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李涛
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1
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供职机构:
南方医科大学基础医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王静
南方医科大学基础医学院
欧小利
南方医科大学基础医学院
梅柱中
南方医科大学基础医学院
姜勇
南方医科大学基础医学院
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王静
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2017
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NFKBIA 3'UTR功能鉴定及相互作用蛋白的蛋白质组学筛选
2017年
[目的]鉴定NFKBIA基因3'非翻译区功能并筛选与其相互作用的蛋白质。[方法](1)PCR扩增获得luciferaseNFKBIA 3'非翻译区融合片段并克隆至p GL3-control载体中获得重组质粒p GL3-NF,转染NIH3T3细胞24h后回收细胞检测荧光素酶活性。(2)制备生物素标记的NFKBIA 3'非翻译区RNA探针,通过链亲和素-生物素RNA-pull down获得与其相互结合的蛋白质并进行质谱鉴定。[结果](1)NFKBIA 3'非翻译区能显著性降低与其相连的荧光素酶基因的表达(p<0.001)。(2)质谱鉴定得到Myosin9等24种与NFKBIA 3'非翻译区相互作用的蛋白质。[结论]NFKBIA基因3'非翻译区对与其相连的基因的表达起负调控作用。与NFKBIA基因3'非翻译区相互结合的24种蛋白质之间存在直接或间接的相互作用。
王静
李涛
欧小利
姜勇
梅柱中
关键词:
MRNA
RNA结合蛋白
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