新乡医学院生命科学技术系河南省医学遗传学与分子靶向药物高校重点实验室
- 作品数：11 被引量：50H指数：4
- 相关作者：周锋周克楠曹利军马雪婷马雪亭更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所天津市医用生物材料重点实验室中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金新乡医学院省级重点学科开放课题更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学理学更多>>
- 乳糖诱导木聚糖酶基因在大肠杆菌中的可溶性表达
- 2010年
- 以构建好的大肠杆菌工程菌BL21(DE3)/xylanase为研究对象,研究了以IPTG和乳糖作为诱导剂时重组蛋白的表达规律。在摇瓶发酵条件下研究了诱导剂浓度、诱导时机、诱导培养时间和诱导培养温度对目标蛋白表达的影响。实验结果表明,乳糖作为诱导剂时,重组菌产酶活力33.9 U/mg略高于IPTG作为诱导剂时重组菌产酶活力28.10 U/mg,这为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌生产木聚糖酶提供了参考依据。
- 周晨妍符丹丹王卫杰曹利军丰慧根
- 关键词：木聚糖酶乳糖
- 酸性木聚糖酶XynⅡ活性中心关键氨基酸残基的鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:鉴定来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的酸性木聚糖酶XynⅡ活性中心关键氨基酸残基。方法:对XynⅡ进行SWISS-MODEL同源建模和BLAST序列比较,分析XynⅡ中所有可能作为催化残基的保守氨基酸,采用定点突变手段对其进行鉴定研究。结果:只有Glu-79和Glu-170位于酶与底物作用的活性中心,它们分别位于β折叠股B6和B4上,推测Glu-79和Glu-170为XynⅡ活性中心关键氨基酸残基。将Glu-79和Glu-170突变为酸性的Gln,突变酶E79Q,E170Q在大肠杆菌和毕赤酵母中表达后,活性均丧失。结论:79位、170位Glu是木聚糖酶XynⅡ活性中心的关键氨基酸残基,为该酶进一步的结构与功能研究提供了理论基础。
- 周晨妍符丹丹丰慧根邬敏辰王武
- 关键词：宇佐美曲霉定点突变活性中心
- 木聚糖酶的研究进展及其应用被引量：12
- 2011年
- 综述了木聚糖酶在饲料、食品、造纸及能源等领域的应用现状与研发热点,展望了木聚糖酶的应用前景。
- 付冠华李端周晨妍丰慧根
- 关键词：木聚糖酶基因克隆
- 黑曲霉XZ-3S木聚糖酶Xyn ZF-1基因克隆和序列分析被引量：3
- 2012年
- 利用RT-PCR技术从黑曲霉XZ-3S中扩增并克隆了木聚糖酶(Xyn ZF-1)基因的cDNA片段,测序结果表明,Xyn ZF-1基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,推测分子量为24.06ku,等电点为5.20。以XZ-3S基因组DNA为模板扩增Xyn ZF-1的DNA序列,该序列仅存在一个内含子,长度为68bp。成熟肽基因推导的氨基酸序列与其他微生物来源的木聚糖酶一级结构进行比较,同源性最高达到了89.47%。系统进化树分析该酶属于G/11族糖基水解酶。又进一步对Xyn ZF-1二级结构进行了分析,并通过SWISS-MODEL预测了该酶的三维结构。
- 付冠华李端周晨妍
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶基因克隆
- 酸性木聚糖酶固态发酵条件与粗酶性质研究
- 2012年
- 利用单因素和正交试验对实验室选育的黑曲霉XZ-3S（Aspergillus niger XZ-3S）菌株的发酵条件进行了研究。得到试验因素的产酶条件为天然原料麸皮与玉米芯的比例为5∶3,接种量1.0%（孢子悬液,孢子浓度5×107个/mL）,料水比例1∶1.7,培养基初始pH值为7.5,培养温度28℃、培养时间65h,其间翻曲2~3次,在上述条件下木聚糖酶的活力可达23612.38IU/g干曲。酶学性质初步研究显示,酶的最适反应温度和pH值分别为50℃和5.0,低于50℃、pH3.0~8.0酶稳定。
- 周晨妍刘振华郭伟云王燕李端
- 关键词：固态发酵木聚糖酶黑曲霉正交试验酶学性质
- 重组毕赤酵母摇瓶发酵产木聚糖酶条件优化被引量：2
- 2010年
- [目的]在摇瓶发酵条件下,研究甲醇诱导毕赤酵母工程菌K3产木聚糖酶表达规律。[方法]以重组木聚糖酶酶活为评价指标,采用单因素试验和L9(34)正交试验考察摇瓶发酵条件下pH值、接种时间、诱导剂浓度、诱导时间对酶活的影响。[结果]各因素影响程度依次为:pH值>接种时间>诱导时间>甲醇浓度,最优表达条件为:pH值5.3,接种时间19h,甲醇诱导浓度1.25%,诱导时间192h,在此条件下菌株产酶酶活可达589.16IU/ml。[结论]该研究为木聚糖酶的工业化生产和应用提供依据。
- 周晨妍张金华王煜蘅赵文玺丰慧根
- 关键词：木聚糖酶毕赤酵母发酵
- 黑曲霉XZ-3S产木聚糖酶固态发酵条件的研究被引量：3
- 2013年
- 以木聚糖酶活性为评价指标,利用单因素试验和L9(34)正交试验考察摇瓶发酵条件下培养基组成及初始pH值、培养时间、培养温度、接种量等对木聚糖酶的影响。结果表明,培养基组成为(麸皮∶玉米芯=5∶3)、(NH4)2SO41.0%、KH2PO40.2%、CaCl20.1%、MgSO40.1%、聚山梨酯40 0.4%(均为相对于固体料的质量百分数)料水比例1 g∶1.7 mL;最优培养条件为三角瓶体积150 mL、接种量1.0%(孢子悬液,孢子浓度5×107个/mL)、pH值7.0、培养温度28℃、培养时间65 h,其间翻曲2～3次,在此工艺条件下,木聚糖酶的活性达27 638.71 IU/g。
- 周晨妍王燕周锋周克楠马雪亭付冠华
- 关键词：固态发酵木聚糖酶黑曲霉正交试验
- 胶原-壳聚糖复合材料作为组织工程支架的研究被引量：6
- 2010年
- 目的 本研究考察壳聚糖对于胶原膜理化性质的影响,选择合适比例的胶原-壳聚糖复合膜作为骨髓间充质干细胞（BMSCs）载体.方法 胶原溶涨液中添加一定比例的壳聚糖,交联并冷冻干燥制备多孔组织工程支架,研究壳聚糖对胶原膜形态学、孔隙率、机械强度、降解特性等理化性质的影响,并初步探讨了胶原-壳聚糖材料作为组织工程三维支架材料与BMSCs的相容性.结果 制备的胶原-壳聚糖支架孔径分布均匀;相对于单纯胶原海绵支架,胶原-壳聚糖复合材料支架降低体外降解速度,提高支架材料的力学性能,稳定支架的结构.BMSCs种植于胶原-壳聚糖（mCol∶mCS=9∶1）支架14 d时,SEM观察到细胞通过微绒毛与支架纤维复合,细胞相容性好.结论 胶原-壳聚糖复合支架有良好的细胞相容性,作为BMSCs诱导体外支架材料具有好的研究前景.
- 陈红丽晏杰张彤陈汉刘玲蓉王海张其清
- 关键词：胶原壳聚糖骨髓间充质干细胞组织工程支架
- Arg引入“Ser/Thr”平面对木聚糖酶XynⅡ热稳定性的影响被引量：4
- 2010年
- 【目的】为了提高来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)的高比活木聚糖酶XynⅡ的热稳定性,对其热稳定性影响因素进行改造。【方法】对木聚糖酶XynⅡ进行同源建模和序列比较,在XynⅡ的"Ser/Thr"平面引入精氨酸的四点诱变和五点诱变,对酶的热稳定性进行改造。【结果】获得的2个突变酶在热稳定性上较野生型酶均有不同程度提高,突变酶ST4、ST5的最适温度分别由原酶的50℃提高为52和55℃。55℃保温15 min,ST4、ST5的残留酶活性由原酶的20%提高为65%和75%;保温1 h,ST4、ST5的残留酶活性由原酶的15%提高为50%和65%。【结论】突变酶ST4、ST5在保持了XynⅡ优良性质的基础上,进一步提高了其热稳定性,具有更好的应用价值。
- 周晨妍王武邬敏辰
- 关键词：宇佐美曲霉木聚糖酶热稳定性
- 黑曲霉产木聚糖酶的固态发酵条件优化被引量：13
- 2010年
- [目的]研究培养基组成和培养条件对黑曲霉固态发酵产木聚糖酶的影响。[方法]以木聚糖酶酶活为评价指标,利用单因素试验和L9(34)正交试验考察摇瓶发酵条件下培养基组成、pH值、培养时间、培养温度和接种量对黑曲霉产生木聚糖酶的影响。[结果]最佳培养基组成为:麸皮与玉米芯质量比5∶3,(NH4)2SO4、KH2PO4、CaCl2和MgSO4相对于固体料的质量百分数分别为1.0%、0.2%、0.1%和0.1%),料液比1∶1.7;最优培养条件为:pH值7.5、培养温度28℃、培养时间60h,其间翻曲2～3次;在此工艺条件下,木聚糖酶的活力可达14698.21IU/g。[结论]该优化条件为木聚糖酶的工业化生产和应用提供了依据。
- 周晨妍张金华马雪婷周锋周克楠丰慧根
- 关键词：固态发酵木聚糖酶黑曲霉正交试验
