张鹏
- 作品数：4 被引量：31H指数：3
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 一株产紫杉醇内生真菌YN6的分离及鉴定被引量：20
- 2011年
- 从云南红豆杉(Taxus yunnanensis)树皮内表皮中分离得到75株内生真菌,采用基于紫杉醇合成关键酶10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-10-O-乙酰基转移酶(10-deacetylbaccatinⅢ-10-O-acetyl transferase,DBAT)和C-13苯丙氨基侧链CoA乙酰基转移酶(C-13 phenylpropanoid side chain-CoAacyltransferase,BAPT)基因为标志分子的快速筛选方法获得一株可产紫杉醇的内生真菌YN6,并通过高效液相色谱法和质谱法对其紫杉醇进行分析.同时,通过对内生真菌YN6的形态特征分析以及18S rDNA序列分析将其初步鉴定为拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis sp.)真菌.拟盘多毛孢YN6的紫杉醇产量约为120～140μg/L,是目前已报道的紫杉醇产量较高的野生菌株之一.拟盘多毛孢YN6的发现为微生物发酵生产紫杉醇提供了潜在的优良种质资源.
- 张鹏张鹏周蓬蓬刘博周蓬蓬王春兰
- 关键词：云南红豆杉内生真菌紫杉醇
- ggpps 5'-侧翼序列的克隆及其启动子功能验证被引量：2
- 2010年
- 目的:研究牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPPs)基因启动子的活性;方法:从曼地亚红豆杉细胞中克隆ggpps基因5'-侧翼序列,并将该侧翼序列代替pBI121质粒上的CaMV35S启动子,以Gus基因作为报告基因构建植物表达载体,并进一步导入农杆菌LBA4404中获得阳性转化子,然后用叶盘转化法验证该侧翼序列的启动子活性;结果:本研究从曼地亚红豆杉细胞中成功克隆了ggpps基因的5'-侧翼序列,并且验证了该侧翼序列具有启动子活性;结论:ggpps基因的5'-侧翼序列的测序结果表明本实验成功克隆了该侧翼序列,启动子功能验证结果表明ggpps5'-侧翼序列具有启动子活性,这些结果为进一步的通过缺失法进行ggpps基因启动子功能研究奠定了基础。
- 郭佳玉李佟清李书涛张鹏张鹏付春华
- 关键词：紫杉醇启动子活性
- 一株产紫杉醇的曼地亚红豆杉内生真菌的分离及鉴定(摘要)(英文)被引量：8
- 2010年
- [目的]分离并鉴定1株产紫杉醇的曼地亚红豆杉内的内生真菌。[方法]从曼地亚红豆杉树皮内表皮中分离得到32株内生真菌,并通过高效液相色谱法检测其发酵产物。[结果]筛选获得1株可以产紫杉醇的内生真菌M57,其紫杉醇产量为45～50μg/L,并通过对M57菌落的形态学观察以及18S rDNA序列分析初步将其鉴定为根霉属(Rhizopus)真菌。[结论]该菌株的发现为微生物发酵法生产紫杉醇提供了具有潜在应用价值新的菌种。
- 李佟清张志建张鹏张鹏王春兰刘博付春华付春华
- 关键词：紫杉醇曼地亚红豆杉内生真菌ENDOPHYTICFUNGITAXOL
- 紫杉醇合成关键酶BAPT基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2010年
- 目的:克隆曼地亚红豆杉紫杉醇生物合成途径中的关键酶3-氨基-3-苯基丙酰转移酶(3-amino-3-phenylpropanoyltrans-ferase,BAPT)基因,并在大肠杆菌中表达。方法:首先提取曼地亚红豆杉细胞的总RNA,反转录获得其sscDNA,并以其为模板扩增BAPT酶的基因,然后将其与原核表达载体pET32a(+)连接,构建重组质粒pET32a(+)-BAPT,并将重组质粒转入E.coliBL21宿主中诱导表达。结果:扩增获得1338bp的BAPT基因序列,成功构建了原核表达质粒pET32a(+)-BAPT,并在E.coliBL21中实现高效表达。结论:BAPT基因表达产物的分子量约为51kDa,与预期大小一致。该研究为进一步分析曼地亚红豆杉BAPT酶的酶学特性奠定了基础。
- 张志建郭佳玉张鹏张鹏徐盼盼刘博付春华付春华
- 关键词：曼地亚红豆杉紫杉醇原核表达
