何健
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 针对nsp9基因的siRNA在Marc-145细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响被引量：3
- 2017年
- 为了验证猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)nsp9基因对PRRSV的复制影响,化学合成针对nsp9基因的siRNA,转染到Marc-145细胞中,接种PRRSV之后分别通过荧光定量和Western blot方法来测定病毒的滴度变化和表达情况。结果发现,转染siRNA的Marc-145细胞中病毒的滴度低于未转染特定siRNA的对照组,同时N蛋白的mRNA和蛋白水平均低于未转染特定siRNA的对照组。初步得出结论nsp9基因为病毒复制关键基因,针对nsp9基因的siRNA会在Marc-145细胞中抑制PRRSV的复制。
- 赵孟孟李华玮何健冯松林张雅张二芹张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒SIRNA滴度
- 猪寡腺苷酸合成酶OAS1a基因荧光定量SYBR Green检测方法的建立与运用被引量：2
- 2019年
- 为建立一种可以有效检测猪寡腺苷酸合成酶OAS1a表达方法,为检测机体抗病毒免疫提供参考,设计猪寡腺苷酸合成酶OAS1a基因特异荧光定量引物,扩增后连接pMD18-T载体,构建标准质粒,倍比稀释生成标准曲线。结果表明,引物特异,无二聚体,扩增效果良好,运用该方法测定猪繁殖与呼吸综合征病毒感染巨噬细胞中以及干扰素和Poly(I∶C)刺激细胞过程中该基因表达以及在不同猪脏器组织中分布。结果表明,该基因在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染之后表达量逐步升高,36 h达到最高,干扰素及其诱导剂Poly(I∶C)刺激均可以提高该基因表达,组织分布结果表明,该基因在多种组织中都有分布,肝脏和淋巴结中分布较高。
- 李存法王瑞宁李华玮冯丽丽张二芹张雅何健赵孟孟
- 关键词：荧光定量猪繁殖与呼吸综合征病毒干扰素
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp9基因第642位氨基酸突变对病毒复制的影响被引量：1
- 2018年
- 为了探索Nsp9基因上与病毒复制相关的关键氨基酸位点,通过融合PCR方法突变第642位氨基酸,之后进行病毒的拯救,并对病毒的滴度进行测定。结果表明,突变第642位氨基酸之后可以成功拯救病毒,突变毒株的滴度与亲本毒株的滴度未有明显差异,但突变毒株的转录水平有所下降。初步得出结论:猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp9基因第642位氨基酸与病毒滴度无关,与病毒转录相关。
- 李华玮姬鹏超王永芬赵绪永何健赵孟孟
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传学病毒拯救
