国家自然科学基金(81073098)
- 作品数：4 被引量：33H指数：3
- 相关作者：杨雁伍超江洁美芮文娟何淑芳更多>>
- 相关机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 护肝片通过抑制肝纤维化而阻碍肝细胞癌发展被引量：5
- 2013年
- 目的探讨在DEN诱导的大鼠肝癌模型中,护肝片在肝纤维化—肝癌发展过程中所产生的影响。方法雄性SD大鼠90只随机分为二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)组,正常对照组,护肝片组(921 mg·kg-1)。DEN组和护肝片组给予0.2%DEN溶液灌胃,按体重10 mg·kg-1给药,每周5次,至14周,对照组给予溶媒。护肝片组同时灌胃(ig)给予护肝片溶剂(羟甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配制),每日1次,直至16周。收集所有大鼠血液样本,进行血清学检测。通过病理组织学检查检测肝纤维化的程度。采用试剂盒检测肝组织中羟脯氨酸的含量。采用免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及胎盘型谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase placenta,GST-P)蛋白的表达。结果 DEN能够成功的诱导大鼠在12周发生肝纤维化,在16周发生肝癌。护肝片能够显著抑制肝纤维化—肝癌的发生。在12周时,护肝片能显著降低与肝功能相关的血清学指标以及α-SMA的过度表达,降低纤维化的程度。在16周时,护肝片能显著降低DEN诱导的大鼠肝癌的发生率和多样性。此外护肝片还能降低癌前病变指标γ-谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)和GST-P蛋白的表达。结论护肝片能够通过降低癌前病变指标GGT和GST-P的表达来阻止DEN诱导的肝癌的发生,同时也能减轻肝纤维化的程度,提示GGT与GST-P表达增强与肿瘤的发生密切相关,可能可以作为由纤维化进一步发展为肿瘤的标志,或者有可能成为预测肝癌发生的指标。
- 芮文娟何淑芳伍超胡祥鹏谢雷江洁美杨雁
- 关键词：肝纤维化
- DEN诱导大鼠肝纤维化-肝癌过程中pSmad3L和PAI-1蛋白的表达被引量：12
- 2012年
- 目的建立二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)诱导大鼠肝纤维化-肝癌模型,检测肝组织中磷酸化Smad3连接区(linker-phosphorylated Smad3)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)蛋白的表达。方法♂SD大鼠50只随机分为DEN组和正常对照组,DEN组给予0.2%DEN溶液灌胃,每周5次至14周。对照组给予溶媒。分别于4、8、12、16周结束时处死动物。进行肝组织苏木精-伊红(HE)染色和Van Gieson(VG)胶原纤维染色;分别采用免疫组化法和Western blot法检测肝组织中pSmad3L及PAI-1蛋白的表达。结果对照组肝组织结构正常,DEN组4周时,肝细胞点状坏死及炎性细胞浸润;8周时,肝细胞严重脂肪变性、灶性坏死,门管区出现纤维组织增生;12周时,增生的胶原束包绕并分割肝小叶,正常的肝小叶结构被破坏,假小叶形成;到16周结束时,剩余存活大鼠均形成肝癌,肝癌细胞排列成条索状或团块状,异型性明显。免疫组化结果显示,pSmad3L和PAI-1在正常肝组织中几乎无表达,DEN组4周时肝组织中有少量阳性表达,8周和12周表达量逐渐增强,到16周时达到高峰,尤其是在肿瘤边界区域肝组织的pSmad3L和PAI-1表达更强。Westernblot结果显示,pSmad3L和PAI-1表达也逐渐增强,与免疫组化结果基本一致。结论 DEN诱导大鼠肝纤维化-肝癌动态过程中,pSmad3L和PAI-1蛋白的表达逐渐增强,提示其损伤机制可能涉及TGF-β/Smads/PAI-1通路。
- 芮文娟何淑芳黄先甲方政杭欣李前进胡敏杨雁
- 关键词：肝纤维化肝癌纤溶酶原激活物抑制剂-1WESTERNBLOT
- MAPK抑制因子对HSC中Smad2/3磷酸化及Smad4核转位的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探究3种丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制因子对转化生长因子-β(TGF-β)活化的大鼠肝星状细胞(HSC)中Smad2/3磷酸化及Smad4核转位的影响。方法采用Ⅳ型胶原酶和链酶蛋白酶原位肝灌流法分离正常大鼠HSC并传代培养,分别用细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38抑制因子(PD98059、SP600125、SB203580)与HSC共同培养,再加入TGF-β1活化细胞,采用免疫沉淀和Western blot法检测p Smad2C、p Smad2L、p Smad3L蛋白表达;采用细胞免疫荧光法检测Smad4蛋白表达及细胞内定位情况。结果 Western blot显示静息状态下HSC几乎不表达p Smad2C而低表达p Smad2L、p Smad3L,TGF-β1刺激后显著上调上述磷酸化蛋白表达,p38抑制因子(1、3μmol/L)、ERK抑制因子(1μmol/L)对Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化无显著影响;p38抑制因子(10μmol/L)降低了p Smad3L蛋白表达;ERK抑制因子(3、10μmol/L)降低了p Smad2C蛋白表达;JNK抑制因子(1、3、10μmol/L)减少了p Smad2C、p Smad2L、p Smad3L蛋白表达。TGF-β1刺激可明显诱导Smad4核转位,而3种MAPK抑制因子不同程度地抑制TGF-β1诱导的Smad4转位入核。结论在HSC细胞中TGF-β1可能通过活化JNK通路促进Smad2/3磷酸化,活化ERK、JNK、p38通路促进Smad4核转位。
- 江宇峰伍超吴佳俊王极宇马成骁陈帆吴德卫杨明郑凌云杨雁
- 关键词：大鼠肝星状细胞SMAD2SMAD4
- Compound Astragalus and Salvia Miltiorrhiza Extract Suppresses Hepatocellular-carcinoma-progression by Modulating Multi-targets
- Abundant evidences indicated that activated transforming growth factor beta(TGF-B)/Smad signaling and mitogen ...
- Yan YangChao Wu
- 文献传递
- Compound Astragaius and Salvia Miltiorrhiza extract retards hepatocellular carcinoma progression by inhibiting fibrosis and PAI-1 transcription activity
- ＜正＞Aims:To investigate the effects of Compound Astragalus and Salvia Miltiorrhiza Extract（CASE） on the hepatoc...
- Wen-juan RUILei XIEShu-fang HEChao WUYan YANG
- 关键词：DIETHYLNITROSAMINE
- 文献传递
- 积雪苷霜软膏对兔耳增生性瘢痕组织中Smad4蛋白表达的影响被引量：15
- 2015年
- 目的探讨积雪苷霜软膏对兔耳增生性瘢痕组织中Smad4蛋白表达的影响。方法新西兰大耳白兔18只,随机分为正常对照组、模型组、积雪苷霜软膏组。模型组和积雪苷霜软膏组建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型,术后21 d,积雪苷霜软膏组瘢痕局部涂抹积雪苷霜软膏,每天2次,连续用药28 d;正常组和模型组涂抹软膏基质。每周观察并拍照记录瘢痕的生长情况,于术后49 d处死动物,进行病理、羟脯氨酸和Smad4蛋白检测。结果模型组瘢痕以较快速度生长,积雪苷霜软膏组,瘢痕生长显著被抑制。病理检测显示,模型组增生性瘢痕组织纤维化明显,而积雪苷治疗可显著改善纤维化。羟脯氨酸定量显示,增生性瘢痕组织中羟脯氨酸(Hyp)含量显著升高(P<0.01),而积雪苷治疗显著降低瘢痕组织中Hyp水平(P<0.01)。免疫印迹结果显示增生性瘢痕组织中Smad4蛋白水平显著上调,而积雪苷治疗显著降低Smad4蛋白表达(P<0.01)。结论积雪苷霜抗增生性瘢痕作用可能与调控Smad4蛋白表达有关。
- 江宇峰伍超吴佳俊王极宇庄文豪马腾飞江洁美杨雁
- 关键词：积雪苷霜软膏增生性瘢痕纤维化SMAD4
