崔旭
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 海洋生物来源的防御素的研究进展
- 防御素是机体在长期的进化过程中保留下来的古老的宿主防御机制中的重要组成成分，在生物体的先天性免疫系统中发挥重要的作用，是抵御外来微生物入侵的重要物质。防御素是抗菌肽中的一个大家族，是一种富含半胱氨酸的内源性小分子多肽，对...
- 崔旭陶妍
- 关键词：防御素海洋生物生物活性
- 斑点叉尾鮰C型溶菌酶在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性被引量：6
- 2017年
- C型溶菌酶是存在于各种生物组织中的数种溶菌酶成员中的一员,是重要的细胞内免疫蛋白,具有稳定的空间结构和显著的抑菌功能,被认为是良好的食品保鲜剂和饲料添加剂。为了开发鱼类来源的C型溶菌酶,研究建立了基于毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统的斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)C型溶菌酶的制备方法。首先通过PCR获得5'和3'端分别添加Xho I和Xba I酶切位点的编码斑点叉尾鮰C型溶菌酶的c DNA(cflyC),其编码由127个氨基酸残基组成的多肽;将该cflyC与表达载体p PICZαA连接以构建重组表达载体p PICZαA-cflyC;转化至毕赤酵母X-33后,通过不同浓度的博来霉素和对酵母基因组DNA的PCR鉴定,筛选得到高拷贝的酵母转化子;经0.5%甲醇诱导,在p H6.0、29℃、250 r/min下培养144 h,得到的表达产物经固化金属离子亲和层析(IMAC)纯化,得到重组蛋白;经Tricine-SDS-PAGE分析,表明重组蛋白的分子量为15.1 k D;进一步通过MALDI-TOF-TOF质谱鉴定,证明该重组蛋白为预期的重组cflyC。通过福林酚法测得重组cflyC的表达量为2.75 mg/L。琼脂糖凝胶扩散法和酶活力测定证明,重组cflyC对枯草芽孢杆菌具有抑菌活性。本研究首次实现了斑点叉尾鮰C型溶菌酶在毕赤酵母中的重组DNA表达,为其大规模制备奠定了基础。
- 冯亚东陶妍李雯崔旭王强厚
- 关键词：斑点叉尾鮰毕赤酵母抑菌活性
- 紫贻贝大防御素在毕赤酵母中的重组DNA表达
- 大防御素是一种具有广谱抗菌活性的抗菌肽,是参与生物先天性免疫的关键因子,具有杀灭病菌、保护机体的作用。本研究选取双壳类软体动物紫贻贝的大防御素成熟肽基因mMGBD作为研究对象,根据毕赤酵母的密码子偏爱性对该基因进行优化合...
- 崔旭陶妍
- 关键词：紫贻贝毕赤酵母
- 文献传递
