李至敏
- 作品数：13 被引量：10H指数：2
- 供职机构：江西农业大学理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- “转识成智”制药工程专业人才培养模式的实践与探索被引量：1
- 2020年
- 在地方农林院校中,通过开展"转识成智"的教育实践与探索,研究新型教学模式下制药工程专业学生成长成才的培养路径和发展方向。制药工程专业应从目前自身情况和实际需要出发,进行培养目标和人才培养模式的创新改革,以适应建设创新型国家的综合性人才需求。
- 李志敏胡紫微刘志文王艺霖李至敏
- 关键词：转识成智制药工程
- 指状青霉草酰乙酸水解酶的结构特征与原核表达分析被引量：1
- 2021年
- 利用生物信息学技术手段分析了柑橘绿霉病病原菌指状青霉(Penicillium digitatum)中草酰乙酸水解酶(Pd OAH)的二级和三级结构,并利用分子生物学技术对重组的Pd OAH进行了原核表达分析和分离纯化。生物信息学分析结果表明Pd OAH的建模结构的质量较高,与其它来源的草酰乙酸水解酶的氨基酸序列具有高度的同源性,且在活性中心氨基酸残基高度保守。重组Pd OAH蛋白在大肠杆菌中进行原核表达,在16℃、0.2 mmol/L IPTG浓度条件下具有较高的表达量,并且有一定的可溶性。利用亲和层析技术分离纯化方法获得了纯度较高的重组Pd OAH蛋白。
- 胡紫微李至敏张梦洁徐依婷李志敏
- 关键词：生物信息学分析蛋白纯化
- 制药工程专业药物分析实验“自制胶囊的质量控制与分析”研究
- 2018年
- 本文对制作混合药物胶囊的重要性做了简明阐述,探讨了制备混合胶囊的方法,并应用化学分析的方法检测学生自制胶囊的药效。对于制药工程专业学生专业水平培养和跨学科综合素质培养都具有重要意义。
- 李志敏张伟黄婷许文武李至敏
- 关键词：胶囊
- 柑橘果实采后绿霉病防治研究进展被引量：2
- 2018年
- 柑橘类水果的采后病害在贮藏和运输期间会造成相当大的损失。绿霉病是柑橘类水果主要的采后疾病。综述植物源提取物、微生物保鲜剂、天然化合物、食品添加剂、公认安全化合物等物质在柑橘果实采后绿霉病防治中的应用情况。2种或多种方法的联合使用将是柑橘绿霉病防治的发展方向之一。
- 雷国风李至敏王小琴李志敏
- 关键词：柑橘天然化合物食品添加剂拮抗菌
- 农业院校化学类大型仪器开放模式探讨被引量：1
- 2018年
- 基础化学实验作为农业院校的公共基础课在提高学生综合素质和就业能力方面有重要的作用。本文结合农业院校大学生就业现状和化学学科的特点,提出将化学类大型仪器开放对全校本科生开放,提高化学及相关专业学生的动手实践能力和就业能力。文章主要从大型仪器开放对大学生就业竞争力的影响因素、大型仪器向本科生开放存在的问题和改进措施等方面进行了探讨。
- 董爱琴肖伟刘倩李至敏王文敏
- 关键词：实践教学就业
- 集胞藻PCC6803中α-酮戊二酸脱羧酶的原核表达分析
- 2020年
- 【目的】α-酮戊二酸脱羧酶(α-ketoglutaric acid decarboxylase,α-KGD)是蓝细菌三羧酸循环途径中的一个关键酶。试验旨在优化集胞藻PCC6803中sll1981基因编码蛋白的原核表达方法,并对不同表达方法获得的重组sll1981蛋白进行活性测定。【方法】利用分子生物学技术构建含有sll1981基因的多种表达载体,通过SDSPAGE分析这些表达载体在大肠杆菌表达系统中的表达和可溶性情况,利用Ni-NTA亲和层析分离纯化重组sll1981蛋白,然后通过酶偶联法测定重组sll1981蛋白的催化活性。【结果】含有sll1981基因的不同表达载体在大肠杆菌表达系统中的表达良好,然而重组sll1981蛋白的可溶性和催化活性差异较大。【结论】当pET28bsll1981质粒与pTf16分子伴侣质粒在大肠杆菌中共表达时重组sll1981蛋白的可溶性和催化活性均为最佳。酶动力学测试表明集胞藻PCC6803中sll1981基因编码蛋白具有α-酮戊二酸脱羧酶功能。为进一步研究α-酮戊二酸脱羧酶的结构功能关系及催化机制提供重要基础。
- 张伟刘志文王小琴李至敏谢琮琮李志敏
- 关键词：集胞藻PCC6803原核表达分子伴侣
- 集胞藻PCC6803中N-乙酰鸟氨酸转氨酶的生化表征及结构分析
- 2021年
- 旨在对集胞藻PCC6803中slr1022基因编码的N-乙酰鸟氨酸转氨酶进行生化表征及结构分析,为进一步研究该酶的催化功能及机制奠定理论基础。以集胞藻PCC6803基因组为模板,通过PCR扩增获得slr1022基因,将其连接到表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态。经IPTG诱导,Ni-NTA亲和层析纯化后获得重组Slr1022蛋白,然后通过紫外分光光度法对Slr1022蛋白的催化功能进行表征,并运用生物信息学软件对该蛋白进行结构分析。成功构建pET28a-slr1022重组表达质粒,并诱导表达重组Slr1022蛋白,SDS-PAGE电泳鉴定该蛋白分子量约为50 kD,与理论大小相符。Slr1022蛋白与底物N-乙酰鸟氨酸的结合常数K_m和最大反应速度V_(max)分别是0.12 mmol/L和0.60 μmol/(L·s),并且Slr1022蛋白与另一底物α-酮戊二酸的K_(m)和V_(max)分别是0.039 mmol/L和0.65 μmol/(L·s)。Slr1022蛋白在pH 8.5时催化活性最强。Slr1022蛋白和其他来源的N-乙酰鸟氨酸转氨酶氨基酸序列有一定的同源性,而且活性位点的氨基酸残基高度保守。成功克隆并表达纯化出Slr1022蛋白,酶学性质和生物信息学研究表明Slr1022蛋白为N-乙酰鸟氨酸转氨酶。
- 白福美李至敏王小琴胡紫微鲍玲玲李志敏
- 关键词：原核表达集胞藻PCC6803
- 蓝杆藻ATCC 51142中α-酮戊二酸脱羧酶的克隆与表达被引量：1
- 2018年
- α-酮戊二酸脱羧酶催化α-酮戊二酸的非氧化脱羧生成琥珀酸半醛,其在琥珀酸半醛脱氢酶的作用下转化为琥珀酸,蓝藻的三羧酸循环由于这2个酶的存在而变得完整。Blast序列分析发现,蓝杆藻ATCC 51142中cce4227基因编码α-酮戊二酸脱羧酶。为了证实cce4227基因编码蛋白的催化功能,从蓝杆藻ATCC 51142基因组中克隆cce4227基因,然后构建pET28a-cce4227表达质粒。将该质粒与p Tf16分子伴侣质粒共转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞后进行重组蛋白的诱导表达。利用镍亲和层析方法对cce4227蛋白进行分离纯化,得到纯度> 95%的cce4227蛋白,菌体蛋白收率约为12 mg/g。酶动力学测试表明,cce4227蛋白是1个焦磷酸硫胺素(TPP)依赖型的α-酮戊二酸脱羧酶。
- 谢琮琮许文武李至敏王小琴雷国风张伟黄婷李志敏
- 关键词：基因克隆蛋白质纯化
- 蓝杆藻ATCC51142中琥珀酸半醛脱氢酶的原核表达及生化表征
- 2019年
- 【背景】蓝藻中生成琥珀酸的三羧酸循环途径与其他物种不同。由于α-酮戊二酸脱羧酶和琥珀酸半醛脱氢酶的存在使得蓝藻的三羧酸循环途径变得完整。琥珀酸半醛脱氢酶催化琥珀酸半醛氧化为琥珀酸,在蓝藻中广泛存在。【目的】克隆、表达和纯化蓝杆藻ATCC51142中cce4228基因编码蛋白,并对其进行生化表征。【方法】以蓝杆藻ATCC51142基因组为模板克隆得到cce4228基因,将其插入到原核表达载体pET-28a上,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中进行异源表达,利用Ni-NTA树脂纯化cce4228蛋白。运用紫外分光光度法和生物信息学方法表征重组cce4228蛋白生化特性。【结果】构建了pET-28a-cce4228重组表达质粒,重组cce4228蛋白在大肠杆菌中得到可溶性表达,获得了纯度大于90%的cce4228蛋白。酶动力学测试和生物信息学分析结果显示,cce4228蛋白是一个NADP+-依赖型的琥珀酸半醛脱氢酶。【结论】蓝杆藻ATCC51142中cce4228基因编码一个偏好NADP+辅因子的琥珀酸半醛脱氢酶,cce4228蛋白的生化表征结果为进一步深入研究cce4228蛋白的结构功能关系及催化机制奠定了基础。
- 谢琮琮李至敏王小琴雷国风张伟李志敏
- 关键词：原核表达
- 鱼腥藻PCC 7120中all3556蛋白的表达与纯化被引量：1
- 2017年
- 琥珀酸半醛脱氢酶在生物体中发挥重要的生理功能。通过BLAST序列分析,发现鱼腥藻PCC 7120中all3556基因编码琥珀酸半醛脱氢酶。实验通过常规PCR从鱼腥藻PCC 7120基因组中克隆了all3556基因,将该基因构建到p ET-28a载体上并在大肠杆菌BL21(DE3)菌体中表达。经过SDS-PAGE电泳,结果表明:all3556蛋白可以在该表达体系中高效可溶性表达。利用镍亲和层析纯化方法得到了纯度大于95%的all3556蛋白,蛋白收率约为27 mg/g菌体。研究为进一步阐明all3556蛋白的催化功能及机制奠定了重要基础。
- 王小琴李至敏雷国风李志敏
