沈兆媛
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
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- 中草药饲料添加剂对异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒的影响被引量：9
- 2018年
- 分别用添加1%穿心莲、黄芪、板蓝根、大黄4种中草药的定制饲料投喂异育银鲫,而后腹腔注射1mL定量为1.08×10~7个/mL的Ⅱ型鲤疱疹病毒,研究这4种中草药对异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒的影响。人工感染后采用实时荧光定量PCR的方法测定血液中的Ⅱ型鲤疱疹病毒滴度。试验结果显示,对照攻毒组鱼体临床症状为胸腹部体表大面积充血,鳃部暗红出血,脾脏肿大、内脏出血等体征,为典型的Ⅱ型鲤疱疹病毒发病症状,且用PCR方法能检测出Ⅱ型鲤疱疹病毒基因组片段。投喂含穿心莲、板蓝根、黄芪、大黄的定制饲料,异育银鲫死亡率分别为15%、30%、35%、95%,对照组死亡率为100%。对照组血液中的病毒滴度高于穿心莲、板蓝根、黄芪,大黄与对照组病毒滴度差别较小。研究结果表明,大黄定制饲料抗Ⅱ型鲤疱疹病毒效果相对较差,黄芪与板蓝根抗病毒效果稍强,穿心莲具有较好的抗Ⅱ型鲤疱疹病毒效果,或可作为抗Ⅱ型鲤疱疹病毒的抗病毒饲料产品用于疾病防控。本研究结果为利用中草药药饵防治异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒提供了一定的理论依据。
- 沈兆媛鲁建飞许丹吕利群
- 关键词：中草药死亡率异育银鲫
- 一株Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及属于生物技术领域，特别涉及一株Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明成功克隆了PGEX‑4T‑3‑ORF92质粒，筛选出一株抗Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的细胞株CyHV‑2‑ORF92‑1B...
- 吕利群沈兆媛姜有声鲁建飞许丹
- II型鲤疱疹病毒ORF4的多克隆抗体制备及其组织分布被引量：2
- 2017年
- 【目的】制备II型鲤疱疹病毒(Cy HV-2)ORF4多克隆抗体,利用免疫学方法研究ORF4编码蛋白在病毒感染过程中的组织表达特征。【方法】利用在线软件SMART和BLASTx分析Cy HV-2 ORF4序列,采用PCR技术从Cy HV-2基因组中扩增得到ORF4基因,克隆至表达载体PGEX-4T-3中,将获得的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,表达产物经过SDS-PAGE和Western blot鉴定,再利用亲和层析法纯化出重组蛋白。用纯化的重组ORF4蛋白免疫新西兰兔,收集兔血,分离兔血清获得抗ORF4蛋白的多克隆抗体,再利用Western blot检测抗体与ORF4蛋白之间的特异性。提取攻毒后的异育银鲫肌肉、脑、鳃、脾脏、肝胰脏、心脏、肾脏等组织DNA,用荧光定量PCR技术监测其病毒在各组织的复制水平。使用RIPA裂解液提取上述各组织总蛋白,再利用Western blot技术检测ORF4在感染Cy HV-2的异育银鲫各组织中的表达情况。【结果】原核表达的重组ORF4蛋白分子量为65 k D,与预期大小一致;获得的ORF4抗血清能特异性识别重组ORF4蛋白。病毒感染的异育银鲫体内ORF4主要表达在肾脏、脾脏和鳃上;荧光定量PCR证明Cy HV-2主要在肾脏、脾脏和鳃上富集。【结论】Cy HV-2的非结构蛋白ORF4可能参与病毒的复制,是病毒复制感染周期的特征性指示蛋白之一,这为深入研究ORF4在Cy HV-2感染过程中的作用机制提供参考。
- 晏文岩鲁建飞孔善云沈兆媛杨雨清吕利群许丹
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 一株Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及属于生物技术领域，特别涉及一株Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明成功克隆了PGEX‑4T‑3‑ORF92质粒，筛选出一株抗Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的细胞株CyHV‑2‑ORF92‑1B...
- 吕利群沈兆媛姜有声鲁建飞许丹
- 文献传递
- 鲤疱疹病毒Ⅱ型单克隆抗体检测方法的建立与中草药防控效果研究
- 鲤疱疹病毒Ⅱ型（Cyprinidherpesvirus2，CyHV-2）是高致病性病毒病疱疹病毒造血器官坏死病（HVHN）的致病病原。近年来，该病毒的爆发给中国异育银鲫养殖业带来了很大的危害，其特点是高致病性、高致死率，...
- 沈兆媛
- 关键词：异育银鲫单克隆抗体病毒检测中草药
