。手术方法的选择主要依据:①乳房的大小;②乳房皮肤的弹性;③乳房下垂的情况。结果:术后随访6个月,所有易性病患者乳房切除术后并发症较少,术后患者满意度高。结论:乳房皮肤过多、皮肤弹性和乳房下垂是转性患者选择乳房切除术具体手术方法的关键因素,根据不同患者的乳房条件采用不同的手术方法能够提高患者满意度并减少并发症。; 张文俊张盈帆朱晓海江华刘安堂宋艳玲; 关键词：乳房切除术易性病

乳鼠肌源性干细胞向许旺样细胞的诱导分化被引量：1: 2013年; 背景:有证据显示,肌源性干细胞能够促进肌纤维的再生,增强再生肌组织的功能,并具有分化为神经外膜组织细胞和具有许旺细胞表型细胞的潜能。目的:分析许旺细胞条件培液诱导小鼠乳鼠源肌源性干细胞向许旺细胞的分化,探讨其作为神经组织工程的种子细胞的可行性。方法:取C57BL/6乳鼠四肢骨骼肌,采用改良的Preplate技术纯化培养肌源性干细胞,利用抗体Desmin和Sca-1对纯化后的细胞进行免疫细胞化学鉴定。采用许旺细胞条件培液诱导其向许旺细胞分化,并行许旺细胞特异性抗体S100β、P75NTR免疫细胞化学鉴定。结果与结论:从小鼠骨骼肌中分离得到肌源性干细胞,能在体外稳定增殖传代,Desmin和Sca-1免疫细胞化学染色阳性。肌源性干细胞经体外诱导分化后部分细胞S100β、P75NTR染色阳性。说明应用改良的Preplate方法,可从新生小鼠骨骼肌中分离得到肌源性干细胞;采用许旺细胞条件培液能将其诱导分化为许旺样细胞,有可能成为神经组织工程神经较理想的许旺细胞替代物。; 宋艳玲唐乙丁维进王春燕苏志达江华张盈帆; 关键词：干细胞肌源性干细胞诱导分化神经轴突神经组织工程

应用改良差速贴壁法和有限稀释技术分离培养小鼠来源肌源干细胞被引量：3: 2011年; 背景:研究者们通过多种方法从肌组织中分离得到肌源干细胞,并应用于各类组织工程和再生医学研究。目的:结合改良的差速贴壁法和有限稀释技术分离小鼠来源肌源干细胞,并培养其单细胞克隆和亚克隆集落。方法:以新生C57BL/6小鼠四肢作为肌组织取材对象,经三重酶消化和细胞筛过滤,运用改良的差速贴壁法分离出肌源干细胞,予细胞特异标记物以免疫组织化学染色;以有限稀释技术克隆培养的方法,获得稳定的肌源干细胞单克隆和亚克隆集落。结果与结论:差速贴壁培养过程中,肌性细胞占比逐渐增高,首次贴壁1h可以获得足够数量的细胞进行第6次贴壁培养;肌源干细胞需72h左右贴壁生长,经10d左右可以增殖为300～500细胞数量的集落,细胞形态以小圆形细胞为主,并有少量梭形细胞,肌源干细胞能够维持形态并持续增殖;应用有限稀释技术可获得肌源干细胞单克隆和亚克隆集落,肌源干细胞克隆细胞均呈现Desmin染色阳性,Sca-1染色阳性,阳性率为(92.3±4.1)%。提示应用preplate法和有限稀释技术可以分离得到小鼠来源肌源干细胞及其克隆集落。; 丁维进唐乙宋艳玲苏志达李翠刘安堂胡霞江华; 关键词：差速贴壁法克隆亚克隆

女转男易性病的乳房切除术: 目的：回顾分析易性病女转男型患者乳房切除术的临床资料，探讨乳房切除术在女转男易性病中的疗效及安全性。方法：选择2008年1月－2010年7月间在长征整形35 例易性病女转男型患者，共70 侧乳房切除，主要采用乳晕下“C”...; 张文俊张盈帆朱晓海江华刘安堂宋艳玲; 关键词：乳房切除术临床疗效

小鼠水通道蛋白1基因shRNA慢病毒载体构建与鉴定被引量：2: 2013年; 目的应用RNA干扰技术,构建小鼠水通道蛋白1(AQP1)基因重组慢病毒载体并鉴定。方法对小鼠AQP1 mRNA分析,设计合成的单链引物经退火形成双链寡核苷酸序列,连接入经Age I和EcoR I双酶切线性化的pLKO.1-TRC慢病毒质粒载体中,菌液PCR鉴定并经测序验证。测序正确后与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞,收集病毒上清经高速离心浓缩后感染小鼠小胶质细胞BV-2,Western blot法分析筛选有效shRNA序列。结果成功退火合成3对发夹shRNA序列并将其克隆到pLKO.1-TRC载体中,构建重组质粒pLKO-AQP1-SH1、2、3,经菌液PCR鉴定和测序验证载体构建成功。Real-time PCR检测发现重组质粒pLKO-AQP1-SH2感染BV-2细胞后AQP1 mRNA表达最低,Western blot结果进一步验证结果的准确性。结论成功构建出AQP1基因shRNA慢病毒载体。; 章杰江华张盈帆方帆宋艳玲唐乙芦立轩; 关键词：AQP1 慢病毒神经系统损伤

小鼠水通道蛋白1基因慢病毒载体构建及其在神经膜细胞中的表达被引量：2: 2013年; 目的构建表达小鼠水通道蛋白1(AQP1)基因的慢病毒载体,体外感染原代培养的C57BL/6小鼠神经膜细胞,观察是否提高AQP1的表达,为进一步研究AQP1与周围神经系统损伤后水肿的关系奠定基础。方法将小鼠AQP1基因克隆到慢病毒pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP载体,通过PCR和测序鉴定获得连接正确的克隆。将鉴定后的重组表达质粒pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-AQP1与包装质粒psPAX2、pMD共转染293T细胞,制备携带AQP1基因的慢病毒lentivirus-AQP1。体外培养C57BL/6小鼠的神经膜细胞,将lentivirus-AQP1感染神经膜细胞,RT-PCR和蛋白质印迹法检测感染后神经膜细胞AQP1 mRNA和蛋白的表达情况。结果构建的慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-AQP1经PCR鉴定和测序正确。慢病毒lentivirus-AQP1感染神经膜细胞后AQP1表达增加(P<0.05)。结论成功构建了小鼠AQP1基因的慢病毒表达载体,该载体能有效感染神经膜细胞,使AQP1 mRNA和蛋白表达水平增高。; 章杰江华汪汇方帆宋艳玲芦立轩; 关键词：水通道蛋白1 慢病毒神经膜细胞

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宋艳玲