王斌
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：青岛大学医学院生物学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 沙蚕提取物的抗氧化活性研究被引量：12
- 2007年
- 目的探讨沙蚕提取物的抗氧化活性。方法采用DPPH法观察沙蚕提取物的抗氧化活性。通过Sephadex LH-20凝胶过滤,对沙蚕提取物中的抗氧化物质进行了初步分离纯化。结果与结论沙蚕提取物具有较强的清除自由基(DPPH)的能力,通过定性分析方法确定该物质为一类小分子量的多肤类物质。
- 黄琳段磊李荣贵王斌
- 关键词：双齿围沙蚕自由基抗氧化性
- 重组沙蚕溶栓活性蛋白酶的纯化及其性质研究被引量：4
- 2007年
- 目的表达、纯化重组沙蚕溶栓活性蛋白酶并对其性质进行研究。方法将表达栽体pMAL-PPA转化入E.coli DH5α构建工程菌,IPTG诱导工程茵大量表达麦芽糖结合蛋白-沙蚕溶栓活性蛋白酶(MBP- PPA),细胞裂解液中融合蛋白经Amylose-resin亲和层析与DEAE-Sepharose FF离子交换层析得到了纯化．用Factor Xa切割融合蛋白后经酪蛋白平板法检测其纤维蛋白溶酶原激活活性．然后对其部分性质进行了研究。结果构建了表达MBP—PPA的工程菌,经纯化得到相对分子质量约51kDa的融合蛋白,Factor Xa切割融合蛋白后,重组沙蚕溶栓活性蛋白酶(PPA)体外具有纤维蛋白溶酶原激活活性,性质研究表明PPA热稳定性好,最适pH为8.0,该酶在pH6.0～9.0范围内有较好的稳定性,酶活在有机溶剂中至少维持20d,25 mmol．L^(-1)PMSF能完全抑制其活性。结论证实PPA是一种纤溶酶原激活荆,且将来有望成为一种新型溶栓药物。
- 李荣贵赵峰杨宏杜桂彩汪靖超王斌
- 关键词：沙蚕纯化
- 重组沙蚕激酶的诱导表达和分离纯化被引量：1
- 2008年
- 将已构建好的表达载体pGEX-4T-2SAK转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合的沙蚕激酶蛋白,通过GST树脂亲和吸附和凝血酶酶切及冷冻干燥等步骤进行分离纯化,用SDS-PAGE分析要重组的目的蛋白及纯化后的蛋白。纯化后的沙蚕激酶经纤维平板法测定具有溶栓活性。冷冻干燥品经SDS-PAGE分析表明达到电泳纯。
- 黄琳王斌李荣贵
- 关键词：重组融合蛋白分离纯化
