刘俊延
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：东南大学医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 深低温冷冻对大鼠髌腱肌腱干细胞干性及多向分化能力的影响
- 2022年
- 目的:研究深低温冷冻对大鼠髌腱肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的干性以及成骨、成脂肪、成软骨和成肌腱分化能力的影响。方法:实验组大鼠髌腱组织用深低温冷冻处理2周,对照组未作特殊处理。从两组髌腱组织中分离培养出TDSCs,采用细胞免疫荧光检测TDSCs干性相关标志物Nanog、Oct4和Sox2的表达,成骨、成脂肪、成软骨诱导分化实验分别检测成骨、成脂肪、成软骨分化能力,细胞免疫荧光和实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测成肌腱能力。结果:两组TDSCs培养7 d(P0代)时均可见大的多边形和星形细胞形态,P3代时均可见均一的成纤维样细胞形态。两组TDSCs均表达干性相关标志物Nanog、Oct4和Sox2,均具有成骨、成脂肪、成软骨和成肌腱分化特性,且两组细胞的干性相关标志物Nanog、Oct4及Sox2的表达和多向分化能力之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:深低温冷冻处理的髌腱组织中检测到有活性的TDSCs,且TDSCs干性和多向分化能力无明显变化,这些发现可能为研究同种异体肌腱移植治疗肌腱缺损中关于内源性修复的存在提供依据。
- 代广春李荥娟刘俊延刘俊延
- 关键词：深低温冷冻肌腱缺损同种异体肌腱移植
- 深低温冷冻对大鼠髌腱组织内肌腱干细胞生物学特性影响的研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨深低温冷冻处理对大鼠髌腱组织中肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的成活、细胞活力、早期凋亡、迁移能力及肌腱相关基因表达的影响。方法取12只4月龄雄性SD大鼠双侧髌腱组织,其中6只大鼠12条髌腱组织(实验组)进行深低温冷冻处理;剩余髌腱组织(对照组)不作处理,作为正常对照。取两组髌腱组织用0.3%Ⅰ型胶原酶消化获得有核细胞,分别用锥虫蓝染色检测有核细胞成活率、结晶紫染色检测有核细胞克隆形成能力;取两组髌腱组织分离培养TDSCs,并传至第3代,采用Alamar Blue法检测细胞体外增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡率;Transwell法检测细胞迁移能力;实时荧光定量PCR检测细胞肌腱相关基因Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col1α1)、scleraxis(Scx)和tenomodulin(Tnmd)m RNA表达。结果与对照组(91.00%±3.63%)比较,实验组原代有核细胞成活率为61.65%±4.76%,差异有统计学意义(t=12.010,P=0.000)。两组有核细胞接种后,均呈克隆样生长;培养12 d,实验组每1 000个有核细胞克隆集落形成数为(8.41±0.33)个,较对照组(15.19±0.47)个显著减少(t=28.910,P=0.000)。实验组TDSCs占活性有核细胞比例为1.37%±0.09%,较对照组1.67%±0.10%显著减少(t=5.508,P=0.003)。第3代TDSCs培养14 d内两组细胞生长趋势一致;两组各时间点吸光度(A)值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组及对照组TDSCs早期凋亡率分别为1.67%±0.06%、1.63%±0.06%,比较差异无统计学意义(t=0.707,P=0.519)。镜下见,两组均有TDSCs黏附于Transwell小室下室,实验组细胞数为(445.00±9.70)个,对照组为(451.50±12.66)个,比较差异无统计学意义(t=0.998,P=0.342)。实验组Col1α1、Scx、Tnmd的m RNA相对表达量分别为3.498±0.065、0.062±0.002、(4.211±0.211)×10–5,对照组分别为3.499±0.113、0.062±0.001、(4.341±0.274)×10–5,比较差异均无统计学意义(t=0.013,P=0.991;t=0.042,P=0.969;t=0.653,P=0.5
- 代广春李荥娟徐宏亮林禹丞刘俊延徐林芮云峰
- 关键词：深低温冷冻肌腱缺损同种异体肌腱移植
