南昌大学医学院泌尿外科研究所
- 作品数：25 被引量：129H指数：7
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- 肾缺血对缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的影响被引量：5
- 2011年
- 目的 观察肾缺血性损伤后,缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的表达变化,探讨肾缺血损伤后血管新生的可能调控途径.方法 选择雄性Balb/c小鼠20只,采用夹闭双侧肾蒂方法制备急性缺血肾损伤模型,假手术组设为对照组.通过观察缺血恢复后24 h小鼠肾功能及肾组织病理学改变确定模型成功.实时定量RT-PCR检测缺血恢复后4 h,24 h时缺氧诱导miRNA-210,miRNA-92a,VEGF,Flk-1及Notch1 mRNA表达水平;Western-blot检测缺血恢复后24 h,72 h时Flk-1蛋白的变化;免疫组织化学染色检测CD31表达,判断缺血组织微血管内皮细胞增生状况.结果 肾缺血恢复24 h小鼠肌酐、尿素氮明显升高（P＜0.05）,光镜下观察大量小管上皮细胞肿胀、空泡变性坏死,肾小管管腔扩张,见上皮细胞碎片和管型,表明成功建立肾缺血损伤模型.肾缺血恢复4 h,24 h后,与正常组比较,肾组织miRNA-210上调倍数分别为（2.02±0.29）,（5.58±0.16）;miRNA-92a的表达上调倍数分别为（3.23±0.74）,（1.53±0.33）,P＜0.05;VEGF,Flk-1及Notch1 mRNA表达水平均升高（P＜0.05）.缺血恢复后24 h,72 h时,Flk-1蛋白水平显著升高（P＜0.05）,肾组织微血管密度明显增加.结论 肾缺血性损伤后可出现代偿性血管新生,且缺氧诱导miRNA如miRNA-92a,miRNA-210表达上调,与血管新生相关的信号分子VEGF及Notch1表达均升高,提示miRNA/VEGF-Notch1可能是肾缺血性损伤后血管新生的主要调控通路,从而为探讨缺血性损伤后血管新生的机制提供了依据.
- 刘芬吴珏娄远蕾阮琼芳李勇崔苏萍汪泱
- 关键词：血管新生VEGFNOTCH基因
- TNF-α体外诱导rMSC向神经细胞分化的研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。方法采用密度梯度离心法分离rMSCs,取培养至3～5代的rMSCs以含TNF-α 5ng/ml的培养基培养,镜下观察细胞诱导后形态的变化,采用免疫荧光细胞化学染色法检测神经前体细胞标志物巢蛋白nestin和神经元特异性烯醇化酶在细胞中的表达强度和分布。结果rMSCs经TNF-α诱导6h后基本表现为典型神经样细胞形态,nestin和NSE呈阳性表达。结论TNF-α具有体外诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的作用。
- 娄远蕾邓志锋赖贤良谢安冯年花郭菲汪泱
- 关键词：神经细胞分化
- 小鼠脑损伤后海马区微小RNA的表达变化被引量：1
- 2011年
- 微小RNA（microRNA）是一类长约22个（17～25个）核苷酸的非编码的单链RNA分子，广泛存在于真核生物中，在物种之间具有系统进化上的高度保守性、时序性和组织特异性。MicroRNA通过直接剪切靶信使RNA（mRNA），或者通过完全／不完全与靶mRNA3’非翻译区互补结合抑制靶mRNA的翻译，
- 阮琼芳潘长福沈小梨匡助才吴雷赖贤良汪泱邓志锋
- 关键词：微小RNA脑损伤后MICRORNA小鼠非翻译区RNA分子
- BALB/C小鼠胚胎干细胞的分离培养及初步鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的从BALB/C小鼠的早期胚胎中分离和培养胚胎干细胞(ES细胞),并对其生物学特性进行初步鉴定。方法收集BALB/C小鼠3.5d胚龄的囊胚,分离内细胞团(ICM)细胞进行培养,以小鼠原代胚胎成纤维细胞(PMEF)作为饲养层,细胞扩增传代,观察集落的生长情况并通过碱性磷酸酶(AKP)染色对细胞集落进行初步鉴定。结果ES细胞呈集落样生长,AKP染色阳性,符合小鼠ES细胞的一些特性。结论BALB/C小鼠囊胚在原代小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上可以发育成ES细胞。
- 谢安汪泱郭菲娄远蕾
- 关键词：BALB/C小鼠ES细胞
- 骨髓间充质干细胞—聚乳酸聚乙醇酸共聚复合物支架修复组织损伤的实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚复合物(PLGA)的构建及对损伤组织的修复效果。方法(1)分离培养新西兰幼兔骨髓间充质干细胞(MSC),4,6联脒2苯基吲哚(DAPI)标记后接种于PLGA支架上。扫描电镜和免疫荧光显微镜观察不同时间段MSC在支架上的生长情况。(2)分别将MSC-PLGA复合物及PLGA支架移植于新西兰大白兔背部皮肤创面。术后观察创面愈合情况,5周后取移植物行HE染色、VG染色及细胞角蛋白AE1/AE3免疫荧光组化检测。结果MSC在支架上生长良好,细胞数量随时间增长而逐渐增加,第10天细胞达到90%融合。MSCPLGA复合物所修复创面,随着聚合材料的降解,逐渐形成新生皮肤,HE染色及VG染色示新生皮肤与正常皮肤结构相似,且荧光显微镜下可见胞核呈蓝色荧光的角化层细胞及毛囊细胞,其胞浆同时表达角蛋白。PLGA支架所修复创面则新生皮肤仅见少量毛囊,并见增厚的纤维瘢痕。结论骨髓间充质干细胞复合PLGA聚合物是良好的移植替代物。
- 王共先汪泱刘伟鹏张中华黄学明谢安
- 关键词：骨髓干细胞细胞支架
- 微小RNA在神经发生中的调控作用
- 2010年
- 神经发生是指神经干细胞自我增殖和分化成为新的神经元，并整合入神经网络的生物学过程，包括胚胎时期神经发生和成体时期的神经发生。研究表明，微小RNA在神经发生中发挥着重要的调控作用。文章就近年来微小RNA在胚胎和成体神经发生调控中的分子机制以及脑缺血后神经发生过程中微小RNA的可能调控作用进行了综述。
- 潘长福汪泱邓志锋
- 关键词：微小RNA神经发生干细胞脑缺血细胞分化
- 骨髓间充质干细胞向前列腺癌趋向转移的研究被引量：15
- 2006年
- 目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在体内向前列腺癌微环境趋向转移的特性。方法应用人前列腺癌细胞株PC-3异种皮下种植建立前列腺癌严重联合免疫缺陷小鼠 (SCID)模型,通过密度梯度离心和贴壁法分离、培养hMSCs,将体外4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI) 标记的4～6代hMSCs经尾静脉和肿瘤周围注射入荷瘤SCID鼠体内,分别在经尾静脉注射后17 d 和肿瘤周围注射后7、10、14 d处死小鼠,收集肿瘤和肝、肺、脾、肾等脏器作冰冻切片和石蜡切片, 在荧光显微镜下观察肿瘤及各脏器中hMSCs的分布情况。结果前列腺癌SCID鼠模型成瘤率 83．3％,经尾静脉注射DAPI标记的hMSCs后17 d和肿瘤周围注射DAPI标记的hMSCs后7、10、 14 d,荧光显微镜下显示,前列腺癌组织中可见DAPI标记的hMSCs的核呈蓝色荧光,而肝、肺、脾、肾等脏器中均未见hMSCs的存在。结论 hMSCs在体内具有向前列腺癌微环境趋向转移的特性。
- 王共先汪泱胡红林黄学明袁铿詹以安
- 关键词：骨髓间充质干细胞前列腺癌
- Regulation mechanism of Mir-210 on ischemia-induced angiogenesis after brain stroke
- Stroke is the most common causes of serious,long-term disability in the population and for several decades,mos...
- 汪泱高法梁娄远蕾阮琼芳涂伟吕世刚潘长福邓志锋
- 文献传递
- 人诱导性多能干细胞的培养及鉴定被引量：7
- 2010年
- 目的建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系。方法取第3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果(1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核/质比高。RT-PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB)。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。
- 冯年花谢安娄远蕾阮琼芳郭菲吴珏邓志锋汪泱
- 关键词：细胞培养饲养层
- miRNA-92a在缺血再灌注肾损伤中的表达变化被引量：14
- 2010年
- 目的观察miRNA-92a在缺血再灌注(I/R)损伤4h、24h后小鼠肾组织的表达变化,探讨肾脏缺血损伤后血管生成的可能机制。方法采用双侧夹闭小鼠肾蒂的方法制备急性缺血再灌注肾损伤模型,术后灌注24h后收集血清和肾脏标本,分别检测肾功能及观察肾组织病理学改变。实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)的方法检测小鼠I/R损伤4h和24h组中miRNA-92a的表达水平。结果(1)采用血清肌酐(Scr)和尿素氮(UN)评估肾功能,肾脏I/R24h组与假手术组(sham)比较有显著性差异(P<0.05);HE染色观察肾组织病理改变明显,肾缺血再灌注模型成功。(2)而I/R4h和24h后,miRNA-92a的表达上调,其上调倍数分别为3.23±0.74,1.53±0.33(P<0.05)。结论小鼠I/R损伤中miRNA-92a表达显著上调,miRNA-92a可能参与缺血再灌注肾组织损伤的血管再生的调控过程。
- 吴珏刘芬阮琼芳娄远蕾郭菲杨阳汪泱
- 关键词：微小RNA小鼠肾脏缺血再灌注损伤
