国家自然科学基金(30471635) 作品数:58 被引量:138 H指数:6 相关作者: 邢飞跃 曾耀英 王通 于哲 肇静娴 更多>> 相关机构: 暨南大学 四川大学 广州中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Jagged-1对骨髓来源树突状细胞生成细胞因子的影响 被引量:1 2009年 目的:探讨可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1)对重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)产生细胞因子的影响。方法:建立rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导DC的模型,观察Jagged-1/Fc对DC分化的形态学影响,通过Luminex蛋白液相芯片技术和ELISA检测其细胞因子的表达水平,藉MTT法测定可溶性Jagged-1/Fc诱导的DC对同种异基因淋巴细胞增殖的刺激能力。结果:除了TGF-β,Jag-ged-1/Fc诱导的DC与细菌脂多糖(LPS)或酵母聚糖A诱导的DC不同,表现为生成TNF-α的水平明显降低,IL-4显著增高,而IL-10、IL-6、IL-2、IL-12和IFN-γ的水平与对照组无明显差异。γ分泌酶抑制剂DAPT能逆转Jagged-1/Fc抑制DC生成TNF-α。混合淋巴细胞反应显示Jagged-1/Fc诱导的DC对T细胞增殖的刺激能力最弱,LPS诱导的DC的刺激能力最强。结论:Jagged-1/Fc诱导的DC倾向介导免疫耐受,指导初始T细胞向Th2细胞偏离。 方志远 邢飞跃 郭中锋 陈玲关键词:JAGGED-1 细菌脂多糖 树突状细胞 细胞因子 Jagged1在树突状细胞介导淋巴细胞诱导皮肤移植免疫耐受中的作用 2008年 目的:探讨Jagged1在树突状细胞(DC)介导淋巴细胞诱导同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植术,受体小鼠分为对照组,Jagged1+DAPT处理组和Jagged1处理组。取供体小鼠淋巴细胞加入经rmIL-4和rmGM-CSF处理9 d的供体骨髓细胞中,当日和隔日分别加入Jagged1和DAPT。2 d后取淋巴细胞,于皮肤移植第0天、第2天和第4天,经尾静脉注入受体小鼠。观察皮肤移植物存活时间和移植物病理变化,并检测受体小鼠混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应。结果:Jagged1处理组的皮肤移植物平均存活83.6 d,显著长于其它各组(P<0.01);Jagged1处理组移植皮片内浸润的炎细胞数量明显减少;在混合淋巴细胞反应中,Jagged1处理组小鼠对供体小鼠呈现低反应性(P<0.01),而对第三方无关供体KM小鼠表现强烈的增殖反应,Jagged1处理组小鼠在迟发型超敏反应中也表现出显著的低反应性(P<0.01)。结论:输注Jagged1联合DC处理的淋巴细胞诱导受体获得供体抗原特异性的免疫耐受。 陈玲 邢飞跃 狄静芳 陈笛 廖继东关键词:JAGGED1 树突状细胞 骨髓细胞 皮肤移植 Jagged-1对淋巴细胞生成细胞因子的影响 2010年 目的:探讨可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白对小鼠淋巴细胞产生细胞因子的影响。方法:不同时间和不同浓度Jagged-1/Fc处理小鼠淋巴细胞,ELISA检测其培养上清中细胞因子的水平,并用Westernblot分析相关蛋白NICD和Del-tex的表达。结果:低浓度Jagged-1/Fc对淋巴细胞生成IL-17无明显影响,但高浓度Jagged-1/Fc(500μg/L)组IL-17的表达量是对照组的64.75倍,并且随着时间的增加而减少;IFN-γ随着Jagged-1/Fc浓度的增加而减少。Westernblot分析显示Jagged-1/Fc处理组的NICD和Deltex的表达明显高于对照组和Anti-Jagged-1组。结论:高浓度Jagged-1/Fc能够诱导淋巴细胞表达IL-17,可能在指导初始T细胞向Th17细胞偏离中发挥作用。 陈振埕 邢飞跃关键词:JAGGED-1 IL-17 细胞因子 淋巴细胞 细胞外信号调节激酶1/2信号通路在小鼠T细胞增殖、周期和活化中的作用 2007年 目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在小鼠T淋巴细胞增殖、周期和活化中的作用。方法:分离小鼠淋巴结细胞,藉多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激,流式细胞术分析ERK1/2信号通路的特异性阻断剂PD98059对小鼠T淋巴细胞增殖、周期和活化的影响。结果:活体染料羧基荧光素乙酰乙酸染色分析显示,不同浓度(5、10、20、30、40μmol/L)的PD98059对ConA诱导的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用,呈现剂量依赖关系(r=0.985,P<0.01)。碘化丙锭染色分析表明,PD98059可阻止ConA刺激的T淋巴细胞进入S期和G2/M期,PD98059对PDB+Ion刺激的T淋巴细胞细胞周期的影响与ConA刺激相似,不同的是S期和G2/M期的变化较ConA作用更显著。荧光标记单克隆抗体染色显示,不同浓度的PD98059仅能轻微影响T淋巴细胞表面活化标志CD69和CD25的表达。结论:PD98059对小鼠T淋巴细胞的增殖有明显抑制作用,并阻止其进入S期和G2/M期,但不能明显抑制小鼠T淋巴细胞的早期和中期活化。 滕振平 邢飞跃 季煜华关键词:细胞外信号调节激酶1/2 T淋巴细胞 增殖 细胞周期 活化 TLR9的特性及其介导CpG DNA的信号通路 被引量:2 2005年 李岩 邢飞跃关键词:CPG 信号通路 免疫应答 特异性配体 靛蓝和靛玉红对小鼠T细胞活化与增殖的影响 被引量:13 2005年 目的:研究靛蓝(IB)和靛玉红(IR)对小鼠T细胞活化和增殖的影响。方法:以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T细胞活化和增殖,利用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子表达情况;通过2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-苯二磺酸)-2H-四唑单钠盐(WST-1)法测定细胞增殖;通过CFDA-SE染色流式细胞术检测增殖细胞各代所占比例和增殖指数(PI)。结果:小鼠T细胞离体培养6 h后,对照组活化比率为(14.25±2.25)%,在ConA的刺激下小鼠T细胞活化显著(35.25±2.31)%(P<0.01),IB和IR分别显著降低活化,(26.88±0.99)%和(23.98±2.25)%(P<0.01)。在ConA的刺激下,小鼠T细胞WST-1吸收度(1.28±0.09)显著高于对照组(0.33±0.02)(P<0.01)。IB和IR分别显著降低了ConA引起的WST-1吸收度增加(P<0.01)。在培养48 h后,空白对照组CFDA-SE流式细胞术检测结果仅显示单一亲代峰(parent),PI为1.0。ConA刺激下小鼠T细胞明显增殖,出现子一代和子二代峰,PI为1.36。在IB或IR作用下,ConA介导的小鼠T细胞增殖明显下降,亲代峰细胞数增多,子一代和二代的细胞数降低,PI均为1.22,低于ConA组。结论:靛蓝和靛玉红均可以显著的抑制ConA介导的小鼠T细胞的活化和增殖。 王通 曾耀英 肇静娴 胡英杰 江逊 狄静芳 冯铮关键词:靛蓝 靛玉红 T淋巴细胞 增殖 流式细胞术 可溶性Jagged1/Fc嵌合蛋白对小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期的影响 被引量:1 2008年 目的:研究可溶性Jagged 1/Fc嵌合蛋白在小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期中的作用。方法:选择有效剂量为500μg/L Jagged 1/Fc嵌合蛋白(Jagged 1/Fc),以活体染料/羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色,建立在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激下评价淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术分析Jagged 1/Fc对淋巴细胞增殖的作用;采用碘化丙锭染色检测Jagged 1/Fc对PDB加Ion刺激的淋巴细胞周期变化的影响;利用荧光标记的mAb双染技术观察Jagged 1/Fc对T细胞早期和中期活化标志CD69和CD25表达的影响。结果:Jagged1/Fc对ConA刺激或非刺激的CD3+细胞CD69和CD25的表达无明显影响,对ConA或PDB加Ion刺激或非刺激的淋巴细胞的增殖指数也无明显影响,导致非刺激的淋巴细胞sub-G0期细胞百分比增高,S期细胞百分比降低,但并不影响PDB加Ion诱导的淋巴细胞各期的变化。结论:这些结果提示500μg/L Jagged 1/Fc对小鼠淋巴细胞活化和增殖无明显作用,对PDB加Ion刺激的淋巴细胞周期也无明显影响,但能促进未受刺激的淋巴细胞凋亡,使细胞停滞于G0/G1期,阻止其进入S期。 邢飞跃 于哲 刘静 季煜华关键词:JAGGED 淋巴细胞 活化 增殖 细胞周期 喜树碱诱导Jurkat细胞线粒体膜电势和线粒体质量变化的研究 被引量:4 2006年 目的:研究喜树碱(camptothecin,CPT)诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体膜电势和线粒体质量的变化。方法:用喜树碱处理Jurkat细胞,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞早期凋亡,PI染色流式细胞术测细胞周期,Annexin V-PE/DiOC6(3)双染流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm),NAO染色流式细胞术检测线粒体质量。结果:在10μmol.L-1CPT诱导下,6 h时Jurkat细胞早期凋亡的细胞比率(22.59±1.04)%显著高于对照组(3.93±0.73)%(P<0.01)。CPT组坏死比率(2.48±0.53)%与对照组(2.78±0.63)%无显著差异(P>0.05);并可使细胞出现明显的凋亡峰。晚期凋亡的细胞比率为(13.58±0.97)%显著高于对照组(3.18±0.51)%(P<0.01),CPT组G0/G1期细胞比率(48.14±0.96)%,明显高于对照组(44.09±0.43)%(P<0.01)。CPT组线粒体发生明显去极化现象,AnnexinV+DiOC6(3)-的细胞比率为(19.47±0.69)%,而对照组比率为(4.21±0.40)%,差异显著(P<0.01)。同时,CPT组线粒体质量显著低于对照组:CPT组NAO+细胞比率为(74.77±1.66)%,对照组为(92.24±1.41)%(P<0.01)。结论:CPT诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体去极化作用增强并且线粒体质量下降,表明该凋亡过程与线粒体途径密切相关。 江颖娟 曾耀英 王通 肇静娴 刑飞跃 王希朝 梁佩燕关键词:喜树碱 JURKAT细胞 线粒体 膜电位 细胞凋亡 Human TSLP-Educated DCs 被引量:4 2008年 Thymic stromal lymphopoietin (TSLP), an IL-7-related cytokine, is widely expressed by epithelial cells in many tissues with different biological effects. Human TSLP (hTSLP) has been shown to play an important role in promoting T cell homeostasis, developing nondeletional central tolerance, amplifying epithelium-induced class switching, inducing atopic diseases and maintaining intestinal noninflammatory environment. Among diverse cells responding to hTSLP, dendritic cells (DCs) are the most obviously characterized target cells. In this review, we attempt to outline an effect of the functional versatility of hTSLP-activated DCs (hTSLP-DCs) on T cells. Cellular & Molecular Immunology. Jiongkun Wang Feiyue Xing胸腺细胞和细胞器水平的线粒体膜电势研究 被引量:3 2006年 以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡;利用PI和AnneXin V/PI流式细胞术分别检测细胞晚期和早期凋亡;利用JC-1和DiOC_6(3)/PI在细胞水平检测凋亡中线粒体膜电势(△ψm)变化:抽提线粒体,利用JC-1直接染色技术检测现存线粒体△ψm情况。实验结果显示,DEX显著诱导胸腺细胞早期和晚期凋亡,凋亡细胞主要来自G_0/G_1期;细胞水平可见DEX介导与△ψm相关的J-aggregate和DiOC_6(3)可染性降低,同时介导线粒体数量显著降低,6h细胞膜完整性无显著变化:单纯线粒体检测结果显示,多数线粒体维持正常△ψm。提示,DEX介导胸腺细胞凋亡中线粒体数量降低,现存线粒体多保持着正常△ψm以维持凋亡过程细胞能量供给。 王通 曾耀英 邢飞跃 梁佩燕 梁兆端 贺芳关键词:凋亡 细胞水平