国家自然科学基金(31171718)
- 作品数：21 被引量：144H指数：7
- 相关作者：姜毓君满朝新李理闫天文刘少敏更多>>
- 相关机构：东北农业大学杭州娃哈哈集团有限公司浙江工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一株植物乳杆菌的鉴定及其抑菌特性研究被引量：8
- 2013年
- 从内蒙古传统发酵乳制品中分离筛选到1株具有抑菌活性的乳酸菌。通过API生化反应和16S rDNA、16S-23S rDNA间隔(IGS)序列同源性分析,鉴定该乳酸菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),并命名为植物乳杆菌NDC 75017。利用杯碟法,通过蛋白酶K和胰蛋白酶实验,确定该乳酸菌产生的抑菌物质为蛋白质类。理化性质分析表明该抑菌物质具有良好的热稳定性,100℃处理120 min后仍有较好的抑菌活性;其抑菌活性最适pH值范围为2～4;通过排除有机酸、过氧化氢的干扰,该菌的发酵上清液对单增李斯特菌、藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌及福氏志贺氏菌的生长具有良好的抑制作用。
- 郭颖杨相宜单艺满朝新王今雨董鑫悦姜毓君
- 关键词：乳酸菌抑菌活性
- 不同来源胆盐水解酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2013年
- 根据GenBank上报道的两歧双歧杆菌ATCC 29521的胆盐水解酶基因(BSH)序列和嗜酸乳杆菌NCFM的胆盐水解酶基因(BSHA和BSHB)序列,设计引物通过PCR扩增获得BSH基因,将其连接到表达载体pET28a(+),构建pET-BSH表达质粒,经IPTG诱导表达后,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明在分子质量大小约40、43、45kD处有预期条带出现,初步表明蛋白表达成功。重组菌产生的胆盐水解酶水解甘氨胆酸钠产生的甘氨酸经茚三酮比色法分析,表明该重组的胆盐水解酶具有水解活性。
- 杨士芹满朝新曲行光李彬谢鲲昊姜毓君
- 关键词：胆盐水解酶克隆表达活性测定
- 产γ-氨基丁酸乳酸菌及其应用被引量：8
- 2014年
- γ-氨基丁酸(GABA)是一种在自然界广泛存在的非蛋白质氨基酸,具有降血压、镇静安神、免疫调节等多种生理功能。许多乳酸菌能够利用其谷氨酸脱羧酶催化谷氨酸及其盐类产生GABA。产GABA的乳酸菌菌株种类较多且产量各异,主要来源于泡菜、发酵乳、干酪等酸性食品。谷氨酸脱羧酶直接决定乳酸菌合成GABA的能力,该酶的活性受到底物、辅酶、发酵pH值和发酵时间等多种因素的影响。以高产GABA的乳酸菌作为发酵剂研制富含GABA的发酵乳制品是对乳酸菌益生功能的进一步利用,具有较为广阔的市场价值。因此筛选高产GABA的乳酸菌不仅有利于相关产品的开发,也是研究产GABA乳酸菌相关性质的重要基础。
- 李理刘冶满朝新姜毓君
- 关键词：Γ-氨基丁酸乳酸菌发酵
- 植物乳杆菌NDC75017对Caco-2细胞中il-6表达的影响被引量：3
- 2012年
- 【目的】本研究通过体外实验,分析植物乳杆菌NDC75017对免疫相关基因白细胞介素6(il-6)表达的影响,并进一步揭示其机制。【方法】植物乳杆菌NDC 75017作用于Caco-2细胞0、2、4、6、8、10和12 h,采用Real Time PCR方法检测il-6基因和toll样受体2(tlr2)的表达。植物乳杆菌NDC 75017与Caco-2细胞共培养0、0.5、1、2和4 h,用western blot方法检测NF-κB的磷酸化水平;NF-κB的特异性抑制剂PDTC预处理Caco-2细胞30 min后,再加入植物乳杆菌NDC 75017作用2 h,用Real Time PCR方法检测il-6基因及tlr2的表达量。【结果】植物乳杆菌NDC 75017诱导Caco-2细胞中il-6和tlr2基因的表达,并且分别在诱导8 h和6 h时表达量达到最大。植物乳杆菌NDC 75017能够快速诱导NF-κB的磷酸化作用,在加入其特异性抑制剂PDTC后,il-6和tlr2基因的表达显著下降。【结论】植物乳杆菌NDC 75017能通过tlr2介导的NF-κB信号通路来诱导细胞因子il6短暂性的表达。
- 刘颖满朝新吕学娜韩琳琳薛玉清杨相宜单艺张英华姜毓君
- 关键词：CACO-2细胞NF-ΚB信号通路
- 嗜酸乳杆菌NCFM胞外多糖对小鼠免疫相关基因的调控被引量：3
- 2013年
- 目的:研究嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)NCFM胞外多糖对小鼠免疫相关基因的调控作用。方法:通过构建小鼠模型,对小鼠脏器系数进行分析,提取肠组织RNA,采用Real-time RT-PCR方法对免疫相关基因chemokine(C-C motif)ligand 2(CCL2)和interleukin 18(IL18)的表达情况进行分析。结果:脏器系数随着天数的增加而增加,实验组的脏器系数较对照组相比,显著增加。在2个免疫相关基因中,随着时间的延长,IL18和CCL2呈现出先迅速增加后减少的趋势,同时均在第4天表达量达到最大值,且与对照组相比差异极显著(P<0.01)。结论:胞外多糖可以提高小鼠免疫脏器的质量,并且能够引起免疫相关基因出现特定表达变化,对小鼠机体的免疫调控具有一定的作用。
- 杨相宜满朝新刘颖王今雨郎友董鑫悦闫天文姜毓君
- 关键词：脏器系数免疫相关基因
- 一株植物乳杆菌高密度培养的研究被引量：3
- 2014年
- 通过单因素实验、Plackett-Burman法、最陡爬坡试验对分离自内蒙古传统发酵乳制品中高产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌NDC75017培养基成分及培养条件进行优化研究。确定影响菌体生长的显著因素为葡萄糖、硫酸锰、柠檬酸氢二铵。利用Box-Behnken设计确定了植物乳杆菌NDC 75017的增殖培养基配方。结果表明,菌体在最优条件下进行培养,活菌数可达6.48×1010mL-1。细胞干重可达3.93 g/L。
- 闫天文满朝新刘泳麟柴云雷任欢庞心怡赵玥明姜毓君
- 关键词：响应面设计
- 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)NDC75017产γ-氨基丁酸的影响因素及其代谢机制被引量：7
- 2015年
- 为探索植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)NDC75017产γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的影响因素及相关代谢机制,首先采用响应面法,对菌体积累GABA的发酵条件进行优化。其次,分别采用高效液相色谱和实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcript polymerase chain reaction)测定了不同时间点GABA产量和谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)编码基因gad B的相对表达量。L.plantarum NDC75017发酵过程中产GABA的最佳底物(谷氨酸钠)、辅酶(5’-磷酸吡哆醛)的添加量和发酵初始p H值分别为68.03 mmol/L、20.92μmol/L和4.65。底物与辅酶之间、辅酶与发酵初始p H值之间的交互作用能够显著地影响GABA的积累(P<0.05)。发酵48 h内,基因gad B表达量呈现先升高后下降的趋势,与GABA产量的变化趋势并不完全一致。上述结果表明:底物、辅酶和发酵初始p H值以及它们之间的交互作用是影响L.plantarum NDC75017产生GABA的关键因素。同时GABA的积累不仅受到GAD和gadB的影响,其他与GABA支路(GABA shunt)相关的酶和基因也参与了GABA的代谢。
- 李理满朝新刘少敏李婷牛婕婷姜毓君
- 关键词：Γ-氨基丁酸植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶发酵
- 两种酸奶后酸化期风味物质的比较研究被引量：3
- 2014年
- 比较了传统双菌发酵酸奶和高产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)与双菌复配发酵酸奶在后酸化过程中pH、双乙酰、乙醛及4种有机酸(柠檬酸、丙酮酸、乳酸、甲酸)的变化情况。试验结果显示,以上两种酸奶在后酸化期双乙酰和乙醛含量基本保持一致而有机酸含量差异较大。三菌复配型酸奶中甲酸含量较高而柠檬酸含量较低,其它两种有机酸在两种酸奶中的含量比较接近。上述结果表明,以德式乳杆菌保加利亚亚种(Lb.delbrueckiisubsp.bulgaricus)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)复配一定比例高产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌为发酵剂制作的酸奶保持了酸奶原有的醇香,还形成了一定独特的风味特点。
- 李理丁木满朝新姜毓君
- 关键词：酸奶风味物质植物乳杆菌
- 嗜酸乳杆菌NCFM黏附定植能力的研究被引量：2
- 2014年
- 采用实时定量(Real-time)PCR的方法对嗜酸乳杆菌NCFM在小鼠肠道中的定植情况进行了评价。通过研究发现,实时定量(Real-time)PCR用来菌数的评估具有非常好的线性关系和稳定性。小鼠灌胃一周的过程中,在小鼠的十二指肠、回肠、空肠、盲肠、结肠和粪便中菌体的数量并没有出现数量级上的增长或减少,说明我们灌胃的菌体浓度适当,并没有引起小鼠体内的菌群失调。而在灌胃第1 d,基本上各部分的肠组织和粪便中菌体的数量都有增加,说明灌胃初期菌体在肠道中有较好的定植。而第3、5和7 d小鼠肠道和粪便中的菌体数量上下波动,但并没有显著地增加或减少,说明小鼠体内的菌群数量达到了一个平衡,并不会因为持续灌胃就打破这个平衡。因此,嗜酸乳杆菌NCFM具有良好的定植能力。
- 满朝新李理韩琳琳姜毓君
- 关键词：定植
- 阪崎克罗诺杆菌的16S rDNA鉴定分型被引量：5
- 2015年
- 阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)是一种重要的食源性条件致病菌,易引发新生儿、早产儿、低体重新生儿和免疫力低下的婴幼儿产生严重的脑膜炎、菌血症和坏死性小肠结肠炎。本研究以分离自不同来源、通过生化鉴定的37株阪崎克罗诺杆菌作为研究对象,利用16S rDNA基因测序的方法对阪崎克罗诺杆菌进行鉴定和分型。结果表明:ES4并非为阪崎克罗诺杆菌,说明采用16S rDNA基因测序进行阪崎克罗诺杆菌的鉴定更为可靠;通过构建系统发育树分析,分离菌株位于同一系统发育分支;根据序列同源性比对,可将这一分支下的所有菌株分成7个子群,这表明16S rDNA基因测序可以对阪崎克罗诺杆菌进行分型,进一步揭示其系统发育关系。
- 娄彬彬满朝新费鹏牛婕婷李然柴云雷李理姜毓君
- 关键词：RDNA
