栾杭琪
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:大连医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 香菇功能域蛋白Latcripin-8的表达、纯化及抗肿瘤活性研究
- 肿瘤是威胁人类生命健康重大问题,而作为肿瘤的主要部分的肿瘤细胞是一种变异的细胞,是产生癌症的病原。就目前而言,从自然界的资源中开发出的抗癌药物中,大多数都来自动植物的次生代谢产物及其它小分子化合物。而近些年来,有关于生物...
- 栾杭琪
- 关键词:原核表达抗肿瘤
- 香菇C_(91-3)转录本Unigene1245基因的克隆表达及其抗肿瘤活性
- 2017年
- 目的克隆香菇C_(91-3)转录本中Unigene1245基因并进行生物信息学分析,研究其编码蛋白的抗肿瘤活性。方法提取香菇C_(91-3)菌丝体总RNA,反转录合成cDNA,经RACE技术获得Unigene1245基因编码序列,通过NCBI对其进行生物信息学分析。设计特异性引物进行PCR扩增,将其克隆到载体pET-32a(+)上,将重组表达质粒热转化至E.coli Rosetta-gami(DE3)中,进行目的蛋白的诱导表达、纯化及复性,通过CCK-8法检测其抗肿瘤活性。结果香菇C_(91-3)转录本Unigene1245基因为YjgF/YER057c/UK114家族成员,成功诱导表达其编码蛋白,CCK-8法结果显示该蛋白对人肝癌HepG2细胞的增殖具有一定抑制作用,且具有一定的时间及浓度依赖性。结论成功克隆并诱导表达Unigene1245基因,并鉴定其具有抑制HepG2细胞增殖的能力,为后续探究抗肿瘤机制奠定了基础。
- 邵立群栾杭琪王钰张伟钟民涛王晓丽李星云沙丽黄敏
- 关键词:克隆抗肿瘤
- 香菇C91‑3菌株的Latcripin‑8基因片段、编码蛋白、制备方法及用途
- 本发明公开一种香菇C91‑3菌株的Latcripin‑8基因片段、编码蛋白、制备方法及用途,Latcripin‑8基因片段核苷酸序列如SEQ ID NO:1 所示;编码蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的。Lat...
- 黄敏栾杭琪钟民涛张伟王晓丽李星云曹婧宁安红刘磊
- 香菇C91-3菌株的Latcripin-8基因片段、编码蛋白、制备方法及用途
- 本发明公开一种香菇C91‑3菌株的Latcripin‑8基因片段、编码蛋白、制备方法及用途,Latcripin‑8基因片段核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;编码蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的。Latc...
- 黄敏栾杭琪钟民涛张伟王晓丽李星云曹婧宁安红刘磊
- 文献传递
- 香菇Latcripin-8蛋白的表达、纯化及抗肿瘤活性被引量:2
- 2017年
- 目的通过生物信息学方法分析Latcripin-8的基因序列、功能域片段,构建重组质粒,表达含Pkinase结构域基因的目的蛋白并研究重组蛋白的抗肿瘤活性。方法从香菇C91-3菌丝体中提取总RNA,经反转录成cDNA文库。高通量测序获得转录组mRNA,经对比获得目的序列后以RACE技术扩增。经Pfam数据库比对可知其具有Pkinase结构域。设计引物,PCR扩增并与原核表达载体pET32a(+)进行连接,转至E.coli Rosetta-gami(DE3)中进行蛋白诱导表达,经纯化、复性后获得目的蛋白并鉴定。CCK8法检测其对人肺腺癌A549细胞、人胃癌SGC-7901细胞、人肝癌HepG2细胞及人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率。结果蛋白诱导成功且该蛋白对不同种类的肿瘤细胞抑制效果不同,其中对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制程度最为明显,并表现出时间和浓度依赖性。结论经Latcripin-8基因诱导表达出的蛋白具有抗肿瘤功效,为进一步深入研究抗肿瘤方面的活性提供了初步条件,有助于肿瘤治疗作用的研究。
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- 关键词:原核表达抗肿瘤