广东省自然科学基金(04300653)
- 作品数:7 被引量:80H指数:6
- 相关作者:曾耀英肇静娴季煜华俞瑜刘良更多>>
- 相关机构:暨南大学香港浸会大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 杨梅素对淋巴细胞活化及增殖的影响被引量:19
- 2006年
- 目的研究杨梅素(myricetin)对小鼠T细胞活化及增殖的影响,探讨其作为免疫调节药物开发的可能性并提供相关实验依据。方法无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的杨梅素预先孵育1h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆抗体双染技术,流式细胞仪检测杨梅素对小鼠CD3+T细胞CD69表达的影响;采用3H-TdR参入法检测杨梅素对淋巴细胞增殖的影响,采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测杨梅素对IL-2mRNA表达的影响。采用ELISPOT检测杨梅素对IFN-γ分泌的影响。结果杨梅素能抑制T细胞早期活化标志CD69的表达,并能抑制淋巴细胞增殖反应,同时对淋巴细胞活化后IL-2 mRNA的表达及IFN-γ的分泌也有抑制作用。结论杨梅素对淋巴细胞的活化增殖反应具有抑制作用。
- 俞瑜曾耀英刘良季煜华邢飞跃肇静娴
- 关键词:杨梅素淋巴细胞活化增殖细胞因子
- 地塞米松介导胸腺细胞凋亡过程中线粒体和细胞结构蛋白的变化被引量:9
- 2005年
- 目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△Ψm)和线粒体质量,利用CFDA-SE染色流式细胞术检测细胞结构蛋白变化。结果:在1×10-6mol/LDEX诱导下,小鼠胸腺细胞在6h凋亡比率为(51.25±5.51)%,对照组为(12.03±2.00)%,差异显著(P<0.01);DEX组坏死比率为(30.25±3.67)%,对照组为(10.11±1.11)%,差异显著(P<0.01)。DEX组在6h时点的线粒体质量显著低于对照组(P<0.01),FL1平均荧光强度分别为(561.62±54.27)和(900.25±38.80)。DEX同时引起线粒体膜电势的显著下降(P<0.01),对照组FL2平均荧光强度为(267.51±26.48),DEX组为(133.17±12.29)。成熟T细胞培养48h,CFDA-SE法仅检测到亲代单一细胞峰;而在ConA刺激条件下出现3个子代峰。对照组小鼠胸腺细胞在CFDA-SE染色培养6h条件下,存在(5.25±1.15)%的低荧光强度细胞群,而在DEX刺激下,该群细胞占(47.39±9.76)%,并且在直方图结果上形成明显的细胞峰。结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,线粒体质量和细胞结构蛋白均有所下降;CFDA-SE染色流式细胞术可以作为基于细胞结构蛋白变化的凋亡定量检测方法。
- 王通曾耀英肇静娴林羿梁佩燕
- 关键词:地塞米松胸腺细胞细胞凋亡线粒体
- 中药喘可治对小鼠胸腺细胞抗凋亡作用研究被引量:14
- 2005年
- 目的:研究中药喘可治(CKZ)对小鼠胸腺细胞的抗凋亡作用。方法:以地塞米松(DEX )诱导小鼠胸腺细胞凋亡建模,以CKZ保护小鼠胸腺细胞;6h时点以AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术检测早期凋亡和坏死细胞、以PI染色流式细胞术检测晚期凋亡。结果:CKZ +DEX组早期凋亡比率(3 5 2 9±2 73 ) %显著低于DEX组(4 5 97±1 3 9) %(P <0 0 1) ;该两组坏死细胞比率差异不显著。DEX +CKZ组晚期凋亡百分率为(17 2 6±4 5 8) % ,显著低于CKZ组(3 3 88±5 61) % (P <0 0 1)。上述各组数据与对照组差异显著(P <0 0 1)。
- 王通曾耀英俞渝
- 关键词:喘可治地塞米松抗凋亡流式细胞术动物实验
- 胸腺保护与抗衰老被引量:6
- 2005年
- 目的:本文通过分析胸腺的中枢耐受和退化,探讨胸腺保护与机体抗衰老的关系。资料来源:应用计算机检索美国NCBIPubmed数据库1980-01/2004-02关于胸腺保护和机体抗衰老的文章,主要检索主题词包括“thymus,toler-ance,involution,aging”,语言设为英语。资料选择:选取报道胸腺细胞表达自身抗原、胸腺细胞凋亡和退化影响因素的原创实验性文章以及2001年以来权威期刊关于胸腺中枢耐受和衰老的相关综述文章。纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的实验文章。②观点明确,分析全面的综述文章。③文献主体内容与本课题联系紧密的文章。排除标准:具有明显实验设计和结果错误的文章及观点模糊的综述。质量评价主要考察资料的真实性、实施过程是否严密。资料提炼:共检索到关于胸腺保护和机体抗衰老的文献40篇,25篇文献符合纳入标准。排除的15篇文献均为重复性文章。资料综合:25篇文献分别阐明了中枢耐受、机体衰老和胸腺退化的影响因素问题。胸腺执行着重要的T细胞中枢耐受。该耐受过程伴随着动态的正负选择,正选择保持抗原特异性T细胞输出。保护胸腺是目前惟一能够维持输出抗原特异性T细胞的手段。保护胸腺的前提是从根本上了解胸腺退化的具体影响因素。结论:胸腺表达了几乎所有外周自身抗原,不但可以维持免疫系统特异性T细胞的输出,同时对避免自身免疫疾病及免疫缺陷病有着重要的意义。物理化学、激素、疾病、药物和年龄等因素引起的胸腺退化过程往往伴随者正负选择平衡的打破。胸腺衰老即指示人体衰老,保护胸腺实际上就是一种抗衰老策略。
- 王通曾耀英
- 关键词:胸腺免疫耐受衰老
- 白藜芦醇对活化小鼠T淋巴细胞IL-2和CD25表达的影响被引量:2
- 2005年
- 目的:研究白藜芦醇(RSV)对活化的小鼠T淋巴细胞分泌IL 2和CD2 5的影响,并探讨其免疫抑制机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,与不同浓度的白藜芦醇共同孵育1小时后,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化,继续培养6小时后收获细胞,进行胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测IL- 2的分泌情况,RT- PCR检测IL -2mRNA的表达;2 4小时后检测CD2 5表达。结果:RSV对IL 2的分泌具有抑制作用,并呈剂量依赖性,同时RSV也能抑制T细胞表面活化分子CD2 5。结论:RSV对活化T细胞分泌的细胞因子IL- 2及IL- 2α链CD2 5的表达可能是RSV对T细胞具有免疫抑制作用的机制之一,并可能与T细胞活化通路的PKC NF -κB信号传导途径相关。
- 俞瑜曾耀英刘良季煜华肇静娴
- 关键词:白藜芦醇白细胞介素-2CD25
- 雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用被引量:24
- 2005年
- 目的研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL2及IFNγmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据。方法无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RTPCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL2、IFNγmRNA的表达的影响。结果TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL2及IFNγmRNA的表达。结论TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一。
- 俞瑜曾耀英刘良季煜华肇静娴
- 关键词:雷公藤甲素小鼠体外活化分子药理学淋巴结细胞TRD
- 白藜芦醇对小鼠T细胞活化、增殖及细胞因子分泌的影响被引量:8
- 2005年
- 目的:研究白藜芦醇(RSV)对小鼠T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响,为阐明其免疫抑制作用提供实验依据。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的RSV预先孵育1h,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化增殖。采用3H-TdR掺入法检测RSV对T细胞增殖的影响;用RT-PCR检测IL-2及IFN-γmRNA的表达;用胞内细胞因子染色法分析IL-2和IFN-γ的分泌。结果:RSV能抑制T细胞增殖,也能在mRNA水平及蛋白水平上抑制IL-2及IFN-γ的分泌。结论:RSV对T细胞的免疫抑制作用,可能与其抑制T细胞的活化、增殖和细胞因子的分泌有关。
- 俞瑜曾耀英季煜华肇静娴刘良
- 关键词:白藜芦醇活化增殖细胞因子