高品
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 枯草芽孢杆菌醛缩酶的克隆表达、纯化、酶学性质研究及应用被引量：1
- 2017年
- 果糖-1,6二磷酸醛缩酶是糖酵解途径中的关键酶,可催化果糖-1,6二磷酸(FDP)分解成磷酸二羟丙酮(DAP)和三磷酸甘油醛(G3P)的可逆反应.本文首次克隆枯草芽孢杆菌中的果糖-1,6二磷酸醛缩酶基因(fba),构建原核重组表达载体,利用Ni-NTA柱对重组枯草芽孢杆菌果糖-1,6二磷酸醛缩酶(FBA)进行分离纯化和酶学性质研究,构建表达载体pET28a(+)-fba转化入BL21(DE3)宿主内,在30℃下诱导表达,通过SDSPAGE检测FBA纯度和分子量,FBA分子量约为35 kDa.最适反应条件为pH 7.5、35℃,金属离子K^+、Na^+、Fe^(2+)对该酶有较好的激活作用,而Zn^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)对该酶有一定的抑制作用.基于FBA可专一性分解FDP的基本原理,建立了快速、准确测定酵母发酵液中FDP含量的单酶法.通过单酶法测定FDP含量的样品回收率为99.54%,相对标准偏差为0.427%,测定结果基本不受样品中其他成分干扰.T检验结果表明,单酶法和多酶法对发酵液中FDP含量的检测结果无显著差异,与紫外分光光度法测定的结果存在显著差异,这说明单酶法可以准确测定发酵液中FDP的含量.单酶法测定FDP含量具有快速、准确、灵敏的特点,不仅适合于成分复杂的发酵液中FDP含量的测定,也具有广泛的应用价值.
- 高品赵杰韦光绪殷志敏
- 关键词：酶学性质FDP
- 利用枯草芽孢杆菌发酵生产γ-聚谷氨酸被引量：5
- 2017年
- 利用实验室筛选得到的一株枯草芽孢杆菌发酵生产γ-聚谷氨酸(γ-PGA),主要对其发酵工艺参数进行了优化。先通过单因素优化及PB试验筛选重要因子,然后利用Box-Behnken优化发酵工艺最佳组合,获得了最佳培养基组成和最佳培养条件,且在摇床水平上使γ-PGA产量由最初的6.03 g·L^(-1)提高到10.98 g·L^(-1)。接着通过对补料工艺的探索,确定了最佳补料时间和补料配方,最后在5 L发酵罐上进行了放大生产,最终γ-PGA的最高产量可达到31.18 g·L^(-1)。
- 桑秀梅王晶赵杰高品刘萍殷志敏
- 关键词：枯草芽孢杆菌Γ-PGA发酵工艺优化
