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CaSR在纳米细菌肾结石形成中表达的动态研究: 2019年; 目的探讨尾静脉注射纳米细菌构建肾结石模型检测CaSR的表达情况和其在纳米细菌形成结石中的作用。方法Wistar雄性大鼠随机分为对照组和纳米细菌组,每组30只。对照组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射0.9%氯化钠注射液1.2mL,纳米细菌组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射纳米细菌悬浊液1.2mL。两组Wistar雄性大鼠注射后1~10周内,每周处死3只。每周采用病理组织学方法评估每组3只Wistar雄性大鼠成石情况,并通过免疫组化学方法连续10周检测CaSR的表达。结果第4周以后纳米细菌组Wistar雄性大鼠肾小管内发现晶体颗粒,且主要分布于近、远曲小管,1~10周对照组Wistar雄性大鼠未见晶颗粒。CaSR在纳米细菌组中持续表达,1~3周和对照组无明显差异,但是4~10周其表达强度逐渐增强且表达强度明显高于对照组,1~10周内CaSR在对照组中虽然也持续表达,但其强度却无明显改变。结论CaSR表达增强可能在纳米细菌形成结石中起重要作用。; 申茂磊王勤章钱成徐浩郝志强钱彪; 关键词：肾结石

氟康唑清除hk-2细胞霉菌污染的研究被引量：2: 2018年; 目的探讨不同浓度氟康唑清除hk-2细胞培养中霉菌污染的效果。方法采用10%及20%浓度氟康唑清除hk-2细胞的霉菌污染,对比不同浓度清除效果。结果经1次/d的冲洗、换液、不同浓度氟康唑处理后,污染得到明显的控制。加药过程中可正常传代,持续10 d后,镜下已无真菌生长,细胞生长良好,可用于试验,与正常未受污染的细胞无明显差异。结论 10%浓度氟康唑既能灭菌又不对细胞造成影响。; 王议鹤王勤章吴双褚浩钱成徐浩钱彪; 关键词：污染

经尿道灌注干细胞白血病重组基因慢病毒对糖尿病膀胱病变豚鼠膀胱功能的影响被引量：8: 2017年; 目的探讨经尿道灌注干细胞白血病重组(SCL)基因慢病毒对糖尿病膀胱病变(DCP)豚鼠膀胱功能的改善作用。方法采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立豚鼠糖尿病模型,培养12周后建立DCP模型。选取DCP豚鼠20只,随机分为模型组、SCL组各10只。取未造模的10只作为对照组。各组麻醉后经尿道插入自制尿管,排空尿液,对照组和模型组均经尿管灌注PBS液0.2 mL,SCL组经尿管灌注最佳感染复数(MOI)的SCL基因慢病毒0.2 mL(2×10~7IU)。灌注后结扎尿管,保留膀胱灌注液2 h。灌注后28 d时用代谢笼收集三组24 h尿量;行尿动力学检测,于膀胱排尿后即刻测残余尿量、最大膀胱容量、排尿期最大逼尿肌压、单次排尿周期灌注量、膀胱顺应性。切除完整膀胱,排尽尿液后称量膀胱湿重。结果与对照组相比,模型组和SCL组24 h尿量、膀胱湿重、最大膀胱容量、残余尿量均增加,最大逼尿肌压、膀胱顺应性均降低(P均<0.05);与模型组相比,SCL组24 h尿量、膀胱湿重、最大膀胱容量、残余尿量均降低,最大逼尿肌压、膀胱顺应性均增加(P均<0.05)。结论经尿道灌注SCL慢病毒能够显著改善DCP豚鼠的膀胱功能,为治疗DCP提供了新的途径与方法。; 余运运王勤章王子雄钱彪丁国富徐浩张思源; 关键词：糖尿病膀胱病变慢病毒膀胱功能 CAJAL间质细胞

CaSR和Claudin-14在纳米细菌肾结石形成中表达的动态研究被引量：2: 2018年; 目的纳米细菌是引起泌尿系结石的因素之一,但是其确切致病机制仍不明确。文章通过尾静脉注射纳米细菌构建肾结石模型检测CaSR和Claudin-14蛋白的表达情况,初步探讨CaSR-Claudin-14调控通道在纳米细菌形成结石中的作用。方法60只Wistar雄性大鼠随机数字表法分为对照组和纳米细菌组,每组30只。对照组大鼠一次性给予尾静脉注射0.9%氯化钠注射液1.2mL,纳米细菌组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射纳米细菌悬浊液1.2mL。2组大鼠注射后的1~10周内每周处死3只。每周采用病理组织学方法评估大鼠成石情况,并通过免疫组化法连续10周检测CaSR、Claudin-14蛋白的表达。结果注射后第1~10周,对照组Wistar雄性大鼠肾内未见晶体颗粒沉积,纳米细菌组Wistar雄性大鼠肾晶体颗粒阳性率高于对照组(52.4%vs0%,P<0.01)。注射后第1~3周,纳米细菌组中有CaSR表达,而Claudin-14未见表达,但与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);注射后第4~10周纳米细菌组2种蛋白表达强度逐渐增强且表达强度明显高于对照组,呈棕褐色,主要分布在肾小管上皮细胞的细胞膜上。结论CaSR-Claudin-14调控通道活性增强可能在纳米细菌形成结石中起重要作用。; 申茂磊王勤章钱成徐浩郝志强李鹏钱彪; 关键词：CASR 纳米细菌肾结石

Wistar大鼠肾结石形成过程的动态观察研究被引量：1: 2018年; 目的观察Wistar大鼠肾结石形成的动态过程。方法 2016年3月选取6周龄左右SPF级雄性Wistar大鼠60只,适应性饲养1周后随机分为空白对照组(NC组,n=30)和乙二醇组(EG组,n=30)。NC组大鼠正常饮水,2 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃2周;EG组大鼠饮用1%EG溶液,2 ml 2%氯化铵溶液灌胃2周。连续10周观察两组大鼠一般情况,每周处死3只,每周检测两组大鼠血、尿生化指标,肉眼及解剖显微镜下观察大鼠肾脏解剖情况,并分析两组大鼠肾脏结晶分级及结石形成情况。结果观察期间EG组大鼠垫料有血尿,造模期间于第8周死亡1只,第9周死亡1只。造模1~2周时两组大鼠进食良好、安静温顺。造模3~8周时,NC组大鼠无特殊表现,EG组大鼠表现为烦躁兴奋、活泼好动。造模9~10周EG组大鼠表现为精神疲倦,针刺反应迟钝,活动度减少,食量减少;NC组大鼠无特殊表现。EG组大鼠造模第2~10周血肌酐、血尿酸均高于NC组(P<0.05)。EG组大鼠第3~8周尿素氮高于NC组(P<0.05)。EG组大鼠第2周、第4~10周尿钙高于NC组(P<0.05)。EG组大鼠第5~10周血钙高于NC组(P<0.05)。EG组大鼠第6~10周血磷、血镁高于NC组(P<0.05)。EG组大鼠第2~8周尿p H值低于NC组(P<0.05)。两组大鼠第1~10周尿比重、尿量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。EG组大鼠第3~10周肾体比高于NC组(P<0.05)。造模第1~2周,肉眼观察两组大鼠肾脏无明显差异。造模第3周开始,肉眼观察EG组大鼠部分肾脏较NC组略有增大。造模第6周以后,肉眼观察EG组大鼠肾脏肿大;解剖显微镜下可见晶体以肾盂为中心呈扇形分布。造模第6周以后,肉眼观察NC组大鼠肾脏表面光滑,解剖显微镜下亦未见明显结晶。EG组大鼠肾脏结晶分级高于NC组(Z=-5.195,P<0.001)。EG组大鼠结石检出率高于NC组(χ~2=21.172,P<0.001)。结论采用EG加氯化铵法建立的肾结石模型大鼠在造模第3周开始形成结石,肾结石模型大鼠明显较空白对照大鼠精神�; 钱成王勤章褚浩徐浩郝志强钱彪; 关键词：肾结石乙二醇 WISTAR大鼠动物模型建立

观察在体灌注SCL基因重组慢病毒对豚鼠糖尿病膀胱中ICC功能的影响被引量：6: 2018年; 目的探究豚鼠糖尿病膀胱病(DCP)在经尿道灌注干细胞白血病(SCL)基因重组慢病毒后所引发的Cajal样间质细胞(ICC)电位活动的改变。方法购买健康雄性豚鼠90只,按照200 mg/kg单次腹腔注射1%的链脲佐菌素(STZ),正常喂养12周后,筛选出符合DCP模型标准的的豚鼠并将其随机分为3组:实验组、阳性对照组、空白对照组。实验组经尿道灌注0.2 m L滴度为2×107IU的SCL基因重组慢病毒,阳性对照组经尿道灌注0.2 mL空慢病毒,空白对照组经尿道灌注0.2 mL PBS液。每组在转染后2、7、14、28 d这4个时间节点每次处死3只豚鼠,迅速摘取膀胱,选择胶原酶V消融法分离提取初代ICC并继续培养。72 h后运用膜片钳技术检测ICC自发及ATP诱发电位活动。结果体外通过胶原酶消融法可分离培养DCP豚鼠膀胱中ICC,运用细胞膜片钳技术观察到在无刺激条件下检测不到ICC的内向电流,而在ATP(100μmol/L)条件激发下可检测到ICC的内向电流。实验组2 d时与其他两组内向电流无明显变化,实验组SCL慢病毒转染DCP膀胱7、14、28 d时可检测到ICC内向电流比其他两组高(P<0.05),14 d达到峰值350.0±29.9pA,随后降低。阳性对照组与空白对照组随着DCP膀胱持续受损,内向电流逐步降低(P<0.05)。结论 SCL基因重组慢病毒经尿道灌注可成功转染豚鼠DCP膀胱,使受损的膀胱ICC电流幅度逐步增高,说明SCL基因对DCP膀胱中受损ICC功能有部分改善作用。; 徐浩钱彪杨立张思源沈志远邵润芃王勤章; 关键词：糖尿病膀胱病变重组慢病毒 CAJAL样间质细胞

钙敏感受体在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用被引量：1: 2018年; 目的动态观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在大鼠肾草酸钙结石形成过程中的表达,探讨CaSR在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用。方法选取60只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组和结石组,每组各30只。正常对照组以正常饮用水2 ml/d灌胃,结石组大鼠给予1%乙二醇和2%氯化铵2 ml/d灌胃,诱导建立Wistar大鼠肾草酸钙结石模型。连续10周观察大鼠的一般情况,每组每周处死3只大鼠并收集双侧肾标本,采用光学显微镜、HE切片染色动态观察结石形成情况。免疫组织化学染色技术对CaSR在肾组织中的表达水平进行动态监测。结果第3周开始,结石组大鼠肾切片HE染色可见明亮晶体,主要分布于远曲小管和近曲小管,肾组织可见肾小管轻度扩张,偶见肾小管上皮脱落或肾间质有淋巴细胞的浸润;1~10周正常对照组肾组织未见病理性改变。免疫组织化学染色结果 :第1~2周,镜下两组大鼠肾组织内CaSR定位处着色程度无明显差异;第3周开始,结石组肾组织内CaSR定位处着色程度与对照组相比明显加深。结论 CaSR的高度表达可能在大鼠肾草酸钙结石形成过程中起重要作用。; 李朋王勤章钱成徐浩申茂磊郝志强钱彪; 关键词：钙敏感受体草酸钙肾结石 WISTAR大鼠

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徐浩

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