李鹏
- 作品数：3 被引量：32H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学电子电信更多>>
- 鸡肾型传染性支气管炎病毒G118株的分离及鉴定被引量：18
- 2006年
- 王晶钰李鹏倪斌张彦明郭抗抗吴涛赵希斌
- 关键词：鸡肾型传染性支气管炎病毒鸡传染性支气管炎免疫鸡群经济损失养鸡业传染病
- 鸡肾型IBV地方分离株N基因的克隆及分子遗传变异分析被引量：7
- 2006年
- 用RT-PCR方法对分离于陕西省不同地区的8个鸡肾型IBV毒株的Ⅳ基因分别进行了扩增,将各扩增产物与T载体连接后,转化感受态细胞筛选阳性克隆质粒并进行基因测序,用DNAstar软件将这8个毒株与GenBank收录的7个IBV代表毒株的Ⅳ基因进行了比较分析,研究了其变异情况。结果表明,B01,YL,WH和 YX株与7株代表毒株的同源性较高,而G,BJ,WG,FF株与7个代表毒株的同源性相对较低。氨基酸推导序列比对结果表明,N蛋白突变以散在的点突变形式为主,其中46,48,50,75,78,189,232,236,237,299,301,350,366等位点容易发生突变,突变位点无明显规律性。
- 王晶钰邓小敏张彦明罗艳李鹏郭抗抗
- 关键词：肾型传染性支气管炎病毒地方分离株N基因
- 猪瘟流行毒株E0蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立被引量：8
- 2008年
- 【目的】表达猪瘟保护性抗原E0蛋白,用以建立猪瘟抗体检测方法,为进一步开发诊断试剂盒和研究E0蛋白的免疫学功能奠定基础。【方法】将猪瘟野毒株FJ237-E0基因插入原核表达载体pET32a中,以BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,将表达的重组蛋白通过His亲和层析柱进行纯化,以纯化的His-E0融合蛋白作为诊断抗原,通过探索抗原包被量和抗体血清稀释倍数,建立检测猪瘟E0抗体的ELISA方法。【结果】成功克隆了CSFV E0基因,其核苷酸序列为687 bp,编码229个氨基酸。经His亲和层析柱纯化检测纯度为0.587 mg/mL;SDS-PAGE电泳结果显示,表达的E0蛋白分子质量约为50.3 ku,表达的重组蛋白为可溶性蛋白,表达量占菌体总蛋白的30%;ELISA方阵确定的最佳抗原包被量为100 ng,血清稀释倍数为1∶30,建立的ELISA方法与IDEXX公司猪瘟病毒抗体检测试剂盒的阳性符合率为92.3%,阴性符合率为85.7%。【结论】建立的ELISA检测方法,不但为猪瘟抗体监测提供了一种比较实用的血清学监测手段,也为进一步开发猪瘟抗体检测试剂盒奠定了基础。
- 李鹏张彦明张志李晓成王晶钰张燕霞
- 关键词：E0基因原核表达间接ELISA
