贵州省动物疫病研究室
- 作品数：280 被引量：775H指数：12
- 相关作者：王伟金志强赵福友隆华更多>>
- 相关机构：贵州大学贵州省动物疫病预防控制中心贵州省农业科学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业科技攻关项目国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒及混合感染的检测
- 2010年
- 自2009年7月以来,贵州省几个规模养殖场猪群出现疑似猪繁殖与呼吸综合征的症状,为查明致病原因,以便采取针对性的治疗及防控措施,采用病毒学和细菌学试验对送检病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒检测和细菌分离鉴定。结果猪繁殖与呼吸综合征病原基因检出率为100%,同时继发感染猪瘟病毒、葡萄球菌或链球菌的比例高达85.7%。
- 张双翔周碧君陈军义王开功程振涛岳筠文明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征继发感染
- 不同免疫程序接种PRRS疫苗对仔猪血清抗体水平的影响被引量：2
- 2018年
- 为了解仔猪以不同免疫程序接种猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗后产生的血清抗体水平,在规模化猪场筛选猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和抗体均为阴性的仔猪40头,随机分为4组。其中试验A组、试验B组和试验C组均为14d首次接种经典PRRS弱毒疫苗,试验A组在35d二次免疫高致病性PRRSV灭活疫苗,试验B组在35d二次接种经典PRRS弱毒疫苗,试验C组在35d注射生理盐水,对照组D组在14d、35d均注射生理盐水。在仔猪免疫接种后0、7、14、21、28、35、42、49、56和63d分别采血,用N-ELISA和G-ELISA两种试剂盒检测PRRSV特异性抗体。结果显示,N-ELISA抗体水平A组与B组差异不显著(P>0.5),而G-ELISA抗体水平在免疫后35d、56d、63dA组显著高于B组(P<0.5)。表明14d首次接种经典PRRSV弱毒疫苗和35d二次接种高致病性PRRSV灭活疫苗的免疫效果优于仅单独一次或两次接种PRRSV弱毒疫苗效果。
- 丁尊俄赵双成张双翔周碧君肖焕星欧伟业王开功秦文学刘昱胡兴义张海李如举陈勇
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗抗体
- 柔嫩艾美耳球虫和肠致病性大肠杆菌双重PCR检测方法的建立及流行病学调查应用
- 2024年
- 【目的】建立可同时检测柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella)和肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的双重PCR检测方法,为临床E.tenella继发EPEC病的检测提供技术支持。【方法】基于E.tenella和EPEC(escV)分别设计2条特异性引物,并通过退火温度、模板浓度和引物浓度等优化多重PCR的反应条件,建立2种病原体的双重PCR检测方法,并运用该方法检测贵州地区490份肉鸡、蛋鸡粪便样品,进行流行病学分析。【结果】该方法所需模板DNA的最低浓度组合为3.5ng/μL,最佳退火温度为62℃,最佳引物浓度组合为0.1 nmol/μL。流行病学调查显示,贵州毕节样本中E.tenella和EPEC的阳性率均为36.36%,混合感染阳性率9.09%;贵州黎平仅有EPEC感染,阳性率为23%;贵州习水样本中未检测出阳性,锦屏样本中E.tenella阳性率为11.11%,EPEC阳性率为22.22%,无混合感染。总样本中E.tenella、EPEC及2种混合感染的阳性率分别为10.20%、18.37%和2.04%。【结论】建立的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella)和肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)双重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高和重复性好的优点。
- 罗小勇杜鹏向万江杨佳佳陈影王碧
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫肠致病性大肠杆菌双重PCR流行病学
- 猪粪生物除臭剂的制备及其除臭效果的测定被引量：13
- 2011年
- 为了给规模化养猪场的粪便处理提供技术支撑,试验选用具有一定除臭作用的微生物进行组合,制备了4个生物除臭剂组方,并以发酵猪粪中NH3和H2S释放量为指标进行了除臭效果测定。结果表明:4种生物除臭剂组方均能降低猪粪发酵过程中NH3和H2S的释放量,其中以细菌、放线菌和霉菌组合而成的生物除臭剂组方效果最为明显,且有效作用时间较长;随着接种剂量的增加,生物除臭剂作用效果也呈上升趋势,但接种剂量达10.0%以后其作用差异不明显。
- 高颖褚维伟张霞席锋李翡周碧君嵇辛勤文明
- 关键词：猪粪臭气
- 应用荧光定量PCR筛选绵羊肺炎支原体最适生长培养基被引量：3
- 2013年
- 为筛选绵羊肺炎支原体(Mo)最适生长培养基,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因FQ-PCR方法,通过检测不同培养时间各Mo培养液中Mo Y98株核酸含量,比较Mo于不同培养基中培养特性,以筛选Mo最适生长培养基。结果,以Broth-ame与TSB1培养Mo 7,10和14 d时Mo核酸检测值较高,较Frey-ame、PPLO-ame更适合Mo生长。本研究为后续Mo生物学特性分析奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民覃岚崔亚兰王慧
- 关键词：荧光定量PCR绵羊肺炎支原体
- 鸭肠炎病毒感染鸭肝酵母双杂交cDNA文库的构建被引量：2
- 2011年
- 为构建应用于酵母双杂交系统的鸭肠炎病毒(DEV)感染鸭肝cDNA文库,利用Trizol法提取接种DEV GZ株病毒液5 d的鸭肝总RNA,利用cDNA合成试剂盒反转录合成双链cDNA,与pGADT7酵母表达载体连接,转化酵母受体菌Y187,以未经稀释、1∶10和1∶100比例稀释的菌液无菌接种于SD/-Leu缺陷型固体培养基,置于30℃培养3 d,随机挑取生长良好的酵母菌落进行菌落PCR,检测插入片段的大小。结果显示,获得的原始文库克隆总数为1.0×106CFU,随机选取23个克隆进行PCR检测,插入片段长度集中在0.5～1 kb之间。结果表明,构建的cDNA文库有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。
- 张荷毛君婷杨颖王开功周碧君文明
- 关键词：酵母双杂交鸭肠炎病毒CDNA文库
- 鲜猪肉病原菌污染研究进展被引量：3
- 2012年
- 鲜猪肉病原菌污染是引起食源性中毒因素之一,近年来有愈演愈烈趋势。论文从鲜猪肉病原菌污染种类(革兰阳性菌和革兰阴性菌)、污染来源(内源性和外源性)、检测技术(病原学、免疫学、分子生物学和光谱学)和控制措施(源头环节控制、加工环节控制和流通销售环节控制)等四个方面进行了综述,以期为鲜猪肉的卫生安全保障提供参考。
- 阮涌嵇辛勤文明陈彦希
- 关键词：鲜猪肉病原菌防控措施
- 犬瘟热病毒贵州株(CDV-GZ1)F基因的克隆及序列分析被引量：4
- 2012年
- 根据GenBank中发表的犬瘟热病毒Onderstepoort株融合蛋白基因(F)序列设计两对特异性引物,采用RT-PCR扩增犬瘟热病毒贵州分离株(CDV-GZ1)的F基因,并进行克隆与序列分析。结果显示,CDV-GZ1株F基因的ORF全长1989bp,氨基酸序列中具有5个潜在N-糖基化位点,氨基酸同源性与美国00-2601株和国内HL株较高,分别为91.6%和91.1%,表明该分离株与00-2601株和HL株具有较近的亲缘关系。
- 曾智勇周莉刘志杰
- 关键词：犬瘟热病毒F蛋白克隆
- 大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 为探索减毒胞内侵袭菌介导的粘膜免疫对宿主动物胃肠道微生态的影响,以大肠杆菌与葡萄球菌16S rRNA基因拷贝数为研究对象,采用实时定量技术(Real-time PCR)对2种细菌进行定量检测,建立大肠杆菌与葡萄球菌数量快速检测方法。结果表明:扩增出的2种细菌核苷酸序列与GenBank上已知目的菌种同源性为100%,构建的2条标准曲线相关系数均接近1,误差较小,熔解曲线显示均成单一峰值。成功构建了大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR标准曲线,可为进一步研究减毒沙门氏菌介导的粘膜免疫奠定基础。
- 尹传宝陈俊朱琦毛君婷程振涛周碧君文明
- 关键词：粘膜免疫大肠杆菌葡萄球菌REAL-TIMEPCR
- 猪粪堆积发酵后细菌的分离鉴定
- 2011年
- 为寻找猪粪的除臭微生物,采用稀释平板法对发酵腐熟的猪粪进行细菌分离,并对优势细菌的形态特征、培养特性和生理生化特点进行鉴定。结果表明,分离得到的5株优势细菌分别为蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母菌,为猪粪除臭剂的制备奠定了物质基础。
- 高颖李基棕杜海燕周碧君文明
- 关键词：猪粪堆积发酵细菌
