- 饮食因素对幽门螺旋杆菌感染防治的研究进展被引量：8
- 2007年
- 幽门螺杆菌(Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素,也与胃癌和胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤(MALT)的发生密切相关。近年来,Hp耐药问题日益突出。本文综述了蜂蜜、茶叶、生姜、大蒜等饮食因素对Hp感染的防治的研究进展。
- 张晨宇王克霞
- 关键词：幽门螺杆菌饮食因素
- 用酵母双杂交技术筛选HCV核心蛋白与人胰腺cDNA文库结合蛋白基因
- [目的]:用酵母双杂交共转染和配合技术筛选经纯化鉴定的已知人胰腺cDNA文库与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心蛋白(core)相互作用的蛋白的编码基因,为研究HCVcore蛋白基因在HCV感...
- 张晨宇
- 关键词：酵母双杂交
- 文献传递
- 人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白基因的筛选被引量：1
- 2009年
- 目的为进一步研究HCV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础。方法扩增人胰腺cDNA文库并经纯化鉴定后，将文库质粒转化酵母菌株Y187。诱饵质粒pGBKT7-core转化酵母菌株AH109，在色氨酸缺陷型培养基（SD／Trp）上筛选阳性菌落。应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合，在四缺培养基（SD／Trp／Leu／-His／-Ade）和铺有Xα-gal的四缺培养基上进行筛选，提取蓝色酵母菌落质粒，电转化大肠埃希菌DH5 α后再提取质粒测序，测序结果进行序列比对。结果筛选出11种与HCV核心蛋白相结合的蛋白基因，包括胰凝乳蛋白酶原B1前体、羧肽酶A1，胰蛋白酶原2、胰凝乳蛋白C、胰蛋白酶1、羧肽酶B1、驱动蛋j白家族3B、胰蛋白酶2、线粒体蛋白基因、弹性蛋白酶3A、辅脂肪酶。结论在筛选出的HCV核心蛋白结合的人胰腺细胞蛋白基因中，部分与糖、脂代谢密切相关。
- 张锦前张晨宇吴淑玲王琦成军
- 关键词：肝炎病毒丙型病毒核心蛋白质类基因文库
- HBsAg结合胰腺细胞蛋白基因的酵母双杂交技术筛选被引量：1
- 2009年
- 目的应用酵母双杂交技术筛选胰腺细胞cDNA文库中与HBsAg相互作用的结合蛋白的基因。方法扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转入酵母菌Y187;诱饵质粒PGBKT7-HBSAg转入酵母菌AH109。将以上二者进行配合,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade和X-α-Gal培养基上进行双重菌落筛选;提取阳性质粒转化大肠埃希菌DH5α并测序,在GenBank中进行生物信息学分析。结果获得了6个与HBsAg相结合的蛋白,包括顺乌头酸酶、CDK5RAP3、羧肽酶B1、胰脂肪酶、辅脂肪酶、弹性蛋白酶。结论筛选出的胰腺细胞蛋白与2型糖尿病等代谢性疾病有较密切关系,为进一步研究并阐明乙肝病毒(HBV)感染引发糖脂代谢紊乱机制提供了新的思路。
- 王晓春张锦前张晨宇成军王琦李朝品
- 关键词：基因HBSAG酵母双杂交
- 慢性肝炎病毒感染导致糖代谢异常的分子机制被引量：3
- 2008年
- 肝炎病毒慢性持续感染主要是由乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒所致,其可以通过病毒本身的直接作用,胰岛素抵抗、脂类代谢异常等间接作用,炎性因子水平改变、自身免疫反应等免疫相关因素,以及对胰岛素及其受体本身的影响,引发糖代谢相关酶类活性异常从而导致感染慢性肝炎病毒的机体发生糖代谢异常。
- 张晨宇张锦前王克霞成军
- 关键词：糖代谢异常分子机制
- 慢性乙型肝炎患者合并肝脂肪变性的临床病理探讨被引量：4
- 2008年
- 在我国，慢性乙型肝炎是常见的慢性传染病之一，HBsAg携带者达1．2亿人之多。与此同时，我国的脂肪性肝病，特别是非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病率不断攀高，已经位居我国常见肝病的第二位，并且两种病变可以合并存在。目前国内对于慢性乙型肝炎合并肝脂肪变性的临床病理研究资料甚少，本研究对此进行了初步探讨。
- 郎振为石瑞芳刀文彬兰孟东张晨宇石晓虹
- 关键词：慢性乙型肝炎患者肝脂肪变性非酒精性脂肪性肝病HBSAG携带者慢性传染病
- 人肝细胞生长因子转染L02细胞的锌指基因差异表达筛选
- 2010年
- 目的构建人肝细胞生长因子(hHGF)真核表达载体,在L02细胞中表达hHGF并筛选其中的差异表达基因。方法构建pcDNA3.1(-)-hHGF载体,测序鉴定;其转染L02细胞后进行蛋白免疫印迹检测;将pcDNA3.1(-)-hHGF和pcDNA3.1(-)载体分别转染L02细胞后,提取总mRNA并逆转录为cDNA,运用基因表达谱芯片技术分析差异表达基因。结果构建的hHGF真核表达载体pcDNA3.1(-)-hHGF经酶切和测序鉴定正确;转染L02细胞后经蛋白免疫印迹证实hHGF存在明确表达;pcDNA3.1(-)及pcDNA3.1(-)-hHGF分别转染L02细胞后提取总RNA,经基因表达谱芯片分析发现,表达水平显著上调和下调的基因分别有404个和145个,在表达显著上调的基因中包含7种锌指基因。结论筛选出了hHGF转染L02细胞后的差异表达基因,为其作用机制及与锌指蛋白相关性的研究提供了重要依据。
- 吴亮张锦前王琦李国力张晨宇王晓春洪源曾辉成军
- 关键词：人肝细胞生长因子L02细胞锌指基因
- hHGF转染HepG2细胞后基因表达谱差异筛选
- 2008年
- 目的:构建hHGF真核表达载体,并在HepG2细胞中表达,筛选其对HepG2细胞的差异表达基因.方法:构建pcDNA3.1(-)-hHGF载体,测序鉴定;转染HepG2细胞后蛋白免疫印迹检测;运用基因表达谱芯片技术,筛选pcDNA3.1(-)-hHGF和pcDNA3.1(-)载体分别转染HepG2细胞后,提取mRNA并逆转录为cDNA,经表达谱芯片分析差异表达基因.结果:构建的表达载体经酶切和测序确定;转染HepG2细胞后hHGF表达经蛋白免疫印迹证实;经20000个基因的表达谱芯片分析发现,其中有430个基因表达水平显著上调,88个基因表达水平显著下调.结论:筛选出HGF转染HepG2细胞后的差异表达基因,对其在肝细胞中多种作用机制研究提供了重要依据.
- 张维燕张锦前李晓光成军李国力王琦张晨宇王晓春柴艳云
- 关键词：人肝细胞生长因子HEPG2细胞差异基因
- 酵母双杂交技术对人胰腺cDNA文库中HBcAg结合蛋白基因的筛选被引量：10
- 2008年
- 目的:应用酵母双杂交技术,筛选人胰腺cDNA文库中与HBV核心抗原结合的蛋白的基因.方法:扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转化至酵母菌Y187;诱饵质粒pGBKT7-HBcAg转化酵母菌AH109并筛选鉴定.应用酵母双杂交系统3进行配合,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基和含X-gal的SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基上进行双重筛选,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠埃希菌DH5α,提取质粒并测序,对测序结果进行生物信息学分析.结果:人胰腺cDNA文库的构建以及pGBKT7-HBcAg质粒转化AH109酵母菌株均获成功,并从人胰腺cDNA文库中筛选出9个与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因,分别与以下已知的9种编码蛋白基因序列同源:人胰脂肪酶(PNLIP)、人胆盐刺激酯酶(CEL)、人胰凝乳蛋白C(CTRC)、人胰蛋白酶原、人羧肽酶B1(CPB1)、人线粒体全基因组、人胰弹性酶2A、人辅脂肪酶(CLPS)和人核糖体蛋白(RPL10A).结论:筛选出的与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因主要与胰腺外分泌功能相关,HBV感染可能通过与胰腺所分泌的糖、脂类代谢相关的酶类结合,而引发代谢性疾病.
- 张维燕张锦前王琦李国力王晓春张晨宇杨涤成军
- 关键词：HBCAG酵母双杂交技术
- 人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白基因的筛选
- 目的：为进一步研究HCV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础.
方法：扩增人胰腺cDNA文库并经纯化鉴定后,将文库质粒转化酵母菌株Y 187.诱饵质粒pGBKT7-core转化酵母菌株AH109,在色氨酸缺陷型培养基...
- 张锦前张晨宇吴淑玲王琦成军
- 关键词：基因文库胰腺细胞丙型肝炎病毒核心蛋白
- 文献传递
