李思强
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：贵州师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗氧化剂对牛卵巢颗粒细胞凋亡的抑制作用及凋亡机制的初步研究
- 2011年
- 研究抗氧化剂对血清饥饿诱导体细胞凋亡的抑制作用,并初步研究凋亡机制。体细胞为牛卵巢颗粒细胞,以AnnexinV/FITC法染色,流式细胞仪检测凋亡。在10%FCS和0.5%FCS血清浓度下,第5代细胞在添加抗氧化剂维生素E、硒和谷胱苷肽后培养2 d,检测细胞凋亡率。结果显示:添加有维生素E、硒和谷胺酰胺的10%FCS培养的牛卵巢颗粒细胞凋亡率较对照组低,但差异不显著(P>0.05)。在0.5%FCS饥饿诱导处理的颗粒细胞试验组,对照组的细胞凋亡率显著高于维生素E、硒和谷胺酰胺试验组(P<0.05)。培养液中添加z-VAD-fmk能够显著降低0.5%FCS试验组的细胞凋亡率(P<0.05)。说明在培养过程中添加抗氧化剂能有效抑制因血清饥饿诱导而产生的牛颗粒细胞凋亡,血清饥饿诱导细胞产生凋亡的过程包括caspase的激活。
- 高国龙张敏李思强杨利国
- 关键词：抗氧化剂颗粒细胞血清饥饿凋亡
- 牛卵泡微环境对颗粒细胞和卵母细胞及早期胚胎发育的影响
- 本试验研究了卵泡微环境对颗粒细胞与卵母细胞质量及体外受精胚胎发育的影响。颗粒细胞以Annexin-V-FITC/PI法染色,流式细胞仪检测细胞凋亡。Hoechst33342染色观察卵母细胞核形态。结果如下:<3mm和>1...
- 高国龙张敏李思强王海艳
- 关键词：微环境颗粒细胞体外受精
- 利用伴刀豆球蛋白检测O-甘露糖基化被引量：1
- 2011年
- 目的:基于伴刀豆球蛋白A(ConA)特异性识别并结合甘露糖的特性,建立一种检测O-甘露糖基化的方法,为酵母等宿主表达蛋白的O-糖基化提供一种高效筛选和分析的方法。方法:利用糖苷酶F(PNGF)切除检测蛋白的N-糖链,排除N-糖基化的干扰;通过Q阴离子交换柱和ConA Sepharose 4B柱纯化Western印迹膜封闭蛋白牛血清白蛋白(BSA),除去BSA中甘露糖修饰的蛋白的干扰,优化膜封闭条件;利用辣根过氧化物酶标记的ConA检测具有低甘露糖型N-糖基化修饰能力的毕赤酵母GJK01-HL(Δoch1)表达的抗Her-2抗体是否存在O-甘露糖基化现象。结果:通过PNGF酶切处理,可以完全去除糖蛋白的N-糖链的干扰;BSA经过Q阴离子交换柱和ConASepharose 4B柱纯化后,除去了大部分甘露糖蛋白,可作为封闭蛋白;用建立的方法检测,发现毕赤酵母工程菌GJK01-HL(Δoch1)表达的抗Her-2抗体存在O-甘露糖基化现象。结论:本方法是研究糖蛋白是否发生O-甘露糖基化的有效检测手段,可用于酵母等表达蛋白的O-糖基化的高效筛选和分析。
- 李思强巩新唱绍红吴军刘波高国龙
- 关键词：伴刀豆球蛋白A
- 牛卵泡微环境对颗粒细胞和卵母细胞及早期胚胎发育的影响
- 2011年
- [目的]研究卵泡微环境对颗粒细胞与卵母细胞质量及体外受精胚胎发育的影响。[方法]从不同直径大小的卵泡中收集卵母细胞和颗粒细胞,Hoechst33342染色观察卵母细胞核形态;采用Annexin-V-FITC/PI法染色、流式细胞仪检测颗粒细胞的凋亡情况;进行受精卵体外培养,并计算受精率及受精卵的囊胚率。[结果]大卵泡(>10 mm)和小卵泡(<3 mm)内颗粒细胞凋亡率明显高于3～7和7～10 mm卵泡内的颗粒细胞凋亡率(P<0.05)大卵泡和小卵泡内的大量卵母细胞呈现出染色质固缩、核碎裂及胞浆浓缩等凋亡特征。3～7和7～10 mm卵泡内的卵母细胞成熟率明显高于大卵泡和小卵泡(P<0.05)。来源于不同直径卵泡的卵母细胞,其卵裂率和囊胚率差异均不显著。[结论]卵泡微环境是影响牛胚胎体外生产的主要环节,直径为3～10 mm卵泡内颗粒细胞质量及卵母细胞的体外成熟率较高,卵泡直径对卵母细胞受精及受精卵的早期发育没有影响。
- 高国龙张敏李思强王海艳
- 关键词：微环境颗粒细胞卵母细胞体外受精
- 牛卵泡微环境对颗粒细胞和卵母细胞及早期胚胎发育的影响
- 本试验研究了卵泡微环境对颗粒细胞与卵母细胞质量及体外受精胚胎发育的影响。颗粒细胞以Annexin-V-FITC/PI法染色,流式细胞仪检测细胞凋亡。Hoechst33342染色观察卵母细胞核形态。结果如下:＜3 mm和＞...
- 高国龙张敏李思强王海艳
- 关键词：微环境颗粒细胞体外受精
