王勇 作品数:4 被引量:28 H指数:4 供职机构: 北京理工大学生命学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “十二五”国家科技计划农村领域 更多>> 相关领域: 理学 更多>>
2012年毛细管电泳技术年度回顾 被引量:4 2012年 本文为2012年毛细管电泳(CE)技术的年度回顾。文中介绍了2012年涉及CE技术的国际会议4个,国内会议3个,对各会议的研究报道进行了总结。文中还归纳了ISI Web of Science中检索的2012年度发表的CE论文,并对这些CE论文在生物医药研究和检测器使用以及重要分析化学杂志发表的情况进行了分类说明。 屈锋 赵新颖 王勇关键词:毛细管电泳 小分子靶标的核酸适配体筛选的研究进展 被引量:15 2016年 核酸适配体(aptamer)是通过指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选得到的核糖核酸(RNA)或单链脱氧核糖核酸(ssDNA)。核酸适配体通过高亲和力特异性地识别小分子、蛋白质、细胞、微生物等多种靶标,在生物、医药、食品和环境检测等领域的应用日渐增多。但目前实际可用的核酸适配体有限,其筛选过程复杂,筛选难度大,制约了其应用。与生物大分子、细胞和微生物等靶标不同,小分子靶标与核酸分子的结合位点少、亲和力弱,且靶标通常需要固定在载体上。此外,小分子靶标结合核酸形成的复合物与核酸自身的大小、质量、电荷性质等方面差异较小,二者的分离难度大。故小分子靶标的核酸适配体筛选过程与大分子和细胞等复合靶标相比有明显差异,筛选难度更大。因此需要根据其自身结构特点和核酸适配体的应用目的选定靶标或核酸库的固定方法,优化靶标核酸复合物的分离方法。本文介绍了不同类型小分子(具有基团差异的单分子、含相同基团分子和手性分子等)靶标的选择及其核酸适配体的筛选方法,并对核酸库的设计、与靶标结合的核酸的分离方法和亲和作用表征方法进行了介绍,列出了自2008年以来报道的40余种小分子靶标的核酸适配体序列和复合物的平衡解离常数(K_d)。 王勇 赵新颖 石冬冬 杨歌 屈锋关键词:核酸适配体 毛细管电泳筛选盐酸克伦特罗核酸适配体的方法研究 被引量:6 2018年 毛细管电泳(CE)被认为是核酸适配体筛选的高效方法,其无需介质固定,在溶液相中完成筛选,分离高效,样品用量少,筛选成本低。但由于小分子靶与核酸的结合位点少,且小分子的核酸复合物与核酸库的电泳迁移率差异小,通常认为CE-SELEX不适用于筛选小分子靶标的适配体。本研究建立了基于CESELEX的盐酸克伦特罗靶标的的适配体筛选方法。将80 nt的ssDNA库与盐酸克伦特罗特混合孵育,通过CZE-UV分离混合物。收集ssDNA库峰前的馏分,通过PCR扩增和ssDNA制备,完成第一轮筛选。将次级核酸库经过3轮筛选,获得10条ssDNA序列。选择3条亲和力较强的序列Apt 4、Apt 7、Apt 12,通过CE-LIF测定其与盐酸克伦特罗的K_d分别为9.315×10^(-7)mol/L、1.040×10^(-6)mol/L和1.143×10^(-5)mol/L。软件分析表明,上述3条序列均可形成茎环二级结构,其中Apt 4茎环结构的自由能最低,结构最稳定。以沙丁胺醇为对照,验证了3条序列,具有较高的特异性。 杨歌 朱超 刘晓慧 王勇 屈锋关键词:盐酸克伦特罗 毛细管电泳 2013年毛细管电泳技术年度回顾 被引量:7 2014年 本文为2013年毛细管电泳(CE)技术的年度回顾。介绍了2013年涉及CE技术的国际会议6个,国内会议2个,对各会议的研究报道进行了总结。归纳了在ISI Web of Science中检索的2013年度发表的与CE技术相关的论文,并对这些论文在生物医药研究和检测器使用以及重要分析化学杂志发表的情况进行了分类说明。 赵新颖 屈锋 王勇 王晓倩关键词:毛细管电泳