陕西省教育厅产业化培育项目(09JC19)
- 作品数:7 被引量:51H指数:4
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- 相关机构:陕西科技大学四川省食品发酵工业研究设计院华北煤炭医学院更多>>
- 发文基金:陕西省教育厅产业化培育项目陕西省科学技术厅农业攻关项目陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 羊乳中掺入牛乳的间接ELISA定量检测被引量:13
- 2010年
- 制备抗β-酪蛋白多克隆血清,免疫吸收封闭与羊乳反应的抗体,获免疫吸收抗体用于乳样的间接ELISA检测中,建立羊乳中掺入牛乳成分的定量免疫学方法。实验表明,该间接ELISA法用于原乳检测时,掺入牛乳的百分含量与A450nm在4%~50%呈线性关系,该方法的最低检出量为4%。所建立的ELISA方法变异系数<5%,回收率在94%~105%之间,符合方法学要求,可用于牛乳掺假的定量检测。对灭菌乳的检测表明,热处理不改变β-酪蛋白与抗体反应的特性,方法还可用于经热加工的乳品检测中。
- 薛海燕胡围围宋宏新韩燕杨战月
- 关键词:多克隆抗体牛乳
- 牛乳中蛋白质的电泳分析技术研究被引量:11
- 2010年
- 运用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-AGE)法分析牛乳蛋白质,以脱脂牛乳为对照,分析牛乳中掺入不同比例大豆蛋白粉和乳清蛋白粉的样品,经凝胶图像分析系统分析得这2种蛋白粉掺入牛乳的最低检出限分别为:0.79%和4.4%(m/m),应用该法对5种市售婴幼儿奶粉进行鉴定,表明该法能较快速准确地表征乳蛋白组成,为乳及乳品质量的监控提供了一种直观有效的手段。
- 宋宏新刘立新柏红梅蒋振威
- 关键词:牛乳蛋白质大豆蛋白粉
- 纳米胶体金的制备及其抗体标记研究被引量:14
- 2011年
- 研究通过光谱扫描,确定了柠檬酸钠还原法制备纳米胶体金的最佳条件:100mL0.01%四氯金酸溶液中添加1%柠檬酸钠2mL,反应10min,制备的胶体金粒径为15~20nm,并将其与抗牛β-酪蛋白IgG连接制得了胶体金标记抗体,通过考马斯亮蓝法测得蛋白标记率为74.5%,采用间接ELISA方法测得金标抗体的效价在1∶4000以上,抗体金标后活性良好,可以满足免疫检测的需要。
- 宋宏新邹联柱李韵李红心
- 关键词:胶体金Β-酪蛋白
- PCR检测牛乳中大肠杆菌基因组DNA的提取方法被引量:3
- 2010年
- 为获得一种适于牛乳样品大肠杆菌PCR检测的基因组DNA提取方法,对饱和酚法、CTAB法、试剂盒法及溶剂裂解法等4种提取方法加以比较,通过考察DNA的纯度、定量分析以及PCR分析,确定一套有效、快速、适合牛乳中提取大肠杆菌的基因组DNA方法——溶剂热裂解法。结果显示该方法提取的DNA模板,适于PCR扩增大肠杆菌DNA,可以用于牛乳中的大肠杆菌检测。
- 宋宏新邹联柱马冬薛海燕
- 关键词:乳品大肠杆菌基因组总DNA聚合酶链式反应
- 竞争ELISA法对牛乳β-酪蛋白的检测被引量:3
- 2010年
- 通过确定包被抗体最佳稀释度(anti-β-CN IgY1:160)、封闭液及封闭时间(含1%明胶的PBST,封闭1h)、酶标抗原(1:20)和待测脱脂牛乳样品稀释液(1:80)抗体作用时间(60min)、底物最佳反应时间(20min)、温度(37℃)等对竞争ELISA效果有重要影响的因素,建立检测牛乳β-酪蛋白的竞争ELISA法。经敏感性实验和重复性实验证明本实验建立的竞争ELISA法最低检出量为5.1μg/mL,变异系数(CV)小于5%,可以开发应用于牛乳及其制品的蛋白质品质快速检测。
- 宋宏新潘洁柏红梅薛海燕
- 关键词:竞争ELISAΒ-酪蛋白
- 卵黄抗体的制备及活性检测被引量:4
- 2010年
- 以灭活的大肠杆菌免疫产蛋母鸡,应用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)测定鸡卵黄中免疫球蛋白(Immunoglobulin of egg yolk,IgY)的活性,并用水稀法、盐析与亲和层析结合的方法制备高效价卵黄抗体.结果显示灭活的大肠杆菌能诱导鸡产生高效价的抗体,效价高达1.6×105,经上述纯化技术路线,制备出了高纯度的IgY.卵黄是一种含量高、经济的特异性抗体源,为疾病的防治与检测提供了新的途径.
- 宋宏新胡围围薛海燕田颖
- 关键词:卵黄抗体纯化
- 食品中大肠杆菌O157:H7的两种检测方法研究被引量:3
- 2011年
- 研究食品中大肠杆菌O157∶H7的两种检测方法,PCR法引物针对特异性粘附毒素基因(eaeA)扩增检测,双抗夹心ELISA采用鸡抗O157∶H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)检测,结果显示两种方法对纯培养物的检测灵敏度都在103~104cfu/mL之间,特异性能满足食品检测需求;PCR法的敏感度较ELISA法高,且较省时。经以牛奶为参考的食品模拟样品(37℃增菌14h)验证两种检测方法的最低检出限均为2.5cfu/25mL样品。
- 宋宏新孙斌薛海燕徐大鹏
- 关键词:PCR