仇静 作品数:16 被引量:59 H指数:5 供职机构: 青岛大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 青岛市医药科研指导计划 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
一种用于检测细胞凋亡信号通路的PCR试剂及其应用 本发明提供了一种用于检测细胞凋亡信号通路的PCR试剂及其应用,本发明所述PCR试剂包括检测ABL1基因、AIFM1基因、AKT1基因、APAF1基因、BAD基因等相关基因和内参基因的PCR反应引物。本发明将涉及细胞凋亡的... 仇静 于江波 袁荣涛 唐永平 陈正岗高糖介导人牙周膜细胞凋亡中bcl2bax的作用及机制英文 被引量:4 2014年 背景:高糖环境下人牙周膜细胞会发生凋亡,其中bcl-2,bax是否启动?如何发挥作用?此方面尚未见有文献报道。目的:应用不同浓度葡萄糖影响人牙周膜细胞,观察细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的变化。方法:原代培养并鉴定人牙周膜细胞,取5-8代细胞用于实验。采用5.5 mmol/L葡萄糖(生理对照组)和25 mmol/L葡萄糖(高糖组)作用细胞24 h和48 h;以Hoechst 33258免疫荧光染色观察人牙周膜细胞凋亡;以Real-time PCR检测bcl-2、bax表达。结果与结论:25 mmol/L葡萄糖促进人牙周膜细胞凋亡,bcl-2、bax表达显著高于对照组(P<0.05);bcl-2/bax比值显著低于对照组(P<0.05)。结果说明高糖可增加人牙周膜细胞凋亡,Bcl-2家族发挥了重要作用。 任伟伟 陈书兰 仇静 卢恕来 刘海蓉 刘世海关键词:牙周膜 细胞凋亡 基因,BCL-2 高糖 人牙周膜细胞 凋亡 p38MAPK信号通路与应力介导成肌细胞的凋亡(英文) 被引量:7 2011年 背景:在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。目的:在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,研究p38MAPK信号通路在成肌细胞凋亡中的作用及其机制。方法:将体外培养的C2C12细胞分为对照组和SB203580组,SB203580组中加入20mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。应用细胞应力加载装置FlecellStrainUnit-5000T给细胞提供15%的力值,分别施加0,6,12,24h的周期性张应力。每分钟10个循环,每循环包括3s牵张,3s松弛。Hoechst33258染色观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测促凋亡基因baxmRNA的表达;Westernblot检测信号通路中p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达。结果与结论:随着加力时间的延长,细胞逐渐出现核固缩及凋亡小体,凋亡率增加(P<0.05),baxmRNA表达增多(P<0.05);细胞p38MAPK和p-p38MAPK蛋白均在加力6h达到最低,此后逐渐升高。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制加力引起的细胞凋亡,减少baxmRNA及p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达(P<0.05)。说明p38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的作用。 田臻 杨竹丽 贾文敏 袁晓 仇静 达雨 杜衍晓 于江波 张月 刘文关键词:C2C12 P38MAPK 周期性张应力 成肌细胞 Rce1基因在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:3 2018年 目的:研究舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)中Rce1基因的表达及与临床分期、肿瘤病理分型及颈淋巴结转移的关系。方法:采用实时荧光定量PCR技术对47例舌癌组织及癌旁组织中的Rce1基因进行检测,并运用Western Blot检测Rce1蛋白的表达。结果:Rce1基因在舌癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05);其表达强度与TSCC病理分型无关(P>0.05);T3~4期患者癌组织中Rce1基因表达强度显著高于T1~2期(P<0.05)。TSCC颈淋巴结转移患者癌组织中Rce1基因表达强度显著高于无转移者(P<0.05)。结论:Rce1基因的表达与舌鳞癌的发生、发展及淋巴结转移相关,可作为患者诊断及预后的参考指标之一。 周元 宋玉波 盛善桂 崔倩 周建华 仇静 王奇民 陈正岗关键词:舌癌 WESTERN BLOT 体验式口腔卫生指导方法在单纯性牙龈炎患者中的应用效果研究 被引量:7 2019年 目的探讨体验式口腔卫生指导方法在单纯性牙龈炎患者中的应用效果。方法选取2017年1—7月于青岛大学医学院附属青岛市市立医院口腔医学中心就诊的单纯性牙龈炎患者62例,随机均分为试验组(32例)和对照组(30例)。试验组患者采用体验式口腔卫生指导方法教授患者刷牙,对照组患者采用模型教授法,研究两组患者在口腔护理方面的差异,分析两组患者治疗1个月后的菌斑指数、探诊出血(bleeding on probing,BOP)阳性位点数及BOP百分率。结果治疗前两组患者的菌斑指数、BOP阳性位点数及BOP百分率差异均无统计学意义(P>0.05);治疗1个月后,两组患者的上述指标均有改善(P<0.05),其中试验组的菌斑指数、BOP阳性位点数及BOP百分率均有更加显著的改善(P<0.01),且两组患者上述指标的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对单纯性牙龈炎患者采用体验式口腔卫生指导方法,可显著改善菌斑指数、BOP阳性位点数及BOP百分率,值得在临床上推广。 郭庆圆 仇静 仇静 杨芳 杨芳 张月 陈正岗 郭大伟 于江波关键词:牙龈炎 腺病毒携带shFOXM1对ACC-2细胞作用机制的研究 2016年 目的:研究携带特异性抑制叉头框蛋白M1(Forkhead box protein M1,FOXM1)表达的腺病毒(Ad5.sh FOXM1)对人涎腺腺样囊性癌(Adenoidcystic carcinoma,ACC)细胞周期的调控、细胞凋亡的影响及其作用机理。方法:根据人FOXM1 m RNA的序列,设计合成针对FOXM1基因的三对sh RNA,转染ACC-2细胞系,利用实时荧光定量PCR、Western blot筛选获得最佳干扰片段,并构建入腺病毒载体,利用流式细胞术、MTT、Western blot等检测其对ACC-2细胞周期、细胞凋亡的调控及分子作用。结果:1成功筛选获得了抑制FOXM1表达的sh RNA,并构建了特异性抑制ACC-2细胞中FOXM1表达的腺病毒Ad5-sh FOXM1;2Ad5-sh FOXM1能明显抑制ACC细胞的增殖,并引起ACC-2细胞S期的阻滞(P<0.05);2Ad5-sh FOXM1通过下调c-Myc蛋白的表达抑制了细胞的增殖,通过下调P21Cip1,P27Kip1蛋白的表达抑制了ACC-2细胞周期(P<0.05)。结论:下调FOXM1的表达能够明显抑制ACC-2细胞周期和ACC-2细胞的增殖。 仇静 张月 陈书兰 刘岚 刘峤峤 张广耘 袁晓关键词:人涎腺腺样囊性癌 细胞周期 人牙周膜成纤维细胞凋亡与体外高糖环境和脂多糖的交互作用 被引量:3 2017年 背景:已有研究表明,高糖和脂多糖在单独作用下都能够促进人牙周膜成纤维细胞的凋亡,但体外培养的人牙周膜成纤维细胞在高糖和脂多糖共同作用下的凋亡行为尚未有相关报道。目的:通过不同浓度脂多糖影响高糖环境下人牙周膜成纤维细胞,观察细胞增殖、凋亡以及凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的变化。方法:原代培养并鉴定人牙周膜成纤维细胞,5-8代用于后继实验。分别用葡萄糖(5.5,25 mmol/L)和脂多糖(0,1,10 mg/L)作用于细胞24 h及48 h。结果与结论:(1)在正常的葡萄糖浓度(5.5 mmol/L)下,质量浓度为10 mg/L的脂多糖能够显著抑制细胞的增殖(P<0.05),促进细胞的凋亡(P<0.05),Bax和Bcl-2 mR NA表达增强(P<0.05),Bcl-2/Bax的比值显著降低(P<0.05);(2)在高糖浓度(25 mmol/L)下,脂多糖诱导的细胞增殖的抑制、细胞凋亡、Bax和Bcl-2 mR NA的表达以及Bcl-2/Bax比值的降低都显著增强(P<0.05);(3)方差分析结果显示,高糖和脂多糖在诱导细胞凋亡方面有显著的交互作用(P<0.05);(4)结果说明,脂多糖在高糖环境下介导的人牙周膜成纤维细胞增殖的抑制、凋亡及凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达显著增强,脂多糖和高糖在细胞凋亡方面有显著的交互作用。 荆冉 郭大伟 廖奕翔 任伟伟 仇静 陈书兰关键词:脂多糖类 高糖 脂多糖 人牙周膜成纤维细胞 周期性张应力诱导成纤维细胞凋亡中p38MAPK信号通路的作用(英文) 被引量:1 2011年 背景:当牙齿受异常咬合力时会导致牙体吸收、牙周组织的大量破坏。目的:研究牙周膜成纤维细胞在受到周期性张应力刺激后是否发生凋亡及p38MAPK信号通路是否参与该凋亡过程。方法:取4~7代成纤维细胞,同步化后随机分为对照组、加力组和SB203580组。加力组和SB203580组细胞加载力值为12%表面应变率,加力频率为6个循环/min,即5s拉伸,5s松弛。SB203580组细胞在加力前1h加入终浓度为20mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。分别在加力6,12,24h,取各组细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡基因baxmRNA的表达。结果与结论:与对照组比较,加力后成纤维细胞凋亡率及baxmRNA表达增加(P<0.05),且随着加力时间的延长而增强,12h达高峰,之后逐渐下降。与加力组比较,SB203580组对应时间点细胞凋亡减少(P<0.05),baxmRNA表达降低。说明细胞受到力学刺激会发生凋亡,而丝裂原活化蛋白激酶p38MAPK信号通路参与了该凋亡过程。 仇静 张广耘 田臻 张月 于江波 袁晓关键词:丝裂原活化蛋白激酶 周期性张应力 凋亡 成纤维细胞 p38MAPK信号通路在周期性张应力诱导的成纤维细胞凋亡中的作用 目的:牙周炎是人类最普遍的口腔疾病之一,它不仅是牙列缺损乃至缺失的主要原因,也是某些全身疾病如糖尿病、心血管疾病、妊娠并发症的危险因素。近一百年来,对牙周疾病的研究不断深入,其致病机理仍有诸多未解之谜,以往研究已经证实咬... 仇静关键词:信号通路 周期性张应力 成纤维细胞凋亡 牙周炎 致病机理 Cdc42在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:2 2018年 目的 :探讨舌鳞癌组织、癌旁组织以及正常舌组织中细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)的表达及临床意义。方法:选择青岛大学附属青岛市市立医院口腔颌面外科2014—2016年手术切除的舌鳞癌原发灶42例,采用免疫组织化学和免疫印迹法检测患者的组织标本(舌鳞癌、癌旁组织和正常舌组织)中Cdc42蛋白的表达水平,并分析其与临床病理参数的相关性。采用SPSS 13.0软件包对相应资料进行t检验与秩和检验。结果:Cdc42蛋白在舌鳞癌以及其癌旁组织中的阳性率分别为80.95%和52.38%,均高于正常舌组织(11.90%),2组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Cdc42蛋白的表达与舌鳞癌的病理分化程度无关(P>0.05),Cdc42蛋白定位在胞核的阳性分度与舌鳞癌的病理分化程度相关(P<0.05);与患者的年龄、性别无关(P>0.05);与颈淋巴结转移及舌鳞癌的临床分期呈正相关(P<0.05)。结论:Cdc42蛋白在舌鳞癌组织及癌旁组织中表达增高,与舌鳞癌的发生、发展密切相关。 廖奕翔 孔庆暖 郭庆圆 何宗轩 仇静 陈正岗关键词:鳞癌 CDC42