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张勇
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
成都市农林科学院
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发文基金:
成都市科技攻关计划项目
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相关领域:
农业科学
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合作作者
张汝全
成都市农林科学院
付绍红
成都市农林科学院
牛应泽
四川农业大学油菜研究中心
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作者
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牛应泽
1篇
付绍红
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张汝全
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张勇
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年份
1篇
2008
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甘蓝型油菜PEPC基因保守序列的克隆和种子特异性ihpRNA表达载体的构建
被引量:5
2008年
为了通过转基因途径获得油菜种子中PEPC基因发生转录后基因沉默,通过PCR扩增分别分离得到了甘蓝型油菜种子特异性表达的Napin启动子序列(1138bp)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因保守序列(181bp),将它们分别克隆到pMD18-T载体中,利用中间载体pBS-NEI构建了PEPC基因的反向重复框。再将PEPC基因片段以正向的方式连接到一个可剪切的内含子5'末端,以反向的方式连接到该内含子的3'末端;然后将Napin启动子序列克隆到植物表达载体pCAMBIA1391的pUC18多克隆位点上,获得了种子特异表达的载体pCAMNapin;再将PEPase基因的反向重复序列克隆到pCAMNapin载体Napin启动子的3'末端,构建了具有种子特异性表达的PEPC基因的ihpRNA表达载体pCAMNapin-B2-NEI-B1。通过限制性内切酶酶切对载体作了鉴定分析。
张勇
张勇
付绍红
张汝全
关键词:
甘蓝型油菜
PEPC基因
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