华中科技大学同济医学院医学生物学系
- 作品数：28 被引量：125H指数：6
- 相关作者：余从年陈燕王慧滕云李奇志更多>>
- 相关机构：河南科技大学医学院医学遗传学教研室河南科技大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 针对Toll样受体4基因的小发夹结构RNA对RAW264·7细胞炎症因子分泌的抑制作用被引量：7
- 2006年
- 目的构建针对Toll样受体(TLR)4mRNA的小发夹结构RNA(shRNA)真核表达载体pEGFP-siRNA/TLR4,检测该shRNA诱导的RNA干扰(RNAi)对脂多糖刺激RAW264·7细胞分泌炎症因子的抑制作用,以探讨针对TLR4基因的RNAi对RAW264·7细胞炎症反应的抑制作用。方法构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及shRNA克隆位点的质粒pEGFP-H1/siRNA,运用网络工具siRNAWizard(http://www·sirnawizard·com/)设计针对TLR4mRNA的寡核苷酸片段。将其克隆入pEGFP-H1/siRNA,构建表达EGFP及TLR4-shRNA的真核表达质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA。运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的小鼠巨噬细胞系RAW264·7,观察细胞系中荧光蛋白的表达强度;再运用脂多糖刺激转染的RAW264·7细胞,运用ELISA方法检测该细胞系分泌炎症因子水平的变化。结果质粒pEGFP-H1/siRNA及pEGFP-H1/TLR4-siRNA分别用BbsⅠ和MluⅠ酶切电泳后,前者出现4·9kb和340bp的的条带,后者出现5·0kb和220bp的条带,与实验设计的质粒长度一致,且测序证实克隆序列正确。将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至RAW264·7细胞后,EGFP的表达率为50%±8%。用脂多糖刺激后,TLR4-SiRNA转染组细胞培养液TNF-α水平(2h:825pg/ml±136pg/ml;8h:2190pg/ml±359pg/ml)明显低于对照siRNA转染组(2h:1179pg/ml±240pg/ml;8h:4720pg/ml±227pg/ml,均P<0·01)。结论针对TLR4mRNA的shRNA可能通过RNAi机制对脂多糖诱导的RAW264·7细胞炎症因子的分泌有明显的抑制作用。
- 张进祥王慧吴河水蒋春舫郑启昌
- 关键词：RNA基因沉默脂多糖类巨噬细胞
- 类风湿关节炎滑膜组织血管内皮生长因子转录和表达的研究
- 本研究采用半定量RT-PCR法和Northern blot检测滑膜组织血管内及生长因子(VEGF)mRNA表达水平;同时应用双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定了19例类风湿关节炎(RA)患者血清、滑液中VEGF...
- 刘巧红沈凌汛吴清敏滕云王慧
- 文献传递
- 应用细针吸取细胞学诊断睾丸及附睾肿瘤的临床探讨
- 2007年
- 目的:探讨针吸细胞学对睾丸及附睾肿瘤的诊断价值,并对其细胞学形态特征进行总结。方法:回顾性分析29例睾丸及附睾肿瘤的细胞学特征,并行病理组织学对照,对光镜分型困难者加做免疫组化。结果:细胞学诊断与组织学完全符合者27例(93.10%),细胞学可疑恶性1例(3.45%),经组织学证实为恶性,2者合计,符合率为96.55%,分型不符合1例(1/29)占3.45%,无假阳性报告。结论:针吸细胞学对睾丸及附睾肿瘤的诊断具有较高的诊断率及灵敏度,是术前诊断睾丸、附睾肿瘤的重要手段之一,若结合免疫组化,分型将更为准确,有利于临床确定治疗方案。
- 康劲松雷清华刘利敏李钫
- 关键词：睾丸肿瘤针吸细胞学
- 医学生物学科课程体系融合改革的探索被引量：6
- 2005年
- 屈伸冯作化孙军邓耀祖余从年王淳本
- 关键词：医学生物学科融合分子细胞生物学医学细胞生物学高等医学教育教学水平
- 武汉地区CAG扩增突变致青少年发病的亨廷顿舞蹈病的家系分析(英文)被引量：2
- 2007年
- 目的对青少年发病的亨廷顿舞蹈病(Huntington disease)家系进行致病IT15基因早期诊断分析,为家系成员提供遗传咨询, 并为后续的HD发病机制及实验治疗研究提供依据。方法按照知情同意原则抽取家系成员外周血,提取基因组DNA,采用改良的降落PCR方法扩增IT15基因致病区域,DNA测序检测异常等位基因(CAG) n 三核苷酸重复次数。结果在该家系三代25名成员中,共发现8名致病IT15基因携带者,其中,III10、III12、III14、IV3和V2 CAG三核苷酸的拷贝数均为48,IV11和IV12均为(CAG) 67, IV14为(CAG) 63,而对照组35名正常人的CAG三核苷酸的拷贝数为8-25,两者之间没有重叠。结论家系中第四代致病基因携带者IV14与第三代患者III10比较,CAG三核苷酸重复次数增加15次,即本家系IT15基因在传递过程中发生了扩增突变。同时,扩增突变导致该家系出现青少年发病及遗传早现现象。
- 刘媛沈滟李和王慧杨真荣陈燕唐艳平
- 关键词：亨廷顿舞蹈病
- 类风湿性关节炎患者血清和滑液中血管内皮生长因子与病损程度的相关性被引量：6
- 2004年
- 目的:研究类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)患者血清、滑液中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白水平,探讨其在RA致病中的作用。方法:应用双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定RA患者(n=36)血清、滑液中VEGF蛋白水平。以骨关节炎(n=9)及因外伤截肢的正常人(n=13)作对照。结果:RA患者血清、滑液中VEGF水平(ng/L)分别为186±77,262±84;而对照组分别为48±17,63±27。RA患者血清、滑液中VEGF蛋白水平均显著高于对照组(t=1.63,P=0.008;t=1.72,P=0.006),且与关节疼痛数、关节肿胀数、晨僵时间、红细胞沉降率、C反应蛋白、类风湿因子滴度均呈正相关(r=0.73～0.83,P均<0.05)。结论:RA患者VEGF蛋白的过度表达是导致RA发病的重要因素。
- 刘巧红沈凌汛吴清敏滕云王慧
- 关键词：类风湿性关节炎滑液血管内皮生长因子病损程度
- Toll样受体4突变对小鼠急性肺损伤的影响及机制被引量：2
- 2006年
- 目的观察Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)基因突变型小鼠与野生型小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型中肺组织损伤差异,分析不同TLR4遗传性状对ALI发生的影响及机制。方法以TLR4基因突变小鼠(C3H/HeJ品系,TLR4-/-)及野生型小鼠(CBA品系,TLR4+/+)为研究对象,采用失血性休克复苏加内毒素攻击复制小鼠急性肺损伤动物模型,检测肺组织湿/干重比(W/D),肺组织通透指数(LPI)、MPO水平、肺组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1 beta(IL-1β)水平的差异。结果TLR4基因突变型(TLR4-/-)小鼠肺组织损伤(以W/D及LPI为衡量标准)较野生型(TLR4+/+)小鼠严重,而且与野生型小鼠比较,TLR4-/-小鼠肺组织MPO、TNF-αI、L-1β水平下降。同时TLR4-/-小鼠肺组织损伤较假手术组严重。结论TLR4胞内段突变可以减轻ALI,而且TLR4能通过介导肺内中性粒细胞聚集而介导ALI的发生。
- 张进祥王慧徐建波蒋春舫吴河水郑启昌
- 关键词：急性肺损伤休克低血容量性内毒素膜受体TOLL样受体4
- 人肝细胞癌组织中SOX基因家族的异常表达被引量：2
- 2004年
- 滕云刘巧红王慧杨真荣陈燕
- 关键词：人肝细胞癌家族SOX基因转录水平
- 强直性脊柱炎与肿瘤坏死因子基因启动子-308位点多态性相关的假设验证(英文)被引量：4
- 2004年
- 背景:强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis,AS)患者中HLA-B27的阳性率在不同报道间有明显差异,这种差别可能由环境因素造成,但也可能受其它HLA或非HLA因素影响,推测另一些分子可能在AS发病中起一定作用。目的:探讨肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)启动子多态性与AS的相关性。设计:非随机对照实验研究。地点和对象:资料收集地点:同济医学院附属协和医院。对象:选择2000-06/2003-01武汉地区78例AS患者作为研究对象,所有AS患者均符合VanderLinder1984年修改的诊断标准,平均年龄(37.4±12.8)岁,男67例,女11例。对照组为HLA-B27阳性的武汉籍体检健康汉族人52人,平均年龄(39.2±14.4)岁,男44人,女8人。干预:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对AS患者和HLA-B27阳性健康人群进行TNF启动子多态性分析,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了患者和正常人群血清TNF-α水平。主要观察指标:AS患者TNF基因启动子区域-308位点基因型与AS的关系。结果:AS患者中为-308.1.1基因型的有61例(78%,61/78),明显高于HLA-B27阳性的健康人(56%,29/52),差异有显著性意义(χ2=6.8,P<0.05);AS患者的-308.1.2和-308.2.2基因型频率分别为20%和1%,低于对照的38%(χ2=9.3,P<0.05)和5.8%(χ2=11.4,P<0.01)。
- 刘巧红吴清敏滕云沈凌汛王慧陈燕杨真荣
- 关键词：脊柱炎强直性肿瘤坏死因子
- Toll样受体4参与急性肺损伤的作用及机制
- 目的观察Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)基因突变型小鼠与野生型小鼠内毒素攻击致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的差异,分析TLR4在ALI中的作用及机制。方法...
- 蒋春舫王慧徐建波吴河水
- 文献传递
