刘浩 作品数:7 被引量:55 H指数:6 供职机构: 广东工业大学轻工化工学院生物工程系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
黄粉虫蛋白提取物纤溶活性及性质研究 被引量:9 2011年 目的研究黄粉虫蛋白提取物的纤溶活性及其性质。方法通过生物化学方法从黄粉虫Tenebrio molitorLinne组织分离纯化出纤溶活性蛋白,纤维蛋白平板法测定其纤溶性,对其进行溶血性、体外溶栓实验和血管生成抑制作用实验,并对其部分性质做了研究。结果分离纯化得到纤溶性蛋白。结论黄粉虫蛋白提取物具有纤溶性,该成分在40℃下基本稳定,最适反应温度为25~45℃,最适pH为7.5~8.0。其溶血率小于5%,不引起体外红细胞的明显溶血,安全性好。黄粉虫蛋白提取物受尿素和巯基乙醇(BME)的影响,而Na+,Mg2+,K+及Ca2+等各种金属离子及EDTA对其影响不大。 陈雅雄 谭竹均 韩雅莉 黄锦兵 刘浩 黎子蔚 吴艳玲 汪威关键词:抗血栓 血管生成 地鳖纤溶活性蛋白(EFP)的分离纯化、红外光谱分析及抑制鸡胚尿囊膜(CAM)血管生成研究 被引量:13 2009年 以传统中药材地鳖为原料,采用匀浆、盐析、硫酸铵分段沉淀、透析和DEAE-52纤维素离子层析等纯化方法,从其体内分离纯化得到一种纤溶活性蛋白(Fibrinolyric protein of Eupolyphaga sinensis Walker,EFP),采用SDS-PAGE电泳法对该蛋白进行了分子量和纯度测定,结果表明,从地鳖中提取纯化的EFP为相对分子量为41300的单一成分,具有明显的纤溶活性,由蛋白质和糖的红外光谱特征吸收峰可推断EFP为一种糖蛋白.EFP对鸡胚尿囊膜新生血管生成有良好的抑制作用,比阳性对照组(地塞米松组)对鸡胚生长发育影响要小.地鳖虫纤溶活性蛋白组分具有抑制血管生成的作用,有可能用于肿瘤治疗. 李穗晶 韩雅莉 张冬梅 刘浩 黎子蔚关键词:血管生成 红外光谱 地鳖纤溶活性蛋白对荷瘤小鼠肿瘤微血管密度及血管内皮细胞生长因子表达的影响 被引量:9 2011年 目的:研究地鳖纤溶活性蛋白(EFP)对H22和S180荷瘤小鼠肿瘤组织微血管密度(MVD)及血液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,以判定EFP是否具有抗肿瘤新生血管生成作用。方法:建立H22荷瘤小鼠动物模型,采用免疫组化方法标记CD34,检测了EFP对小鼠H22和S180肿瘤组织MVD的作用情况,采用双抗体夹心ELISA法检测H22和S180荷瘤小鼠血清中VEGF含量。结果:与对照组相比,EFP可显著降低MVD及VEGF的表达。结论:EFP有抑制肿瘤新生血管形成的作用。 曹付春 韩雅莉 陈冰 刘浩 丁鸿 黄明星 叶韵关键词:H22细胞 S180细胞 微血管密度 血管内皮细胞生长因子 地鳖纤溶蛋白对荷S_(180)和H_(22)小鼠的抑瘤作用研究 被引量:8 2010年 目的研究地鳖虫纤溶活性先导蛋白(EFP)对荷S180和H22小鼠肿瘤的抑制作用。方法通过体外实验,构建荷瘤小鼠模型,药物实验分为阳性对照组(环磷酰胺),阴性对照组(生理盐水),药物高浓度组、中浓度组和低浓度组。实体瘤通过瘤重计算抑瘤率,腹水瘤通过细胞浓度计算抑瘤率。结果 EFP对S180腹水瘤有较好的抑制率,药剂量为2.90mg/kg的抑制率为69.56%,明显高于环磷酰胺(20mg/kg)的51.75%的抑制率;EFP对S180实体瘤有较好抑制作用,药剂浓度为1.45g/kg时,抑制率为37.48%,高于环磷酰胺(20mg/kg)的35.59%的抑制率,并呈现一定的药物剂量依赖性;药剂浓度为0.73mg/kg时,对H22实体瘤抑瘤率为41%,高于环磷酰胺(20mg/kg)的37%的抑制率。结论 EFP对荷S180和H22小鼠肿瘤有较好的抑制作用。 刘浩 韩雅莉 丁鸿 黎子蔚关键词:S180细胞 H22细胞 抑瘤作用 地鳖纤溶活性蛋白的溶栓、溶血与抑瘤作用研究 被引量:14 2010年 目的:从地鳖虫中分离纯化得到纤溶活性蛋白(EFP),并研究其溶栓、溶血及对小鼠S180腹水瘤细胞的抑制作用。方法:通过硫酸铵分段盐析、DEAE-纤维素柱层析等方法从地鳖虫中分离纯化得到一种地鳖虫纤溶活性蛋白,对其进行了溶栓、溶血实验,采用MTT法和集落形成法研究了EFP对小鼠S180腹水瘤细胞的抑制作用。结果:分离得到的EFP分子量为87.2 kDa,具有一定的溶栓和溶血作用,并且其溶栓和溶血作用都具有浓度依赖性,低浓度(≤0.12mg/mL)的EFP不具有溶血作用。且EFP对S180腹水瘤细胞生长及集落形成都有抑制作用。结论:地鳖纤溶活性蛋白具有较强溶栓活性和微弱的溶血性,且对小鼠S180腹水瘤细胞有一定的抑制作用。 黎子蔚 韩雅莉 刘浩 丁鸿关键词:纤溶活性 溶血栓 溶血 抑瘤作用 地鳖纤溶活性蛋白对S180和H22荷瘤小鼠肿瘤的抑制及诱导细胞凋亡作用 被引量:5 2011年 目的研究地鳖虫纤溶活性蛋白(fibrinolytic proteinsof Eupolyphaga sinensis,EFP)对肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法采用纤溶平板法检测了EFP纤溶活性;采用流式细胞术检测了EFP高、中、低浓度对小鼠S180和H22实体瘤组织细胞凋亡的诱导作用;采用免疫组织化学法检测了Caspase-3的表达;采用TRAP-PCR银染法检测了腹水瘤组织端粒酶活性。结果 EFP对S180和H22实体瘤有一定的抑瘤作用,对H22和S180腹水瘤细胞端粒酶活性有一定降低作用,可提高Caspase-3表达水平,诱导细胞凋亡。结论 EFP具有诱导S180和H22肿瘤细胞凋亡作用。 韩雅莉 曹付春 余磊 叶韵 张卫丽 黄明星 刘浩 黎子蔚关键词:S180 H22 少棘蜈蚣活性蛋白提取及纤溶作用性质研究 被引量:9 2009年 目的研究少棘蜈蚣活性蛋白的纤溶性及其性质。方法通过硫酸铵分段盐析、DEAE纤维素柱和Sephadex G-75柱层析从少棘蜈蚣Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch组织分离纯化出纤溶性活性蛋白,纤维蛋白平板法测定其纤溶性,SDS-PAGE测定样品纯度和分子量,温度、pH改变对少棘蜈蚣纤溶性蛋白活性的影响。结果分离纯化到一种相对分子质量约为48.3 kD的纤溶性蛋白,水解纤维蛋白的比活力为42.36 u/mg。结论少棘蜈蚣活性蛋白具有纤溶性,该成分在40℃下基本稳定,最适温度35℃,最适pH8.0。 刘兵 谭竹钧 陈明军 刘浩 陈雅雄关键词:活性蛋白 纤溶活性