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杨静

作品数:1 被引量:1H指数:1
供职机构:重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心更多>>
发文基金:重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达质粒
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇戊糖
  • 1篇结核
  • 1篇结核分枝杆菌
  • 1篇抗原
  • 1篇分泌抗原
  • 1篇分枝杆菌
  • 1篇杆菌
  • 1篇CFP10

机构

  • 1篇重庆医科大学

作者

  • 1篇何永林
  • 1篇杨春
  • 1篇杨静

传媒

  • 1篇重庆医科大学...

年份

  • 1篇2013
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
CFP10-ESAT6-PPE68融合基因原核表达质粒的构建和表达被引量:1
2013年
目的:构建结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,M.tb)CFP10-ESAT6-PPE68融合基因原核表达质粒,并且在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法:以M.tb H37Rv株DNA作为模板,PCR法扩增ESAT6和PPE68基因,利用基因拼接技术中的Gene-SOEing法扩增ESAT6-PPE68融合基因,克隆至原核表达质粒pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a(+)-ESAT6-PPE68。再分别以H37Rv株DNA和重组质粒pET-32a(+)-ESAT6-PPE68为模板扩增CFP10和ESAT6-PPE68基因,Gene-SOEing法获取目的基因CFP10-ESAT6-PPE68,克隆至pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a(+)-CFP10-ESAT6-PPE68,转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。结果:CFP10-ESAT6-PPE68酶切片段大小与理论值符合,基因测序结果显示融合基因CFP10-ESAT6-PPE68的序列与Genbank中序列一致,并在大肠杆菌中成功诱导表达了目的蛋白,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,相对分子量约为77 kD。结论:成功构建了M.tb CFP10-ESAT6-PPE68融合基因的原核表达质粒,并诱导表达出了融合蛋白,为该融合蛋白在结核病血清诊断学中的应用奠定了实验基础。
冯鑫杨静张春燕穆柳青徐蕾何永林董志玲杨春
关键词:结核分枝杆菌融合蛋白
共1页<1>
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