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核糖核酸酶4：一种高保守性多功能的核酸酶: 2014年; 核糖核酸酶4(ribonuclease-4,RNase-4)是核糖核酸酶A超家族成员之一.物种间RNase-4蛋白序列的相似度高达90%,是该超家族中最为保守的成员.RNase-4的核糖核酸酶活性具有独特的尿嘧啶核苷酸底物偏好性,这与其结构紧密相关.RNase-4可以通过降解外源病原体释放的RNA多聚体而发挥宿主防御功能.最新的研究表明,RNase-4可以促进血管新生、诱导神经发育,并在应激条件下保护神经细胞存活,进而延缓神经退行性疾病的发生.本文综述了RNase-4蛋白的分子结构特征、酶活性与结构的相关性及其生物学功能的研究进展,并展望了RNase-4未来的研究方向和临床应用前景.; 盛静浩许正平; 关键词：酶活性血管新生神经退行性疾病

血管生成素专刊序言: 2015年; 血管生成素（angiogenin）是1985年发现的．为展示30年来血管生成素相关领域研究进展，加强对血管生成素功能、作用机制及其与疾病关系的认识和理解，《中国生物化学与分子生物学报》在第7届编辑委员会成立之际委托我组织专刊．本期专刊包括9篇综述、4篇研究报告及1篇技术与方法方面的论文．; 许正平; 关键词：血管生成素序言分子生物生物化学

血管生成素研究的希望与挑战——浙江大学血管生成素研究被引量：2: 2015年; 虽然血管生成素发现于1985年,但由于其性质上的特殊及研究条件的限制,人类对其功能的了解进展缓慢.浙江大学血管生成素研究组建立于2001年,主要从蛋白质相互作用、基因转录调控、RNA代谢等层面研究血管生成素的功能机制,发现该蛋白能够与卵泡抑素、磷脂混杂酶1等蛋白质相互作用而细调r RNA的转录水平;在RNA转录中发挥表观遗传修饰调控因子作用;通过与细胞骨架相关蛋白的相互作用而促进细胞迁移;mi R-409-3p通过直接靶向下调该蛋白的表达而发挥抑癌基因的作用.同时,在模式生物斑马鱼中揭示了血管生成素同源基因对胚胎早期发育的影响.本文全面回顾了我们14年来在血管生成素方面的研究进展,探讨了当前研究中存在的问题,并展望了未来的发展方向.; 盛静浩许正平; 关键词：血管生成素蛋白质相互作用基因调控 MICRORNA 肿瘤

血管生成素:RNA代谢过程中重要的核糖核酸酶: 2014年; 血管生成素是核糖核酸酶A超家族成员之一,具有较弱的核糖核酸酶活性.最新研究发现,血管生成素参与细胞内多种RNA的代谢过程.在生长条件下,血管生成素可以发生核转位聚集于细胞核中,促进rRNA转录,并可参与其剪切加工,同时它也调控一系列mRNA基因的转录,最终促进细胞的生长和增殖;在应激条件下,血管生成素能降解tRNA形成tiRNA,抑制细胞内整体蛋白质的翻译水平,并促进应激小体的形成,激活细胞内应激保护机制,从而促进细胞存活.此外,血管生成素还可参与非编码小RNA等RNA代谢过程.本文概述了血管生成素在RNA代谢中的作用与分子机制等方面的进展,并探讨了其在疾病发生和发展中的作用,以期开拓血管生成素的研究新思路.; 高燕盛静浩许正平; 关键词：血管生成素核糖核酸酶

血管生成素相互作用蛋白质的筛选与鉴定被引量：2: 2015年; 血管生成素(angiogenin,ANG)在肿瘤、神经退行性疾病和先天免疫过程中均发挥作用,但对其具体生理病理功能和作用机制的了解并不深入全面.蛋白质-蛋白质相互作用调控着细胞内的各个生物学过程,可以为目标蛋白质功能和机制的探索提供信息.本文利用酵母双杂交技术,分别从人心肌和肝c DNA文库中筛选了ANG的可能相互作用蛋白质.对筛选获得的20个候选蛋白质进行生物信息学分析,显示10个蛋白质含有EGF结构域;有5个蛋白质在KEGG数据库已有记录,主要参与细胞黏附、通讯和迁移等过程.在以往的研究中,我们已经验证α-辅肌动蛋白2(α-actinin 2)、卵泡抑素(follistatin)、磷脂混杂酶1(phospholipid scramblase 1)和腓骨蛋白1(fibulin1)与ANG作用的真实性.本文的蛋白质沉降实验显示,ANG与腓骨蛋白2、3、4之间也存在相互作用.; 高向伟许正平; 关键词：血管生成素酵母双杂交蛋白质-蛋白质相互作用

血管生成素基因组结合序列的筛选与鉴定: 2015年; 血管生成素(angiogenin,ANG)调控细胞增殖、迁移、分化等生物学过程,但其作用的分子机制尚未完全明了.目前认为,ANG可结合到r DNA区域促进r RNA转录,也可能与m RNA有结合.为全面鉴定细胞内可结合ANG的基因组序列,我们利用染色质免疫共沉淀结合DNA芯片技术(Ch IP-chip)对He La细胞的基因组DNA进行了筛选,共获得了1 248个结合片段.我们进一步分析了这些结合片段附近分布的基因,发现有699个可能受ANG结合调控的基因.基因注释和聚类分析显示,这些可能受ANG调控的基因主要与肿瘤发生发展有关(特别是结直肠癌和前列腺癌),并且与TGF-β和Wnt信号通路相关.最后,我们验证了ANG不仅与WNT6、CCNE1、APC2、FZD8和EGFR基因的启动子区域有直接结合,而且调控其表达.以上研究结果为深入研究ANG的功能机制提供了线索.; 盛静浩许正平; 关键词：血管生成素 DNA芯片转录调控

重组人血管生成素制备和生物活性鉴定: 2015年; 血管生成素(angiogenin,ANG)是一种很强的促血管生成因子,与肿瘤的发生发展有着密切的关系,拮抗ANG被认为是抗肿瘤血管靶向治疗的一个有效途径.同时,ANG具有促进伤口愈合、保护神经元以及抗细菌感染等活性.但是,开展相关研究所需的最基本的天然ANG蛋白来源非常有限,大规模表达和纯化有生物活性的重组血管生成素蛋白(r ANG)具有广泛的应用前景.我们可以在大肠杆菌中表达r ANG,但表达产物在胞内聚集形成不溶性的包含体,需经变性、复性、阳离子交换层析和反向C18的HPLC方法纯化后,才能获得高纯度的r ANG.经SDS-PAGE鉴定,纯化蛋白质为单一条带,质谱鉴定蛋白分子量与理论分子量一致.经体外活性检测,证实纯化的蛋白质具有核糖核酸酶活性、促内皮细胞管腔形成和细胞核转位等生物学活性.本文详细描述了r ANG的表达、纯化、活性鉴定等过程和所使用的方法与技术.; 孙德森盛静浩; 关键词：血管生成素原核表达管腔形成

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浙江大学医学院分子医学研究中心