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左归丸含药血清通过ERK/TGF-β/Smads信号级联调控MC3T3-E1细胞增殖与分化被引量：11: 2012年; 目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)/转化生长因子β(TGF-β)/Sma和Mad相关蛋白(Smads)信号级联在左归丸含药血清干预成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞增殖与分化中的作用。方法:以倍美力为阳性对照药,对Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,7 d后腹主动脉取血分离含药血清。采用噻唑蓝(MTT)法检测左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞的增殖作用,采用改良钙钴染色法检测碱性磷酸酶(ALP)表达,采用茜素红染色法检测钙化结节,采用Western blotting法检测核结合因子α1(Cbfα1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白表达,采用real-time RT-PCR法检测TGF-β1、Smad4和Smad2 mRNA表达。结果:左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞的促增殖作用呈剂量和时间相关性,其中以低剂量且体积分数为15%作用48 h后对MC3T3-E1的促增殖作用最大;左归丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞ALP表达,增强细胞基质钙化,提高Cbfα1和ColⅠ蛋白分泌,上调TGF-β1、Smad4和Smad2 mRNA表达;加入ERK1/2信号通路特异性阻滞剂PD98059后,MC3T3-E1细胞增殖降低,ALP表达下降,细胞基质钙化减弱,Cbfα1和ColⅠ蛋白分泌降低,Smad4和Smad2 mRNA表达下调,TGF-β1mRNA表达进一步上调。结论:左归丸可能通过干预ERK/TGF-β/Smads信号级联而调控成骨细胞的增殖和分化,这可能是其防治骨质疏松症的机制之一。; 蒿长英任艳玲刘立萍宋囡王智民; 关键词：左归丸细胞外信号调节激酶类 MC3T3-E1细胞

JNK通路对左归丸含药血清调控MC3T3成骨细胞Runx2 mRNA表达的影响被引量：12: 2012年; 目的:探讨c-Jun氨端激酶(JNK)信号通路在左归丸含药血清调控成骨前体细胞(MC3T3-E1)增殖和成骨特异转录因子核心结合因子(Runx2)mRNA表达中的作用。方法:以MC3T3-E1为研究对象,制备左归丸含药血清,选用JNK特异抑制剂SP 600125,实验分为空白对照组、SP 600125组、左归丸组、左归丸加SP 600125组、倍美力组、倍美力加SP 600125组。孵育48 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测SP600125对左归丸含药血清干预MC3T3-E1成骨前体细胞增殖作用的影响,采用Western blot法分析JNK蛋白磷酸化水平,采用Real Time RT-PCR法检测成骨细胞特异转录因子Runx2 mRNA表达情况。结果:与空白对照组比较,左归丸含药血清组显著促进细胞增殖,明显上调p-JNK蛋白和Runx2 mRNA表达(P<0.01);SP600125显著抑制左归丸含药血清诱导的增殖和p-JNK蛋白表达(P<0.01),对Runx2 mRNA表达的影响不显著。结论:JNK信号通路的激活可能参与了左归丸含药血清诱导的MC3T3-E1成骨前体细胞增殖,但左归丸含药血清诱导的Runx2mRNA高表达对JNK信号通路依赖不显著。; 刘立萍任艳玲李然赵金茹蒿长英宋囡; 关键词：左归丸 MC3T3-E1 JNK信号通路核心结合因子

左、右归丸及其拆方对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响被引量：17: 2013年; 目的:研究左、右归丸及其拆方含药血清对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用。方法:分别以左归丸、右归丸、两方共同药、滋肾阴药、补肾阳药、阳性对照药补佳乐和蒸馏水制备的大鼠含药血清加诱导剂(地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠)干预BMSCs,并以不含诱导剂的空白含药血清组为对照,共8组,采用改良钙钴法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,茜素红法观察矿化结节的形成,并用real-time RT-PCR法检测核心结合因子α1(core binding factor alpha 1,Cbfα1)和Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,ColⅠ)mRNA表达,用Western blotting法检测Cbfα1和ColⅠ蛋白表达。结果:左、右归丸及其拆方与阳性对照药补佳乐均可协同诱导剂诱导BMSCs成骨分化,其中,左归丸和滋肾阴药可显著促进ALP生成和矿化结节形成,上调Cbfα1和ColⅠmRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论:左、右归丸及其拆方含药血清能协同诱导剂促进BMSCs成骨分化,左归丸和滋肾阴药促进BMSCs成骨分化的作用优于右归丸和补肾阳药。; 宋囡何文智王智民任艳玲; 关键词：左归丸右归丸骨髓间充质干细胞核心结合因子Α1

左归丸含药血清通过ERK/Smads信号通路干预MC3T3-E1细胞的功能基因表达被引量：19: 2012年; 目的研究ERK1/2信号通路在左归丸含药血清调控MC3T3-E1细胞基因表达中的作用。方法以倍美力为阳性对照药,对SD♀大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,d7腹主动脉取血分离含药血清。采用MTT法检测左归丸含药血清和PD98059对MC3T3-E1细胞增殖作用的影响,采用Western blot法检测ERK1/2蛋白的磷酸化水平及TGF-β1、Smad4蛋白表达,采用Real Time RT-PCR法检测Cbfα1、COLⅠmRNA表达。结果左归丸含药血清和倍美力能促进MC3T3-E1细胞增殖,诱导ERK1/2蛋白的磷酸化,促进TGF-β1、Smad4蛋白分泌,上调其Cbfα1、COLⅠmRNA表达;加入PD98059后MC3T3-E1细胞增殖下降、ERK1/2蛋白的磷酸化水平降低、TGF-β1蛋白表达进一步升高、Smad4蛋白表达降低、Cbfα1、COLⅠmRNA表达下调。结论左归丸能有效促进成骨细胞增殖和分化;左归丸可能是通过发挥雌激素样作用调控了ERK/Smads信号通路,从而达到防治骨质疏松的目的。; 蒿长英任艳玲赵金茹; 关键词：左归丸血清药理学倍美力

左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠肾脏TGF-β_1/Smad4 mRNA表达的影响被引量：27: 2012年; 目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制。方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水;左归丸高、中、低剂量组分别ig 6.4,3.2,1.6 g·kg-1,1次/d;尼尔雌醇组ig 0.021 g·kg-1,1次/周,连续60d。取大鼠左后肢股骨远端1/3做病理切片,光镜下观察骨组织形态学变化,测定骨小梁面积百分比(Tb.Ar);采用双能X射线骨密度仪测定右后肢离体股骨近端1/3及股骨整体的骨密度(BMD);采用RT-PCR法检测大鼠肾髓质的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4 mRNA表达。结果:与模型组比较,左归丸高、中剂量组骨小梁面积百分率(Tb.Ar)显著升高(P<0.05),左归丸高、中剂量组的股骨的骨密度显著升高(P<0.05);各组肾脏组织病理形态学未见明显病理变化;与正常组相比,模型空白组TGF-β1,Smad4 mRNA水平过高表达(P<0.05);与模型组相比,各给药组肾组织中TGF-β1,Smad4 mRNA表达均显著下调(P<0.05),且左归丸各剂量组的下调力度均强于尼尔雌醇组,但以左归丸低剂量组下调最为显著。结论:左归丸能有效防治绝经后骨质疏松症,其作用机制之一可能与其干预肾组织中TGF-β1/Smad4的信号转导通路有关。; 任艳玲李娅玲吕海波刘立萍赵金茹王良辰; 关键词：左归丸绝经后骨质疏松症转化生长因子-Β1 SMAD4

骨髓间充质干细胞在骨向分化的作用及中医药研究进展被引量：13: 2014年; 目的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一种具有自我更新、增殖和分化能力的多潜能干细胞,对在骨形成过程中具有的重要作用,并且与中医理论中的"肾精"具有一定的相似性。近年来国内外学者对于BMSCs在骨形成中的作用及相关中医基础理论进行了大量研究,本文通过对相关研究的梳理,对BMSCs在骨形成过程中的作用及中医药研究进展作综述。BMSCs的体外扩增和成骨特性已受关注,可作为骨组织工程的种子细胞具有一定的理论及实践意义,并且中医药对BMSCs成骨诱导的研究已积累一定的经验,可以看出中药诱导BMSCs成骨分化主要集中于补肾药,包括单味补肾药、单味补肾药的有效成分及以补肾药为主要构成的复方,充分阐释了"肾主骨、生髓"理论的科学内涵.; 宋囡何文智王智民任艳玲; 关键词：骨髓间充质干细胞骨形成肾精骨向分化中药

左归丸含药血清通过p38 MAPK信号通路诱导MC3T3-E1成骨细胞的分化被引量：8: 2013年; 目的探讨p38 MAPK信号通路对左归丸含药血清干预MC3T3-E1成骨细胞分化的影响。方法制备大鼠含药血清,选用p38特异阻滞剂SB203580,实验分为空白对照组、SB203580组、左归丸组、左归丸加SB203580组、倍美力组、倍美力加SB203580组。孵育48 h后,采用PNPP法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,采用Western印迹法分析ALP蛋白表达水平;孵育7 d,采用改良钙钴染色法检测ALP活性;孵育14 d,采用茜素红染色法测定矿化沉积情况。结果与空白对照组比较,左归丸组显著促进MC3T3-E1成骨细胞分化,明显上调ALP蛋白表达水平(P<0.01);与左归丸组比较,左归丸加SB203580组显著抑制左归丸含药血清对MC3T3-E1成骨细胞的分化的促进作用,明显下调ALP蛋白表达水平(P<0.01)。结论左归丸含药血清可能部分通过p38 MAPK信号通路干预MC3T3-E1成骨细胞分化。; 刘立萍任艳玲李然王智民赵金茹蒿长英宋囡; 关键词：左归丸成骨细胞 P38MAPK信号通路碱性磷酸酶

左、右归丸及其拆方对骨髓间充质干细胞成骨分化后细胞周期和凋亡的影响: 目的:研究左、右归丸及其拆方含药血清对骨髓问充质干细胞(BMSCs)成骨分化的过程中细胞周期和凋亡的影响。方法:分别以左归丸、右归丸、两方共同药组、滋肾阴药组、补肾阳药组、阳性对照药戊酸雌二醇片制备的大鼠含药血清加诱导剂...; 宋囡何文智王智民任艳玲; 关键词：左归丸右归丸骨髓间充质干细胞细胞周期; 文献传递

左、右归丸及其拆方含药血清对骨髓间充质干细胞增殖和成骨诱导的影响被引量：4: 2013年; 目的观察左、右归丸及其拆方含药血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和向成骨细胞(osteoblast,OB)诱导的影响。方法运用全骨髓贴壁法分离和培养大鼠BMSCs;分别以左归丸、右归丸、两方共同药、滋肾阴药、补肾阳药、阳性对照药补佳乐制备的大鼠含药血清加诱导剂(地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠)、诱导剂和空白含药血清组共8组对BMSCs进行干预,采用MTT法检测BMSCs增殖和左、右归丸及其拆方含药血清对BMSCs增殖的影响;流式细胞仪对BMSCs进行鉴定;用PNPP法检测左、右归丸及其拆方含药血清对BMSCs向OB诱导的影响。结果 P4代以后细胞细胞表型CD90呈阳性表达,CD11b/c、CD45呈阴性表达。左、右归丸及其拆方含药血清对BMSCs增殖和成骨诱导都具有促进作用,左归丸、右归丸、滋肾阴药组与其他组比较效果显著(P<0.05)。结论左、右归丸及其拆方含药血清可以协同诱导剂对BMSCs增殖和成骨诱导具有显著的促进作用。; 何文智宋囡王智民任艳玲; 关键词：左归丸右归丸骨髓间充质干细胞成骨诱导

从左归丸与右归丸探究张景岳之阴阳观被引量：35: 2014年; 通过探讨张景岳名方左归丸与右归丸的配伍特点及其理论基础,阐述了张景岳阴阳一体和阴阳互生、互根的学术思想,以及其"阴中求阳"、"阳中求阴"的制方思想,浅析了张景岳阴阳理论的学术渊源,希望当今医学工作者能进一步了解中医学的阴阳基础理论,为临床辨证论治、组方加减提供依据。; 何丽娟初杰宋囡任艳玲; 关键词：左归丸右归丸阴阳互根

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