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钙化性主动脉瓣疾病动物模型研究进展被引量：1: 2017年; 钙化性主动脉瓣疾病(CAVD)曾被认为是一种退行性疾病,近年来发现CAVD是主动的病理进程,但具体发病机制尚未阐明。借助动物模型,能在体内复杂的生化环境中研究CAVD的发病机制及可能的治疗手段。选择动物模型多以建模所需时间为主要参考因素,此外还受物种差异、瓣膜组织结构、脂质代谢模式等影响。该文介绍常用的CAVD动物模型构建方法。; 李宁刘晓红龚德军徐志云; 关键词：动物模型

有机磷酸盐-与无机磷酸盐-钙化诱导培养基诱导主动脉瓣膜间质细胞钙化效果的对比研究: 2018年; 目的比较有机磷酸盐(OP)-与无机磷酸盐(IP)-钙化诱导培养基(OIM)诱导主动脉瓣膜间质细胞(AVICs)钙化的效果。方法主动脉瓣膜来源于2017年1—10月在第二军医大学附属长海医院行心脏移植的患者,取外观正常的主动脉瓣膜备用,采用改良的二次胶原酶消化法分离AVICs并随机分为A组和B组,A组采用普通培养基+OP-OIM进行培养,B组采用普通培养基+IP-OIM进行培养。采用茜素红染色检测钙化结节,采用邻甲酚酞络合酮比色法检测钙含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Runt相关转录因子2(RUNΧ2)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法检测RUNΧ2蛋白相对表达量,采用对硝基苯酚比色法检测ALP活性。结果 (1)细胞免疫荧光检测结果显示,分离得到的细胞Vimentin阳性率接近100%。流式细胞术检测结果显示,分离得到的细胞CD31阳性率为1.17%。(2)A组细胞培养21 d可见大量橘红色钙化结节,B组细胞培养7 d可见大量橘红色钙化结节。A组细胞培养21 d和B组细胞培养7 d钙含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)以细胞培养0 d作为对照,A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d RUNΧ2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);但A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d ALP mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)两组细胞培养0 d RUNΧ2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d RUNΧ2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(5)两组细胞培养0 d ALP活性比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d ALP活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论IP-OIM培养7 d与OP-OIM培养21 d诱导的AVICs钙化效果相当,IP-OIM诱导AVICs钙化较OP-OIM缩短14 d,可替代OP-OIM快速有效地建立体外AVICs钙化模型。; 薛清李宁褚恒刘晓红韩林徐志云

钙化性主动脉瓣疾病细胞模型研究进展被引量：1: 2018年; 钙化性主动脉瓣疾病（CAVD）曾被认为是被动的退行性病变,但近来的研究结果显示钙化进程是一个主要由主动脉瓣瓣膜间质细胞（AVICs）主动调控的过程.瓣膜间质细胞（VICs）存在于瓣叶组织中,其主要的功能是维持瓣叶生物功能的稳定.VICs在体外培养时可以发生表型转化,转变为成骨细胞样细胞并形成钙化结节,且多种因素可以调控这一钙化进程.本文将对CAVD的细胞模型作一综述.; 李宁马也刘晓红徐志云

重编程骨髓间充质干细胞治疗缓慢型心律失常的研究被引量：2: 2017年; 目的:利用Tbx18重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞,移植到猪窦房结损毁模型的右室心外膜下心肌,探索治疗缓慢型心律失常的新方法。方法:10只健康未成年猪随机分为实验组和对照组,每组各5只,通过电刀烧灼窦房结建立窦房结毁损模型,实验组移植携带Tbx18基因的骨髓间充质干细胞,对照组移植等量携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的骨髓间充质干细胞。观察两组猪的心率变化及对儿茶酚胺的反应性,免疫荧光法检测细胞移植部位心肌组织中Tbx18的表达。结果:窦房结毁损前,实验组与对照组猪心率无明显差异[(108.8±4.2)次/min对(106.6±6.8)次/min,P>0.05];窦房结毁损后,实验组与对照组猪心率无明显差异[(42.0±7.3)次/min对(43.4±5.1)次/min,P>0.05]。细胞移植后第2周实验组的心率明显高于对照组[(84.0±3.1)次/min对(53.6±2.5)次/min,P<0.05];细胞移植后第3周起实验组心率开始出现下降趋势,但仍明显高于对照组(P均<0.05);细胞移植后第5周两组猪心率无明显差异[(65.2±2.5)次/min对(50.3±2.0)次/min,P>0.05]。细胞移植后第3周时,给予微泵异丙肾上腺素后,实验组心率由(78.0±2.5)次/min上升至(103.0±2.1)次/min,对照组心率由(54.0±3.3)次/min上升至(64.0±2.0)次/min,实验组心率上升幅度明显高于对照组(33.2%对18.5%,P<0.05)。免疫荧光染色可见移植部位心肌细胞表达Tbx18蛋白。结论:将携带Tbx18的骨髓间充质干细胞移植入窦房结损毁猪模型的右室心外膜下,可以显著改善猪的心率,且对异丙肾上腺素具有良好的反应性。; 胡雁南李宁刘良郎希龙张浩; 关键词：生物起搏器基因治疗缓慢型心律失常

细胞外酸碱环境对主动脉瓣膜间质细胞钙化的影响及相关机制研究: 2018年; 目的探究细胞外酸碱环境对主动脉瓣膜间质细胞钙化的影响及相关机制。方法主动脉瓣膜来源于2017年1—6月在第二军医大学附属长海医院心血管外科接受心移植手术的患者,采用二次胶原酶消化法分离主动脉瓣膜间质细胞,采用细胞免疫荧光法和流式细胞术鉴定主动脉瓣膜间质细胞。将传代的主动脉瓣膜间质细胞随机分为A、B、C、D 4组,A组采用普通培养基培养,p H值为7.4,B、C、D组均采用普通培养基+钙化培养基培养,p H值分别为7.1、7.4、7.7。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测4组细胞骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx2)和碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达情况,采用Western Blot法检测4组细胞BMP-2、Runx2蛋白表达情况,采用比色法检测4组细胞ALP活性,采用茜素红染色观察4组细胞钙化结节情况。结果 (1)细胞免疫荧光法检测结果显示,波形蛋白(Vimentin)阳性率接近100%。流式细胞术检测结果显示,细胞CD31阳性率为1.17%。(2)将A组作为对照,C、D组细胞BMP-2、Runx2和ALP mRNA相对表达量高于B组,D组细胞BMP-2、Runx2和ALP mRNA相对表达量高于C组(P<0.05)。(3)B、C、D组细胞BMP-2、Runx2蛋白相对表达量高于A组,C、D组细胞BMP-2、Runx2蛋白相对表达量高于B组,D组细胞BMP-2、Runx2蛋白相对表达量高于C组(P<0.05)。(4)B、C、D组细胞ALP活性高于A组,C、D组细胞ALP活性高于B组,D组细胞ALP活性高于C组(P<0.05)。(5)茜素红染色结果显示,A组细胞钙化结节较少,B、C、D组细胞钙化结节逐渐增多;与C组相比,B组钙化结节明显减少,D组钙化结节明显增多。结论细胞外酸性环境可抑制主动脉瓣膜间质细胞钙化,碱性环境则可促进主动脉瓣膜间质细胞钙化,其机制可能与细胞外酸碱环境影响BMP-2信号通路有关。; 薛清李宁褚恒刘晓红韩林徐志云; 关键词：心脏瓣膜间质细胞

主动脉瓣置换术后患者腹胀原因分析及不同减压方法的疗效比较: 2018年; 目的分析主动脉瓣置换术后患者出现腹胀的原因，比较不同减压方法在主动脉瓣置换术后中重度腹胀患者中的疗效。方法①选取2015年01月至2017年01月期间在我科行主动脉瓣置换术的患者，多因素Logistic regression分析腹胀的危险因素。②上述研究对象中术后出现中重度腹胀并需要胃肠减压的患者，随机分为2组，分别选用不同的减压方法：A组经鼻置入小肠减压管，B组经鼻置入普通胃管。比较2组患者腹胀缓解有效率以及缓解时间。结果①498例主动脉瓣置换术后患者出现腹胀132例，发生率为26.5%。多因素Logistic regression分析显示术后持续镇静/肌松时间≥72h是腹胀的独立危险因素。② A组52例患者腹胀缓解41例，缓解有效率为78.8%，缓解时间为46.9±18.6h；B组51例患者腹胀缓解30例，缓解有效率为58.8%，缓解时间为55.2±21.4h。A组腹胀缓解有效率明显高于B组，且缓解时间明显短于B组，差异有统计学意义。结论主动脉瓣置换术后患者持续镇静/肌松时间≥72h是腹胀的独立危险因素。小肠减压管在胃肠减压方面较普通胃管疗效更为显著，心脏术后患者出现腹胀需要胃肠减压时，可优先考虑使用。; 薛清李宁褚恒韩林徐志云; 关键词：主动脉瓣置换术腹胀胃肠减压

主动脉瓣机械瓣置换术后患者妊娠期抗凝治疗的前瞻性研究被引量：4: 2018年; 目的:研究主动脉瓣机械瓣置换术后患者妊娠期的抗凝方案。方法:将2013年1月至2017年1月在长海医院进行产检的主动脉瓣机械瓣置换术后妊娠患者120例随机分为4组,分别选用不同的抗凝方案:A组全孕期口服国产华法林;B组孕12周前皮下注射低分子肝素钙,孕12周后口服国产华法林;C组全孕期口服进口华法林;D组孕12周前皮下注射低分子肝素钙,孕12周后口服进口华法林。各组患者国际标准化比值均控制在1.5~2.0。结果:(1)C组和D组服用华法林的剂量明显低于A组和B组。(2)4组产妇流产、早产、产后出血、血栓栓塞性疾病、死亡的发生率差异无统计学意义。(3)4组新生儿畸形、颅内出血、死亡的发生率差异无统计学意义。结论:无血栓形成高危因素的主动脉瓣机械瓣置换术后患者妊娠期使用华法林安全有效。; 薛清李宁褚恒韩林徐志云; 关键词：主动脉瓣置换术机械瓣华法林

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李宁

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