西南医科大学药学院药理学教研室
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 相关作者:袁青更多>>
- 发文基金:四川省自然科学基金四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 法舒地尔干预原代神经干细胞的增殖与分化被引量:1
- 2019年
- 背景:受损大脑和脊髓的自我修复能力有限,寻找促进神经干细胞增殖与分化的潜在治疗剂,对神经系统疾病的干细胞治疗具有重要意义。目的:探讨法舒地尔对原代神经干细胞增殖及分化的影响及其可能机制。方法:体外分离、培养15 d龄胎鼠脑组织获得神经干细胞,免疫荧光检测细胞中Nestin的表达;以不同浓度(50,100,200μmol/L)法舒地尔干预神经干细胞24,48,72 h,MTT检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率;进一步应用凋亡抑制剂、铁死亡抑制剂、自噬抑制剂、坏死抑制剂、凋亡诱导剂、铁死亡诱导剂干预神经干细胞,MTT检测细胞增殖率,生化法检测细胞丙二醛水平;最后,应用200μmol/L法舒地尔干预神经干细胞10 d,Western blot和免疫荧光检测神经干细胞中Nestin、DCX、MAP-2、GFAP蛋白的表达。结果与结论:(1)分离培养的原代神经干细胞表达Nestin;(2)随着法舒地尔浓度升高及作用时间延长,神经干细胞的增殖率逐渐增高(P <0.05);(3)凋亡抑制剂、铁死亡抑制剂可提高神经干细胞的增殖率(P <0.05);(4)法舒地尔可提高凋亡诱导剂和铁死亡诱导剂干预的神经干细胞的增殖率(P <0.05);(5)法舒地尔和铁死亡抑制剂均能降低神经干细胞中丙二醛水平,铁死亡诱导剂则使神经干细胞中丙二醛水平升高(P <0.05);(6)经法舒地尔处理后,神经干细胞中DCX和GFAP蛋白的表达升高,Nestin的表达降低(P <0.05);(7)结果表明,法舒地尔可通过抑制凋亡与铁死亡提高神经干细胞的存活,并能促进神经干细胞增殖及向神经元样细胞与神经胶质细胞分化。
- 孙婉莹唐瑛陈美娟
- 关键词:神经干细胞法舒地尔神经干细胞增殖神经元样细胞神经胶质细胞细胞增殖细胞分化
- 外胚层发育不良受体EDA2R的研究进展
- 2021年
- 外胚层发育不良受体EDA2R(ectodysplasin A2 receptor)是肿瘤坏死因子受体超级家族(tumor necrosis factor receptor superfamily,TNFRSF)中的一个较新的成员,在发育中的胚胎里有很高的表达,在成年人和动物的多个器官组织中也有表达。与其它TNFRSF成员不同,尽管EDA2R蛋白在胞内没有死亡结构域(death domain,DD),但它仍可激活NF-κB和JNK通路,并介导细胞的凋亡。本文广泛回顾了近年来与EDA2R有关的文献,就该蛋白分子的相关研究进展进行综述,以期为与该蛋白相关的分子功能或其介导的相关疾病的研究提供新的思路。
- 蓝希钳肖海婷罗怀容陈建宁
- 关键词:凋亡
- 抗TSLP全人源单链抗体的体外亲和力成熟被引量:1
- 2017年
- 目的:对抗TSLP-scFv全人源单链抗体进行单点突变,以提高其亲和力。方法:本研究前期筛选了特异性好的抗TSLP-scFv,本研究利用Discovery Studio系统模拟TSLP和抗TSLP-scFv三维结构,进行分子对接,对结合表位氨基酸进行随机突变,选取可显著提高其亲和力的氨基酸突变点,根据突变位点设计引物,采用重叠延伸PCR对氨基酸位点进行突变。将突变后的scFv基因与表达载体pLZ16连接,转化E.coli DH5αF',表达后筛选亲和力提高的抗TSLP-scFv。结果:DS系统筛选出可以提高scFv亲和力的5个单点突变氨基酸位点,PCR扩增出突变后的抗TSLP-scFv DNA片段大小为1000bp左右。将测序正确的菌株进行表达,通过ELISA筛选出与抗原结合力提升的抗TSLP-scFv;通过生物大分子相互作用技术,测定单抗的亲和力,突变后的scFv M4亲和力较突变前提高了10倍左右。结论:成功提升了抗TSLP-scFv全人源单链抗体的亲和力。
- 先德群年四季叶迎春徐文峰袁青
- 关键词:分子对接