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重组双链及单链腺相关病毒介导Exendin-4表达效率的比较: 2015年; 比较双链腺相关病毒(Double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)及单链AAV(Singlestranded adeno-associated virus,ss AAV)介导Exendin-4分泌表达效率。应用基因工程方法构建ds AAV/p SSHG/Exendin-4,与重组ss AAV比较转染NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清Exendin-4浓度,免疫组化检测Exendin-4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功,测定重组ds AAV p SSHG/Exendin-4滴度为2.5×1011pfu,较重组ss AA滴度高(2.5×109pfu);ds AAV/p SSHG/GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强;ELISA法检测感染重组ds AAV的NIH3T3细胞上清中Exendin-4的浓度为181.1±8.75pmol/ml,较重组ss AAV分泌浓度(133.81±8.09pmol/ml)升高(P<0.05);重组ds AAV及ss AAV转染NIH3T3细胞Exendin-4表达均为阳性。重组ds AAV可分泌表达Exendin-4并较ss AAV具有更高效转染能力,为研究Exendin-4功能及应用于临床打下基础。; 王俊红问姣董鹏张静焦杨郭永红; 关键词：EXENDIN-4 腺相关病毒

神经营养素4前导序列介导Exendin-4表达质粒的构建及鉴定被引量：3: 2012年; 目的:构建神经营养素4前导序列介导的可分泌表达Exendin-4的重组腺伴病毒载体,为探究Exendin-4用于2型糖尿病临床治疗提供实验基础。方法:使用互补引物/模板法及T载体克隆法扩增Exendin-4的cDNA克隆,连接于NT4前导肽序列的3′端,融合基因NT4-Exendin-4亚克隆于穿梭质粒pSSHG,转染HEK-293细胞,包装病毒,斑点杂交方法测定重组病毒滴度。结果:经酶切、测序证实克隆出Exendin-4 cDNA,成功构建同一开放读码框ORF的NT4前导肽Exendin-4 cDNA克隆,得到高滴度(2.5×109pfu·L-1)的重组腺相关病毒。结论:通过分子克隆技术成功制备了Exendin-4的重组腺伴病毒载体pSSHG/NT4-Exendin-4并成功包装了较高浓度的重组病毒,为进一步研究Exendin-4功能及应用于临床打下基础。; 王俊红郭永红焦杨张静徐静谢璇杨广笑王全颖王枫; 关键词：质粒构建 EXENDIN-4

有毒中药的色谱检测方法: 世界卫生组织(WHO)提供的资料指出:'全球有1/3的患者死于用药不当'.对于化学合成药的不良反应人们普遍较重视,中药的不良反应是不容忽视.一些临床上经常应用的中药本身就是毒物,这类药物归纳起来共有28种.其中植物类有1...; 张静林丽琴贺浪冲傅强; 关键词：有毒中药药物分析; 文献传递

体液中微量士的宁的富集及同时检测被引量：8: 2005年; 目的将分子印迹技术运用到法医毒物分析中,建立一种全新的测定体液中微量士的宁的方法。方法运用分子印迹原位聚合技术,在色谱柱中一步合成了对士的宁具有专属识别能力的分子印迹聚合物,以此聚合物为介质,装填一厘米的小柱,建立体液中微量士的宁的富集及同时检测方法。结果以士的宁分子印迹聚合物作为尿液和血浆中微量士的宁的富集和检测介质,方法的检出限为4.9ng,样品回收率均大于92%,相对标准偏差小于6.59%,工作曲线的线性相关系数分别为0.9991和0.9966。运用此方法对中毒家兔血浆和尿液中的士的宁进行了测定。结论建立的新方法可以实现对士的宁专属的、灵敏的检测,适合于法医学毒物分析运用。; 张静贺浪冲傅强; 关键词：分子印迹体液法医鉴定学中毒

麻黄碱分子印迹整体柱的制备被引量：10: 2006年; 目的:合成对麻黄碱具有特异识别能力的分子印迹聚合物整体柱。方法:以麻黄碱为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二酸二甲基丙烯酸酯作为交联剂,以甲苯和十二醇混合溶液为致孔剂,用原位分子印迹技术,合成了麻黄碱分子印迹聚合物整体柱。结果:通过优化合成条件,结果显示模板分子、功能单体与交联剂之间的比例以1:2为最佳,致孔剂中甲苯的最佳含量为20～25%(v/v);合成温度和合成时间分别为50℃和12 h。通过扫描电镜和孔径分布曲线对得到的麻黄碱分子印迹聚合物进行了表征,结果显示聚合物中存在三种孔结构。在此基础上,研究了整体柱在有机相和水相中的识别能力。结论:得到的分子印迹聚合物整体柱,对模板分子具有特异的识别能力,在优化色谱条件下,麻黄碱和伪麻黄碱可以得到较好的分离。; 张静傅强; 关键词：分子印迹麻黄碱伪麻黄碱原位聚合

士的宁分子印迹整体柱的制备被引量：23: 2005年; 以士的宁为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯作为交联剂,甲苯和十二醇混合溶液为致孔剂,用原位分子印迹技术,合成了士的宁分子印迹整体柱。通过优化合成条件,结果显示:模板分子、功能单体与交联剂之间的比例以 1∶4∶16最佳,致孔剂中甲苯的最佳含量为 18% (V/V);对士的宁整体柱的色谱条件包括流动相组成、流速、柱温等进行了考察,并用于士的宁和马钱子碱的分离,其分离因子为 3 5。; 张静贺浪冲傅强; 关键词：整体柱分子印迹模板分子致孔剂马钱子碱色谱条件

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张静