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刘越
作品数:
1
被引量:45
H指数:1
供职机构:
中国农业科学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
孔秀英
中国农业科学院
周荣华
中国农业科学院
骆蒙
中国农业科学院
贾继增
中国农业科学院
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2002
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小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究
被引量:45
2002年
以抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler”BC5F4为材料 ,构建了白粉病菌诱导的普通cDNA文库和抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。分别对两文库进行了一定规模的测序 ,获得普通cDNA文库不重复ESTs 387条和SSHcDNA文库ESTs 76 0条。将获得的ESTs与GenBank序列进行了BLASTn、BLASTx同源性分析。结果表明 :在普通文库中 ,一些参与光合作用与核糖体构成等的基因出现频率较高 ,而获得的抗病相关基因则较少。消减文库在构建方法、抗病相关基因的富集等方面具有明显的优越性 ,是目前抗病基因表达谱研究中的较好方法。利用高密度点阵膜杂交技术对两文库的筛选结果表明 ,该方法具有相对简便易操作、杂交膜可反复使用等优点 ;但也存在mRNA及同位素用量大等问题。经筛选 ,消减文库中有 5 4 1%的功能已知ESTs为抗病相关基因 。
骆蒙
孔秀英
刘越
周荣华
贾继增
关键词:
CDNA文库
杂交筛选
小麦
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