李俊林 作品数:10 被引量:18 H指数:3 供职机构: 南京林业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 江苏高校优势学科建设工程项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
蒙古沙冬青外向钾离子通道AmGORK启动子克隆及表达分析 被引量:1 2021年 克隆蒙古沙冬青钾离子通道AmGORK的启动子区域,探明在干旱胁迫下它对保卫细胞运动的调控机制,为深入研究该基因在水分及养分利用、光合作用、抗旱等过程的功能奠定基础。以蒙古沙冬青保卫细胞外向钾离子通道基因AmGORK编码序列为基础,通过染色体步移技术克隆该基因的启动子序列,并对其进行生物信息学分析,构建pCambia1301-AmGORK∷GUS双元载体转化野生型拟南芥,对T3转基因拟南芥各组织进行GUS活性染色,转基因植株经PEG或ABA处理后,分析AmGORK启动子的表达情况。结果表明,获得AmGORK上游1723 bp序列,该区域含有多个响应干旱、ABA、光照等的顺式调控元件,说明AmGORK可能参与干旱响应过程。经GUS活性染色,发现AmGORK在根中柱、叶柄、叶脉、叶片保卫细胞、花萼均有表达,表明AmGORK的表达具有组织特异性。定量分析发现PEG或ABA处理后的转基因植株中GUS分别上调3.2倍和4.1倍。AmGORK表达可能受干旱诱导。 李俊林 李俊林 张焕朝 张海洋 王向誉 王向誉 郭洪恩关键词:启动子 GUS 水稻OsKAT2基因的克隆及表达分析 被引量:2 2014年 为获得抵抗逆境胁迫的相关基因,利用电子克隆方法从水稻中获得了1个新基因,将其命名为OsKAT2(GenBank登陆号为KJ010541)。生物信息学分析结果表明OsKAT2的cDNA序列开放阅读框长1 806 bp,编码蛋白质由601个氨基酸组成;OsKAT2蛋白质包含K+通道的保守结构域,属于Shaker家族第II组。通过实时定量荧光PCR分析发现,OsKAT2主要在地上部表达;在干旱、高盐和外源脱落酸(ABA)胁迫处理下,水稻地上部OsKAT2的表达量均降低。初步推测OsKAT2可能在水稻抵抗逆境胁迫中发挥作用,是一个水稻抗非生物逆境改良的候选基因。 高南 李俊林 郝东利关键词:水稻 实时荧光定量PCR 非生物胁迫 钾离子通道 水稻钾双向整流型离子通道OsAKT2/3分子及应用 水稻钾双向整流型离子通道OsAKT2/3分子及应用,其氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。编码上述水稻双向整流型钾离子通道OsAKT2/3分子的基因,序列如SEQIDNo.1所示。本发明首先从粳稻(<I>Oryzasat... 高南 李俊林 苏彦华 李虹颖文献传递 OsAKT2/3基因的生物信息学分析 被引量:1 2015年 Shaker类型K+通道在植物钾的吸收、转运及其他生理过程中发挥着重要作用。AKT2/3是Shaker类型K+通道中唯一既主导K+内流,又允许去极化情况下K+渗漏性外流的通道。水稻Os AKT2/3蛋白的生物信息学分析表明,Os AKT2/3蛋白含有K+通道的标志性序列Txx Tx GYGD;该基因分子式为C4219H6693N1179O1233S35,理论等电点为6.64,氨基酸残基组成中亮氨酸残基含量最高;有一定的亲水性,为跨膜蛋白;可能存在31个翻译后修饰位点、5种结构域、52个磷酸化位点,不含信号肽;序列主要构件为α-螺旋和折叠延伸;该蛋白与其他植物的AKT2/3家族成员具有较高的同源性。试验结果为Os AKT2/3基因生理功能的深入研究提供一定依据。 高南 李俊林 郝东利 苏彦华关键词:水稻 磷酸化位点 系统进化 水稻钾双向整流型离子通道OsAKT2/3分子及应用 水稻钾双向整流型离子通道OsAKT2/3分子及应用,其氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。编码上述水稻双向整流型钾离子通道OsAKT2/3分子的基因,序列如SEQIDNo.1所示。本发明首先从粳稻(<I>Oryzasat... 高南 李俊林 苏彦华 李虹颖拟南芥突变体kea的表型分析及对生长素的响应特征 2016年 对拟南芥kea突变体表型分析的结果表明,在黑暗条件下,单个KEA缺失后下胚轴和主根伸长与野生型相比没有明显差异,而多个KEA缺失导致幼苗出现去黄化现象,表现为下胚轴伸长受到抑制,子叶完全打开,真叶开始出现,主根发育良好。qRT-PCT结果表明,呈现去黄化现象的kea多突变体内生长素合成基因IAA1、IAA3、IAA17的表达下调,而生长素转运基因AUX1、PIN1、PIN3、PIN7的表达没有明显变化。外源施加生长素类似物NAA能够恢复kea多突变体去黄化现象。上述结果暗示KEA在调控拟南芥光调控发育的某些方面发挥重要作用。 韩蕾 李俊林 苏彦华关键词:拟南芥 生长素 蒙古沙冬青气孔及保卫细胞内向钾离子通道特性研究 被引量:6 2015年 蒙古沙冬青是一种豆科,常绿灌木,主要分布在我国西北地区。蒙古沙冬青作为沙生植物的一种,有很强抗旱能力。蒙古沙冬青具有很低的蒸腾强度,其蒸腾作用与气孔的活动密切相关。气孔开放过程,保卫细胞质膜上的内向钾离子通道介导钾离子进入保卫细胞。本研究通过观测蒙古沙冬青和拟南芥气孔及保卫细胞原生质体,结果显示,蒙古沙冬青气孔密度明显比拟南芥气孔密度要低;蒙古沙冬青气孔保卫细胞周长是拟南芥的1.7倍;而蒙古沙冬青保卫细胞的体积约是拟南芥的3倍。通过膜片钳技术,记录蒙古沙冬青和拟南芥保卫细胞原生质体内向钾离子通道电流,膜电位为-180 m V时,蒙古沙冬青电流密度明显小于拟南芥。蒙古沙冬青保卫细胞内向钾离子通道转运钾离子的能力比较弱,可推测蒙古沙冬青气孔不易开放。通过比较发现,旱生植物蒙古沙冬青低的气孔密度和保卫细胞弱的转运钾离子能力,是其具有低的蒸腾强度关键。 李俊林 韩蕾 金曼 张焕朝 张焕朝关键词:拟南芥 气孔 保卫细胞 电流密度 水稻K+通道OsKAT1.1的生理功能研究 K+通道是植物高效吸收和体内运输K+的载体,对于保证植物的钾素营养和增强抗逆性具有重要意义。K+通道在结构和功能方面具有高度的保守性,然而水稻生长在淹水环境中,其K+通道在长期适应物种立地条件的进化过程中可能形成了有别于... 李俊林关键词:水稻 生理功能 钾素营养 抗逆性 膜片钳 沙冬青脯氨酸转运体基因的克隆及表达分析 被引量:4 2015年 通过RACE技术从沙冬青中克隆获得了脯氨酸转运体基因Am Pro T(Gen Bank登录号为KJ873133)。序列分析表明,Am Pro T基因开放阅读框为1 329 bp,编码442个氨基酸,预测蛋白质分子量为48.07 k D,等电点为9.32,含有11个跨膜区域,具有典型的脯氨酸转运蛋白的特征。进化分析显示,Am Pro T与大豆Pro T的相似性达到86%。荧光定量PCR分析表明,Am Pro T在地上部的表达量要显著高于地下部,在受到干旱、高盐、脱落酸胁迫后表达量呈上调趋势,推测Am Pro T可能在沙冬青响应干旱、盐等非生物胁迫过程中发挥作用。 岳光振 金曼 李俊林 杨顺瑛 郭满园 苏彦华关键词:沙冬青 基因克隆 水稻钾离子通道基因OsKAT1.1的克隆、表达载体的构建及其电生理功能 被引量:5 2011年 K+通道是植物高效吸收和体内运输K+的载体,对保证植物的钾素营养和增强抗逆性具有重要意义。水稻生长在淹水环境中,其K+通道在长期适应物种立地条件的进化过程中可能形成了有别于拟南芥等模式植物的独特功能特征和作用机制。本研究克隆了一个水稻KAT型K+通道基因OsKAT1.1,并利用电生理技术探讨其电生理功能。研究结果表明,通过一系列亚克隆过程,我们成功构建了适用于双电极电压钳和膜片钳电生理研究的表达载体pCI-OsKAT1.1和pTracer-CMV3-OsKAT1.1。进一步的电生理试验结果验证了构建过程的准确性,并表明水稻OsKAT1.1是一个由膜电位控制的吸收型K+通道。 李俊林 高南 刘春生 苏彦华关键词:克隆 表达载体构建 电生理功能