许畅 作品数:11 被引量:35 H指数:3 供职机构: 湖南师范大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 湖南省科技厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
IL-8对THP-1巨噬细胞共培养SKOV3细胞EMT和Twist1蛋白表达的影响 被引量:2 2018年 目的:研究白介素-8(IL-8)对THP1巨噬细胞共培养卵巢癌SKOV3细胞上皮-间充质转化(EMT)和Twist1蛋白表达的作用。方法:建立THP-1巨噬细胞/SKOV3细胞Transwell共培养系统,并制备共培养条件培养基(Co-CM)。完全培养基、Co-CM、添加重组人IL-8(rhIL-8:10ng/mL)完全培养基或抗-IL-8中和抗体免疫耗竭Co-CM处理SKOV3细胞。蛋白质印迹分析细胞E-cadherin、N-cadherin和Twist1蛋白表达。结果:与完全培养基处理细胞相比,添加重组人IL-8(rhIL-8:10ng/mL)完全培养基或Co-CM处理上调SKOV3细胞N-cadherin和Twist1蛋白表达,并下调E-cadherin蛋白表达。与Co-CM处理细胞相比,抗-IL-8中和抗体免疫耗竭Co-CM处理增高SKOV3细胞E-cadherin蛋白表达水平,与此同时,显著的降低细胞N-cadherin和Twist1蛋白表达水平。结论:IL-8促成THP-1巨噬细胞共培养SKOV3细胞EMT与调控Twist1蛋白表达有关。 李程 许畅 宁映霞 李翔 杨剑锋 陈阿 崔迎红关键词:上皮-间充质转化 IL-8 TWIST1 白杨素调控miR-320和Twist1表达抑制卵巢癌干细胞样细胞体外致瘤功能 被引量:6 2018年 目的 :研究白杨素能否调节miR-320和Twist1表达抑制人卵巢癌SKOV3源性干细胞样细胞体外致瘤能力。方法 :不同浓度白杨素(5.0、10.0和20.0μM)处理肿瘤球培养得到的第2代球细胞即卵巢癌干细胞样细胞。实时定量PCR检测miR-320表达水平。球形成率测定和琼脂集落形成试验评价体外致瘤能力。Western blot分析Twist1蛋白表达。分别用miR-320模拟物或Twist1基因转导探讨白杨素的作用机制。结果 :与亲本细胞相比,SKOV3源性卵巢癌干细胞样细胞miR-320低表达,而Twist1蛋白高表达。白杨素(5、10和20μM)以浓度依赖方式降低SKOV3源性卵巢癌干细胞样细胞球形成率和集落形成率;同时,上调miR-320表达和下调Twist1蛋白表达。miR-320模拟物转染增强白杨素(10μM)的效应。Twist1基因转导能有效逆转白杨素(10μM)的作用。结论 :白杨素通过调控miR-320/Twist1信号轴抑制SKOV3源性卵巢癌干细胞样细胞体外致瘤性。 邓宇傲 陈阿 李秀云 许畅 许畅 曹建国关键词:卵巢癌 白杨素 TWIST 致瘤性 地西他滨对肝癌干样细胞DNMT1表达和自我更新的影响 被引量:2 2018年 目的 :研究DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(Decitabine,DAC)抑制SMMC-7721细胞系肝癌干样细胞(liver cancer stem-like cells,LCSLC)DNMT1表达和自我更新作用。方法 :球细胞培养法测定细胞球形成率。5-甲基胞嘧啶检测法测量细胞甲基化程度。实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹分别分析DNMT1的mRNA和蛋白表达。结果 :与SMMC-7721细胞相比,LCSLC具有更高DNMT1表达水平和更强球形成能力。DAC能抑制SMMC-7721源性LCSLC的DNMT1表达和球形成能力。结论 :DAC可能通过抑制DNMT1表达减弱SMMC-7721源性LCSLC自我更新能力。 许畅 许畅 曹晓诚 邱叶贝 曹晓诚 崔迎红 曹建国 崔迎红关键词:肝细胞癌 肿瘤干细胞 DNMT1 自我更新 木犀草素对MHCC97H源性肝癌干样细胞HADC1活性和自我更新的影响 被引量:2 2020年 目的:本研究旨在阐明木犀草素(LUT)是否通过抑制组蛋白脱乙酰基酶-1(HADC1)活性和表达从而抑制肝细胞癌MHCC97H细胞源性干样细胞(LCSLCs)自我更新能力。方法:LUT(10μM)和HADC1抑制剂曲古抑菌素A(TSA,10μM)单独或联合处理MHCC97H源性LCSLCs。采用比色法测定HADC1活性;实时荧光定量PCR分析HADC1 mRNA表达;蛋白质印记分析HADC1蛋白表达水平;球形成培养法检测肿瘤球形成能力。结果:LUT抑制MHCC97H源性LCSLCs HADC1活性,下调HADC1表达,并抑制其自我更新。与LUT或TSA单独处理组相比,LUT与TSA联合处理协作性下调MHCC97H源性LCSLCs HADC1表达和活性;并显著抑制MHCC97H源性LCSLC球形成。结论:LUT部分地通过下调HADC1活性和表达抑制MHCC97H源性LCSLC自我更新。 邱叶贝 蔡霈 许畅 曹建国 崔迎红关键词:肝癌 肝癌干细胞 木犀草素 蔓荆子总黄酮阻断FoxM1-MMP2信号轴抑制SMMC-7721源性肝癌干样细胞迁移和侵袭 被引量:9 2018年 目的:研究蔓荆子总黄酮(FVTF)对SMMC-7721源性肝癌干样细胞(LCSLCs)迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:体外干细胞培养基悬浮培养得到第2代SMMC-7721源性球细胞用作LCSLCs,用溶媒(0.1%DMSO)做对照,不同浓度FVTF处理LCSLCs,运用细胞迁移试验、Transwell小室侵袭试验检测FVTF对LCSLCs迁移和侵袭能力的影响,采用Western bolt分析Fox M1和MMP2蛋白,探讨FVTF发挥作用的机制。结果:与对照组相比,FVTF能下调Fox M1和MMP2蛋白表达,并显著抑制LCSLCs迁移和侵袭能力,且呈浓度依赖性。结论:FVTF有效抑制SMMC-7721源性LCSLCs的迁移和侵袭能力与阻断Fox M1-MMP2信号轴相关。 周玲利 曹晓诚 袁庆 陈阿 许畅 曹建国 李翔关键词:肝癌干细胞 DFOG对卵巢癌OVCAR3源性球细胞迁移和Twist1/FoxM1表达的影响 被引量:3 2017年 目的 :检查金雀异黄素(genistein,GEN)及其新型合成类似物7-二氟甲氧基-5,4’-二-正辛烷氧基金雀异黄素(7-difluoromethoxyl-5,4'-di-n-octyl genistein,DFOG)对人卵巢癌OVCAR3源性球细胞迁移和Twist1/Fox M1蛋白表达的作用。方法 :Transwell小室细胞迁移试验检测细胞迁移率。蛋白质印迹分析细胞Twist1和Fox M1蛋白表达水平。结果 :与OVCAR3细胞相比,OVCAR3源性球细胞迁移率更高。GEN(40μM)或DFOG(5μM和10μM)抑制OVCAR3源性球细胞迁移。此外,GEN(40μM)或DFOG(5μM和10μM)平行地下调Twist1和Fox M1蛋白表达。结论 :GEN及其类似物DFOG抑制OVCAR3源性球细胞体外迁移与其抑制Twist1和Fox M1蛋白表达相关。 宁映霞 董巍檑 陈阿 许畅 崔迎红 李翔关键词:金雀异黄素 卵巢癌 抑制HADC1介导曲古抑菌素A抑制MHCC97H源性球细胞自我更新 被引量:1 2018年 目的 :确定组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(HADCI)曲古霉素A(TSA)抑制人肝细胞癌MHCC97H源性球细胞组蛋白脱乙酰基酶-1(HADC1)表达以及自我更新作用。方法 :比色法测定HADC1活性;实时荧光定量PCR分析HADC1 mRNA表达;Western blot分析HADC1蛋白表达水平;球形成培养法检测肿瘤球形成能力。结果 :与单层贴壁生长细胞比较,MHCC97H源性球细胞高表达HDAC1,并具有更强自我更新能力。TSA下调MHCC97H源性球细胞HADC1表达,并显著抑制其自我更新能力。结论 :抑制HADC1表达参与曲古抑菌素A抑制MHCC97H源性球细胞自我更新作用。 陈阿 曹晓诚 曹晓诚 邱叶贝 许畅 曹建国 粟晓 曹建国关键词:肝癌干细胞 曲古抑菌素A TWIST1基因敲低对DFOG抑制OVCAR3源性球细胞自我更新和FoxM1表达的影响 被引量:2 2017年 目的:探讨7-二氟甲氧基-5,4’-二-正辛烷氧基金雀异黄素通过下调Twist1/FoxM1表达抑制OVCAR3源性球细胞自我更新作用分子机制。方法:表达TWIST1 sh RNA腺病毒感染OVCAR3源性球细胞敲低TWIST1基因表达。肿瘤球形成试验检查细胞自我更新能力。蛋白质印迹法检测细胞Twist1和FoxM1蛋白表达水平。结果:与OVCAR3细胞比较,OVCAR3源性球细胞具有更强自我更新能力以及高水平表达Twist1和FoxM1蛋白。TWIST1 sh RNA有效抑制OVCAR3源性球细胞肿瘤球形成和下调Twist1和FoxM1蛋白表达。TWIST1 sh RNA协作DFOG(5μM)抑制OVCAR3源性球细胞肿瘤球形成和Twist1和FoxM1蛋白表达。结论:DFOG可能通过调控Twist1表达抑制FoxM1表达,进而抑制OVCAR3源性球细胞自我更新。 董巍檑 宁映霞 陈阿 许畅 崔迎红 李翔关键词:卵巢癌 卵巢癌干细胞 芹菜素抑制Ck2下调p-STAT蛋白表达抑制HeLa源性球细胞自我更新 被引量:3 2019年 目的:研究芹菜素(apigenin,API)是否通过抑制蛋白激酶CK2下调p-STAT3(Ser 727)蛋白表达抑制人宫颈癌HeLa细胞球细胞自我更新能力。方法:实时定量逆转录多聚酶链反应(qRT-PCR)和Western blot分析用或不用API(40μM)处理HeLa源性球细胞CK2αmRNA和p-STAT3(Ser 727)蛋白表达水平。球形成培养检测球细胞的肿瘤球形成率。siRNA沉默CK2α基因表达以探讨API作用分子机制。结果:API显著地降低HeLa源性球细胞球形成率、CK2αmRNA和p-STAT3(Ser 727)蛋白表达水平。特别是API协作CK2αsiRNA下调CK2αmRNA和p-STAT3(Ser 727)蛋白表达和抑制球形成。结论:芹菜素通过抑制CK2下调p-STAT3(Ser 727)蛋白表达抑制人宫颈癌HeLa细胞球细胞自我更新功能。 刘杰 许畅 邱叶贝 曹建国 杨剑锋 张坚松关键词:自我更新 CK2 STAT3 白介素-8对SKOV3细胞系卵巢癌干样细胞特性的影响 被引量:1 2017年 目的:研究白介素-8(IL-8)能否促成人卵巢癌SKOV3细胞系细胞肿瘤干细胞样细胞特性。方法:用添加或未添加重组人IL-8(rh IL-8:10.0 ng/m L)的干细胞条件培养基处理SKOV3细胞。肿瘤球形成和琼脂集落形成试验测定球形成率和集落形成率。蛋白质印迹分析肿瘤干细胞标志蛋白CD133和CD44表达水平。结果:rh IL-8(10.0 ng/m L)显著地增高SKOV3细胞肿瘤球形成率和琼脂集落形成率。此外,rh IL-8(10.0 ng/m L)上调SKOV3细胞CD133和CD44蛋白表达。结论:rh IL-8具有促进SKOV3细胞肿瘤干细胞样细胞特性作用。 杨剑锋 许畅 宁映霞 邓宇傲 李翔 李程 陈阿 崔迎红关键词:卵巢癌 白介素-8 CD133 CD44