许登高
- 作品数:4 被引量:9H指数:1
- 供职机构:青岛农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金'泰山学者'建设工程专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 小鼠adiponectin的甲基化敏感性检测及其启动子克隆被引量:1
- 2013年
- 本试验通过对脂肪组织特异表达的脂肪因子adiponectin调控区域4个CpG位点在心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、腹脂、内脏脂肪中的甲基化程度以及adiponectin mRNA表达水平的检测,表明adiponectin在mRNA水平的表达与其调控位点的甲基化程度显著相关;同时采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂联素的启动子,通过DNA重组技术将该基因的启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-P(adi)重组质粒,通过分子克隆测序方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测表明P(adi)具备驱动报告基因表达的活性,为今后制备转基因动物的研究奠定基础。
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- 关键词:转基因动物
- 脂肪组织特异性表达载体的构建
- 2012年
- 采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂肪酸结合蛋白ap2基因增强子和启动子,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-ap2重组质粒,通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度。结果表明,本实验克隆的ap2基因增强子和启动子的碱基组成与GenBank中的ap2基因序列完全一致,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,成功构建了脂肪组织特异表达的重组质粒。为以后的转基因动物的研究奠定了基础。
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- 关键词:增强子启动子
- 脂肪组织特异的甲基化敏感型启动子对外源基因表达的影响
- 目的 本实验通过对adiponectin、Leptin、Smaf-1、chemerin、vaspin基因甲基化位点甲基化程度测定以及其mRNA在不同组织中表达量的荧光定量检测,分析其甲基化水平与mRNA表达的相关性,通过...
- 董焕声许登高周扬潘庆杰
- 哺乳动物CpG岛甲基化研究进展被引量:8
- 2012年
- DNA甲基化修饰是一种重要的表观遗传修饰,对基因表达调控具有重要影响作用。在哺乳动物中,DNA甲基化主要发生在CpG岛,其通过影响染色质结构、DNA构象、稳定性以及与蛋白质相互作用方式等来发挥作用,调控基因的表达。在转基因动物中,外源基因的表达与DNA的甲基化密切相关,CpG岛甲基化介导的基因沉默往往使外源基因不表达或低表达。而在人类基因组中异常的DNA甲基化常常伴随着疾病的发生。本文通过对哺乳动物中CpG岛甲基化研究现状及甲基化调控基因表达可能的分子机制进行了综述,并对其发展趋势及应用前景进行了展望。
- 许登高周扬潘庆杰
- 关键词:哺乳动物CPG岛甲基化