韩晓东
- 作品数：13 被引量：13H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学医药卫生更多>>
- 中间锦鸡儿CiNAC1基因促进转基因拟南芥叶片的衰老被引量：4
- 2018年
- NAC转录因子家族是植物特有的、最大的转录因子家族之一,参与植物生物胁迫和非生物胁迫应答、激素信号转导、植物次生生长、细胞分裂和植物衰老等多种过程,在植物生长发育过程中起着重要的作用。以中间锦鸡儿Ci NAC1基因的过表达拟南芥纯合体株系为材料,以野生型为对照,对Ci NAC1基因功能进行分析。结果发现,乙烯处理后,Ci NAC1基因过表达株系与野生型拟南芥相比,叶片衰老提前、叶绿素含量降低、离子渗透率升高。实时荧光定量PCR检测发现,乙烯处理后Ci NAC1基因过表达株系中与叶绿素降解相关的基因SGR1、SGR2、PPH,以及与衰老相关的基因SAG13、SAG29、ORE1、SINA1、VNI2和乙烯信号途径中的重要转录因子EIN3的表达量均明显高于野生型拟南芥。表明Ci NAC1基因在乙烯诱导的叶片衰老过程中发挥重要作用。
- 岳文冉岳俊燕张秀娟杨杞韩晓东王瑞刚李国婧
- 关键词：NAC转录因子叶片衰老
- 草甘膦施用量对转基因玉米杂草防效、产量以及CP4-EPSPS合酶表达的影响
- 2023年
- 为了解草甘膦施加量对种植于内蒙古农牧业科学院生物育种科研试验基地的转基因玉米杂草防效、产量以及CP4-EPSPS合酶表达量的影响,本文对转基因玉米DBN9936系列远科105品种进行2250 mL/hm^(2)、3000 mL/hm^(2)和3750 mL/hm^(2)41%草甘膦处理,提取并测定远科105D品种中CP4-EPSPS蛋白的表达量,结合施药过程中的药害、除草效果、产量的测定等数据。研究结果表明:转基因玉米DBN9936系列远科105D品种中抗草甘膦蛋白CP4-EPSPS为组成型表达蛋白,在玉米的不同生育期内都能稳定表达,并不与草甘膦的施加量成正比。在喷洒草甘膦后的第45 d进行杂草统计:施加3750 mL/hm^(2)的41%草甘膦可以将田间94.8%的稗、藜、反枝苋、狗尾草、蒺藜等杂草清除掉,而施加3000 mL/hm^(2)的41%草甘膦除草率为93.1%,施加2250 mL/hm^(2)的草甘膦除草率为87.7%。产量数据表明,有效防控草害能提高玉米产量约16%,而不同草甘膦施药量对玉米的增产并不明显。综上,考虑到内蒙古中西部沙壤土中主要杂草的种类和数量,喷洒2250mL/hm^(2)的草甘膦是既节约成本,也能有效除草,并且也不会明显降低产量的一个合适的施药量。
- 王桂花杨淑茜孙宇燕慕安琪韩晓东贺小勇
- 关键词：草甘膦杂草防效
- 生物医药专业硕士实践能力培养模式探索
- 2023年
- 随着生物医药领域的快速发展和产业升级,生物医药专业旨在培养一批具有工程背景的高层次应用型人才。文章通过对培养单位的考核方式、师资队伍、课程设置、实践基地等传统培养模式的弊端进行深度剖析和总结,最终,从课程设置、培养目标、实践基地的建设、双导师制的贯彻以及考核制度的完善等方面进行探索并提出新的培养模式,以提高生物医药专业硕士研究生实践能力的培养成效。
- 韩晓东杨晶张子义
- 关键词：生物医药双导师制
- 不同标签对致病疫霉PiGK5胞外端表达及稳定性的影响
- 2022年
- 马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉的PiGK5蛋白是一类跨膜蛋白,该蛋白在致病疫霉的致病性、无性生殖及有性生殖方面均有重要作用,但其结构与详细功能目前尚未可知。本研究通过PCR扩增PiGK5胞外端编码区,分别构建融合His标签及MBP和His双标签的原核表达载体,比较了不同标签对PiGK5胞外端表达水平、可溶性及稳定性的影响。结果显示,融合His标签的PiGK5胞外端蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中,仅有少量以可溶性蛋白的形式存在,1 L大肠杆菌表达的蛋白总量为28.11 mg,其中可溶性蛋白总量约为2.73 mg,而纯化后可获得纯蛋白量为0.1175 mg。纯化后的重组蛋白稳定性较好,可在96小时内维持蛋白结构稳定。融合MBP、His双标签的PiGK5胞外端蛋白主要以可溶性蛋白的形式存在,1 L大肠杆菌表达的蛋白总量为49.93 mg,其中可溶性蛋白总量约为44.73 mg,而纯化后可获得纯蛋白量为6.0125 mg。但重组蛋白的稳定性较差,仅在1.5小时就出现了蛋白降解现象。因此,虽然融合His标签的PiGK5胞外端蛋白的可溶性蛋白量较低,但重组蛋白更稳定,融合His标签更适合于PiGK5胞外端的原核表达及后续结构与功能研究。本研究比较了不同标签对PiGK5蛋白胞外端表达的影响,建立了该蛋白的原核表达条件,为其结构与功能的研究奠定了基础。
- 张乐乐刘惠荣韩晓东陈阳
- 关键词：致病疫霉标签表达纯化稳定性
- 实验技术人员在实验教学示范中心信息化建设中的重要性被引量：5
- 2019年
- 本文在总结了我校目前实验教学示范中心信息化建设中存在的问题,分析了问题的根源是只注重实验教学硬件资源的配置,忽略了平台实验技术人员队伍的建设,提出了建设信息化实验教学示范中心的关键是建设一支高素质、能力强、负责任的实验技术人员队伍,并提出了相应的建议。
- 韩晓东武春燕
- 关键词：实验教学示范中心教学质量
- 马铃薯钾离子通道蛋白SKT1的原核表达与纯化
- 2017年
- 克隆马铃薯(Solanum tuberosum L.)钾离子通道蛋白SKT1基因片段后原核表达并纯化SKT1蛋白,为进一步研究SKT1的晶体结构与功能,以及与其它钾离子通道蛋白的相互作用奠定基础.以马铃薯试管苗总RNA反转录出的cDNA为模板,PCR扩增SKT1蛋白的胞内区,基因片段为1758bp,构建原核表达载体pET30-SKT1,转化大肠杆菌BL21表达株菌,IPTG诱导表达.经SDS-PAGE检测发现SKT1蛋白主要是以包涵体的形式存在.利用6M盐酸胍对SKT1包涵体进行溶解,利用Ni柱亲和纯化,最后在复性缓冲液中复性.获得了SKT1蛋白,复性得率大于40%,纯度达到95%以上,Western Blotting鉴定正确.
- 张子义李阳王金莲魏耀兰韩晓东
- 关键词：马铃薯原核表达系统包涵体
- 利用酵母双杂交系统筛选NKD1结合蛋白质被引量：2
- 2022年
- 目的:酵母双杂交技术筛选结肠癌细胞中与裸角质层同源蛋白1(naked cuticle homolog 1,NKD1)相互结合的蛋白质,从而进一步了解NKD1。方法:以结肠癌细胞SW480的cDNA为模板,克隆NKD1基因,并将其成功构建在pGBKT7诱饵载体上。利用酵母双杂交技术从结肠癌SW480细胞文库进行筛选。结果:初步筛选获得13个阳性克隆菌株。经测序,在数据库中BLAST比对后,共确定为8种不同基因编码的蛋白片段。回转实验进一步验证了这8种不同基因编码的蛋白均能够激活酵母双杂交系统中的His3、Ade2和LacZ报告基因。这8种不同基因中的4种基因编码的蛋白片段为YWHA蛋白家族成员,其中2种都是编码YWHAE蛋白片段。在结肠癌HCT116细胞中通过免疫共沉淀实验进一步验证,NKD1与YWHAE在结肠癌细胞中可以相互结合。结论:结肠癌细胞中,证实YWHAE是NKD1结合蛋白质,通过调控胰岛素的敏感性,进而调控结肠癌细胞对葡萄糖的摄入。
- 刘迁于华裔沈颖王婉怡王林林韩晓东
- 关键词：酵母双杂交免疫共沉淀
- 中间锦鸡儿肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆和功能鉴定
- 肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是催化木质素合成特异途径的第一个限速酶,对木质素的合成起重要作用。该研究从中间锦鸡儿中克隆得到两个CCR基因,分别命名为CiCCR2和CiCCR...
- 刘坤张子义崔爽韩晓东李国婧王瑞刚
- 关键词：中间锦鸡儿肉桂酰辅酶A还原酶木质素克隆
- 中间锦鸡儿CiABR17基因的克隆及表达分析
- 2017年
- 该研究采用blastn比对方法,从中间锦鸡儿干旱胁迫抑制消减杂交文库筛选出ABA响应蛋白17基因(ABR17)的EST序列。RACE扩增得到cDNA序列594bp,其中ORF为471bp,编码157个氨基酸,预测蛋白质分子量为16.44kD,等电点为4.93,平均疏水指数为-0.126,是一种亲水蛋白。实时荧光定量PCR检测发现,中间锦鸡儿CiABR17基因在脱水、NaCl和热胁迫下均有不同程度表达,说明CiABR17基因与中间锦鸡儿响应逆境胁迫有关;过表达CiABR17拟南芥株系的鲜重、干重和莲座直径均极显著高于野生型株系。
- 刘坤杨杞赵娜韩晓东苏雨萌王瑞刚李国婧
- 关键词：中间锦鸡儿ABR
- 中间锦鸡儿CCR2和CCR3基因的克隆和功能鉴定被引量：1
- 2018年
- 肉桂酰辅酶A还原酶（cinnamoyl-CoAreductase,CCR）是催化木质素合成特异途径的第一个限速酶,对木质素的合成起关键作用。从中间锦鸡儿中克隆了两个CCR基因,CiCCR2和CiCCR3,其中CiCCR2基因开放阅读框为897bp,编码299个氨基酸,CiCCR3基因开放阅读框为966bp,编码322个氨基酸。过表达CiCCR2和CiCCR3转基因拟南芥株系幼苗期和成熟期木质素含量均高于野生型,组织化学染色也表明转基因株系木质素积累较野生型拟南芥多,且转基因株系鲜重和干重显著高于野生型。
- 刘坤崔爽杨飞芸韩晓东王瑞刚张子义
- 关键词：肉桂酰辅酶A还原酶克隆木质素中间锦鸡儿
