王健
- 作品数：21 被引量：65H指数：4
- 供职机构：安康学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 丹参SmPAP1基因组DNA的克隆及其拷贝数的验定
- 2015年
- 本研究以获得的丹参SmPAP1基因c DNA为模板设计引物扩增其基因组DNA序列(genomic DNA,g DNA)。g DNA与c DNA序列比对结果显示,该基因基因组DNA序列长度为739 bp,由2个外显子和1个内含子组成。进一步采用染色体步移技术克隆了其上游的一段长度为1 197 bp的启动子序列。启动子序列分析结果显示,该区域内不仅含有保守的TATA盒和CAAT盒,而且包含多个潜在的与胁迫应答相关的顺式作用元件,暗示SmPAP1基因很可能响应多种环境胁迫诱导表达。此外,SmPAP1基因的Southern杂交结果表明,在丹参基因组中SmPAP1仅有1个拷贝数。本研究结果为进一步研究SmPAP1基因的表达调控模式以及启动子的功能奠定基础。
- 王健李封尘
- 关键词：丹参启动子拷贝数
- 基于烟草瞬时表达体系对amiRNA沉默效果快速有效的预验证被引量：2
- 2015年
- amiRNA(artificial microRNA)作为一种诱导基因发生特异性沉默的技术已在多种植物中应用,但设计出的不同amiRNAs在所转化株系中的沉默效率难以预测,因此对amiRNA载体的沉默效率进行预验证是非常必要的。本实验以丹参(Salvia miltiorrhiza)的1个MYB类转录因子基因SmPAP1的mRNA序列为amiRNA作用对象,并挑选2个经在线软件WMD3(Web MicroRNA Designer)设计的amiRNAs,分别命名为amiRNA1-SmPAP1和amiRNA2-SmPAP1,然后通过农杆菌介导将构建的2个amiRNA载体和SmPAP1过表达植物载体在烟草叶片细胞中进行瞬时共表达。结果显示,amiRNA2的表达丰度约是amiRNA1的2倍;amiRNA2对靶标SmPAP1的沉默效率约是amiRNA1的2.5倍;SmPAP1在mRNA和蛋白水平上均与相应amiRNA的表达水平呈显著负相关。因此,amiRNA在烟草细胞中的瞬时表达可快速、有效地对不同amiRNA沉默效果进行预验证,从而为后续的植物遗传转化研究提供重要参考。
- 王健
- SmPAP1基因特异性沉默导致转基因丹参体内的酚酸含量显著下降被引量：4
- 2015年
- R2R3-MYB类转录因子在植物次生代谢中具有十分重要的调控作用。丹参SmPAP1是一个R2R3-MYB类转录因子基因。为了探讨SmPAP1是否参与丹参酚酸类化合物生物合成的调控,本研究以拟南芥miRNA319前体为基本骨架,通过over-lapping PCR技术构建artifical miRNA(amiRNA)植物表达载体进而对SmPAP1进行特异性沉默。Real-time PCR和杂交结果显示:与对照株相比,阳性转基因株系中SmPAP1的mRNA水平均呈现不同程度的显著下降,同时酚酸类化合物合成途径中酶基因也呈现不同程度的显著下调;总酚含量测定结果显示:转化株系中总酚酸含量均约为同期野生型丹参的50%。研究结果说明SmPAP1可能作为一个重要的转录因子参与丹参酚酸类活性物质的代谢调控。
- 王健王浩如
- 关键词：丹参酚酸
- 一种鬼灯檠植株的培育方法
- 本发明公开了药用植物鬼灯檠植株的组织培养快速繁殖方法，包含以下几个步骤：(一)从成年鬼灯檠植株上切取幼嫩叶片作为外植体，经升汞和酒精消毒后，将其放入愈伤组织诱导培养基中，诱导形成愈伤组织；(二)将质地呈颗粒状的愈伤组织取...
- 王健
- 文献传递
- 高羊茅FaChit1基因cDNA克隆及诱导表达被引量：3
- 2010年
- 应用简并RT-PCR及RACE技术,从高羊茅中克隆了1个Ⅰ类几丁质酶基因cDNA全长序列,命名为Fa-Chit1.结果表明,该cDNA具有1个951 bp的完整编码框,编码316个氨基酸,其编码产物和其它植物的Ⅰ类几丁质酶在氨基酸序列上具有较高的同源性,包含典型的几丁质结合区、催化区以及脯氨酸、半胱氨酸富集的铰链区,但缺少定位到植物液泡所必须的C末端延伸区靶向信号.Northern杂交显示,FaChit1对真菌激发子有较强的响应,乙烯和干旱胁迫均能有效诱导FaChit1基因的表达,而对机械损伤处理的反应比较微弱,只在叶片中积累少量的mRNA.
- 王健徐子勤
- 关键词：高羊茅胁迫诱导
- 高羊茅FaChit1基因的克隆与表达调控以及一种转基因植物新型检测方法的研究
- 高羊茅是一种分布十分广泛的草坪草,主要用于草坪的建植,人们居住环境的美化。由于草坪草抗逆性较差,在生长过程中容易受致病性真菌等多种病原体的侵染。如何提高它们的抗病、抗虫、抗旱、耐盐以及耐瘠薄特性已成为一个重要的研究方向,...
- 王健
- 关键词：高羊茅胁迫响应DNA生物传感器转基因植物
- 文献传递
- 七叶鬼灯檠挥发油及不同提取物抑菌活性的研究被引量：8
- 2013年
- 研究了七叶鬼灯檠根状茎的挥发油及不同提取物的体外抑菌活性,为七叶鬼灯檠资源开发利用提供科学依据。采用滤纸片法和牛津杯法对七叶鬼灯檠根状茎挥发油及其甲醇、丙酮和乙酸乙酯提取物体外抑菌能力进行评价。结果表明,七叶鬼灯檠根状茎挥发油表现出较强的抑菌活性,对肺炎克雷伯氏菌抑制作用最强,其次为巨大芽孢杆菌和粘红酵母,抑菌圈直径分别为(29.11±0.31)、(26.77±0.35)、(26.20±0.62)mm。在不同溶剂提取物中,丙酮提取物和甲醇提取物均有明显的抑菌效果,解脂假丝酵母对提取物最敏感。七叶鬼灯檠的挥发油及提取物含有天然抑菌活性物质,具有光谱的抑菌效果,值得进一步开发利用。
- 王健黄慧王喆之张媛
- 关键词：挥发油提取物抑菌活性
- 小麦NBS-LRR类抗病基因同源序列的分离与鉴定被引量：16
- 2006年
- 根据已知植物抗病基因的保守区域设计引物,从抗锈病小麦品种西农88基因组DNA扩增出3条与植物抗病基因同源的序列,分别为WRGA1、WRGA2和WRGA14。这三条同源片段均含有典型的NBS-LRR类抗病基因所拥有的保守性结构域Kinase-2a、Kinase-3a和疏水结构域(HD)．它们与部分已知NBS-LRR类抗病基因的氨基酸序列同源性为46．0%-9．9%,三个片段间在氨基酸水平上的同源性为80．7%-56．8%。Northern杂交表明WRGA1在小麦中受水杨酸正调控,属诱导型表达。
- 黄萱徐子勤陈立余王健
- 关键词：小麦抗病基因同源序列水杨酸
- 甘肃巴家嘴丽牛(Leptobos)的化石时代及环境被引量：1
- 2006年
- 目的记述甘肃庆阳巴家嘴黄土层中发现的一件丽牛化石标本。方法运用经典的古生物方法,结合化石解剖、形态比较方法研究。结果该化石的主要特征是额面平,稍高出眼眶;眼眶向侧方凸出;角基起始于眼眶稍后,角直而细,亚柱状,两角心顺角基延长线大体成105°夹角;这些主要特征与Leptobos amplifrontalis极为相似,定为Leptoboscf.amplifrontalis。结论根据丽牛在欧洲和中国的发现及在巴家嘴动物群中的其他化石特征,巴家嘴丽牛的地质时代为第四纪早更新世早期,环境气候以湿冷为主。
- 王健薛祥煦
- 关键词：早更新世
- 干旱胁迫下15种丹参miRNAs差异表达分析被引量：4
- 2013年
- 参考已报道的其他植物中响应干旱胁迫的miRNAs,以其中15个miRNAs为研究对象,10%PEG6000胁迫处理的丹参幼苗为材料,采用实时定量PCR技术分析了这些miRNAs在干旱胁迫前后丹参幼苗叶片中的差异性表达。结果表明,在干旱胁迫6 h后,丹参体内miR156、miR157、miR166、miR168、miR169、miR319、miR774、miR894、miR2911、miR3462以及miR3626的表达水平表现为不同程度的上调,其中miR157、miR166、miR319、miR774、miR894、miR2911和miR3626表现为显著性上调;miR159、miR167、miR172以及miR408则表现为下调。对这些miRNAs作用的靶基因进行预测和分析发现,它们主要参与植物的新陈代谢、信号传导和生长发育过程,推测miR169和miR3462参与了丹参对干旱胁迫应答过程。
- 罗书芳崔浪军王健屈生宪
- 关键词：丹参干旱胁迫
