国家自然科学基金(31372280)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李青旺程建勇耿果霞马丽吴民耀更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学陕西师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- p38MAPK抑制剂SB202190对猪颗粒细胞活力的影响被引量：2
- 2016年
- p38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated potein kinase,MAPK)家族成员,是细胞内重要的信号转导系统之一,对细胞的生长、分化、凋亡具有重要影响及作用。为探究p38MAPK信号对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制,研究以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模型,在培养液中分别添加浓度为0、1、10、20μmol/L的p38MAPK特异性抑制剂SB202190。以免疫细胞化学染色法鉴定体外培养猪卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测其增殖活性,应用Annwxin V-FITC/PI及细胞周期试剂盒染色检测细胞凋亡及细胞周期状况,以实时定量PCR检测猪卵巢颗粒细胞中凋亡、周期相关基因的相对表达水平。结果表明,添加p38APK信号抑制剂SB202190可抑制体外培养猪卵巢颗粒细胞的增殖活性,20μmol/L处理组与其他组相比呈显著性差异(P<0.05);20μmol/L SB202190添加处理未显著影响颗粒细胞的凋亡水平,而该浓度SB202190可将大部分细胞阻滞在G1/G0期,与对照组相比差异显著(P<0.05);基因相对表达水平检测显示SB202190添加可抑制Fas、FasL、CDK-4的表达,而同时促进Bcl-2、Bax、P27的表达(P<0.05),对Caspase-3的表达没显著影响(P>0.05)。综上所述,SB202190通过调控猪卵巢颗粒细胞的周期来影响其增殖作用,但对其凋亡没有影响。
- 石美虹耿果霞贺亚媚程建勇李青旺
- 关键词：P38MAPK颗粒细胞细胞活力
- 二甲基亚砜对猪精液冷冻保存效果研究被引量：7
- 2014年
- 用二甲基亚砜(DMSO)替代甘油做猪精液冷冻保护剂并对其效果进行研究。以3%甘油作为对照组,比较不同浓度的DMSO(40、50、60、70、80mL/L)对猪精液冷冻保护效果的影响,从而得到DMSO的最佳添加量。同时,将甘油和DMSO配伍(4∶1、3∶1、3∶2、1∶1和2∶3)成最终浓度为3%的混合冷冻保护剂,并分别记作A、B、C、D和E组,对比其对猪精液冷冻保存的效果,筛选出最佳配比。结果显示,添加6%的DMSO,解冻后精子畸形率、质膜完整率和顶体完整率均明显优于对照组和其它DMSO添加组(P<0.05),分别为16%、49%和51%,解冻后精子活率为26%显著高于其它DMSO添加组(P<0.05),但低于对照组(P<0.05)。B组解冻后精子畸形率为13%,显著低于C组、D组、E组、4%、5%、7%、8%DMSO添加组和对照组(P<0.05),但与A组、6%DMSO添加组差异不显著(P>0.05),顶体完整率和质膜完整率分别为53%和52%,均显著高于40、50、70、80mL/L DMSO添加组和其他配伍组(P<0.05),但与6%DMSO添加组差异不显著(P>0.05),解冻后精子活率37%显著低于对照组(P<0.05),但显著高于其他DMSO添加组和混合配伍组(P<0.05)。所以,DMSO单独添加时,最佳添加量为60mL/L,而最终浓度为30mL/L的混合冷冻保护剂最佳配比是甘油与DMSO为3∶1。
- 马丽李青旺吴民耀
- 关键词：猪精液冷冻保存最佳配伍
- Wortmannin抑制Wnt/β-Catenin通路对猪卵巢颗粒细胞发育的影响被引量：4
- 2019年
- 为探究PI3K通路与Wnt/β-Catenin通路在猪卵巢颗粒细胞发育中的互作关系以及调控功能,以不同浓度(DMSO,0.1,1,1.5,3,5μM)PI3K通路抑制剂Wortmannin处理体外培养猪卵巢颗粒细胞48h,CCK-8法检测猪卵巢颗粒细胞细胞活力,Western Blot法检测β-Catenin蛋白水平;5μMWortmannin处理体外培养猪卵巢颗粒细胞48h,实时定量PCR检测猪卵巢颗粒细胞内类固醇生成、激素受体和细胞凋亡相关基因的表达。结果表明,Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞可抑制颗粒细胞细胞增殖活力,其中3μM和5μMWortmannin,相对其他处理组,显著地(P<0.05)降低细胞增殖活力;对应的,不同浓度的Wortmannin也阻遏Wnt/β-Catenin通路,对比其他组,3μM和5μMWortmannin处理组抑制效果最显著(P<0.05);实时定量PCR检测结果表明,5μMWortmannin处理显著下调猪卵巢颗粒细胞CYP19A1(P<0.001)和CYP11A1(P<0.01)mRNA水平,抑制激素受体基因FSHR和LHCGR基因表达(P<0.05),促进Caspase3(P<0.05)和PTSG2(P<0.01)表达。综上所述,Wortmannin抑制猪卵巢颗粒细胞Wnt/β-Catenin通路,诱导细胞活力下降,促进细胞凋亡,并且阻碍激素受体表达和类固醇激素合成。
- 杨有福耿果霞陈华丽程建勇李青旺
- 关键词：WORTMANNINWNT/Β-CATENIN通路PI3K通路颗粒细胞
