东华大学生物科学与技术研究所
- 作品数：201 被引量：519H指数：11
- 相关作者：孟清晁天柱陈格飞李佳王培伟更多>>
- 相关机构：同济大学航空航天与力学学院安徽农业大学轻纺工程与艺术学院华东理工大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 断裂蛋白质内含子的剪接机制、起源和进化被引量：4
- 2008年
- 蛋白质内含子(intein)是具有自我催化活性的蛋白质.翻译后,通过蛋白质剪接从蛋白质前体中去掉,并以肽键连接两侧蛋白质外显子(extein)形成成熟蛋白质.断裂蛋白质内含子(splitintein)在蛋白质内含子中部区域特定位点发生断裂,形成N端片段和C端片段,分别由基因组上相距较远的两个基因编码.现在已知,它仅分布于蓝细菌和古细菌中.断裂蛋白质内含子的N端片段和C端片段通过非共价键(如静电作用)相互识别,重建催化活性中心,介导蛋白质反式剪接.断裂蛋白质内含子的发现进一步深化了人们对基因表达和蛋白质翻译后成熟过程复杂性的认识,而且它在蛋白质工程、蛋白质药物开发和蛋白质结构与功能研究等方面有非常广泛的应用.本文试图综述断裂蛋白质内含子的分布、结构特征和剪接机制,并分析其可能的起源和进化途径.
- 邵爱云孟清
- 关键词：蛋白质内含子蛋白质反式剪接进化
- 双向拉伸法制备聚醚砜中空纤维被引量：1
- 2007年
- 采用双向拉伸的方法制备了聚醚砜中空纤维,探讨了工艺条件对聚醚砜中空纤维取向度和水通量的影响。结果表明:随着纺丝速度的提高,纤维的取向度上升,水通量下降;在总拉伸倍数不变的前提下,随着凝固浴拉伸倍数的提高,纤维的取向度和水通量都减小;随着填充液压力的提高,纤维的取向度下降,水通量增加;随着凝固浴中二甲基亚砜含量的提高,纤维的取向度先增大后减小,出现了一个最大值,水通量先减少后增加,出现了一个最小值。
- 朱思君谢建刚朱利民孙俊芬王庆瑞
- 关键词：聚醚砜中空纤维取向度水通量
- 大腹园蛛重组嵌合蛛丝蛋白:一种高分子量的生物材料
- 2022年
- 基于大腹园蛛的两种蛛丝基因构建三部分嵌合的重组蛛丝蛋白iN7RC,在大肠杆菌中成功表达,通过纯化得到产量为34 mg/L的高纯度分子质量高达165.2 ku的重组蛛丝蛋白。不同pH值下的圆二色谱分析显示iN7RC蛋白质的二级结构组分中的α-helix结构占比随着pH值的降低明显减少。通过手工牵拉的方式获得具有高强度和高延展性的重组蛛丝纤维,为蛛丝仿生材料的广泛应用奠定基础。
- 贾秋品孟清
- 关键词：大腹园蛛蛋白表达
- 利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造。[方法]根据搭桥PCR中寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板的原则设计多对引物,通过多次PCR扩增获得目的基因片段,进而实现对蛋白质内含子HP在基因水平上进行多个位点同时定点突变和添加Linker。[结果]搭桥PCR产物克隆经DNA测序分析,证明蛋白质内含子HP内部的4个半胱氨酸成功突变成丝氨酸,几个PCR前体片段也无缝的融合成HP基因片段,而且没有引进任何其他突变;经DNA测序,46bp的DNALinker成功的插入到设计好的HP基因序列中,且没有任何碱基突变和错配。[结论]该研究不仅实现了对蛋白质内含子HP的快速改造,而且扩大了搭桥PCR的应用范围,同时也为蛋白质内含子的基础改造提供了低成本、简捷、高效的方法。
- 李佳林瑛张秀丽扬子江贾秋品孟清
- 关键词：引物设计
- 绿色工艺制备负载脂质体的丝素蛋白复合超细纤维支架及其评价
- 子脂质体作为非病毒药物载体具有安全性好,可高效将多种药物(核酸、生长因子等活性分子)转入细胞中使其生物学活性不被破坏等优点.丝素蛋白生物相容性好且来源广泛,是药物缓释与组织再生支架的最佳原材料之一.本文旨在采用绿色环保的...
- 崔呈俊韩峰陈梦霞王红声
- 关键词：丝素蛋白脂质体基因转染性能表征
- 纳米生物条形码技术在分子诊断中的应用被引量：5
- 2008年
- 纳米生物条形码技术是一种新型的分子诊断技术,在核酸和蛋白质检测领域已经分别达到和超过现今的检测灵敏度。该技术采用纳米颗粒修饰的核酸或抗体对靶分子进行识别,并利用磁场将其分离,操作简单,不依赖酶反应,具有广泛的应用前景。该技术在病毒DNA、癌症的指标蛋白质等方面的应用已有文献报道,并有望成为一种常规的分子诊断工具。
- 贺明星李凯周宇荀肖君华
- 关键词：分子诊断核酸蛋白质
- 利用小肽控制的基于蛋白质内含子非层析标签制备重组蛋白(英文)
- 2014年
- 基于蛋白质内含子的蛋白质纯化自我断裂标签已经被广泛使用超过15年之久.但这一系统体内表达过程的提前断裂一直是限制这一技术广泛应用的瓶颈,特别是在需要高温表达和长表达周期的真核表达系统中.本研究介绍了一种利用小肽控制的基于蛋白质内含子和非层析标签ELP(elastin-like polypeptide)的自我断裂系统.在这一系统中,蛋白质内含子的体内外活性严格受到其结构互补小肽控制.在体内表达不含有互补小肽时,蛋白质内含子不具有活性;而在体外添加结构互补小肽,蛋白质内含子结构恢复并发生C端断裂反应释放目的蛋白.由于非层析标签ELP的引入,因此整个纯化过程可以简单地通过几步机械沉淀完成.此外,这一系统反应pH、小肽与前体蛋白之间的摩尔比及断裂速率也一并进行了系统的研究.
- 施长华孟清Wood D W
- 关键词：小肽蛋白质内含子蛋白质纯化
- 二代测序应用于检测GT1-7细胞中KISS1和GnRH启动子的DNA甲基化状态的研究被引量：1
- 2017年
- 目的:利用二代测序技术检测GT1-7细胞中KISS1和GnRH基因启动子范围内的甲基化状态,并用金标准的亚硫酸氢盐修饰后的克隆测序作为对照,比较二代测序与金标准克隆测序在研究DNA甲基化检测中的差别。方法:提取GT1-7细胞基因组DNA并进行亚硫酸氢盐处理。进行巢式PCR,将PCR产物进行二代测序。同时采用金标准的亚硫酸氢盐修饰后克隆测序的方法作为对照,对相同批次的PCR产物进行克隆测序。结果:PCR产物二代测序结果表明KISS1和GnRH两个基因的27个CpG甲基化位点信息完整,结果准确。挑取10个克隆进行一代测序结果表明序列无丢失,KISS1和GnRH两个基因的27个CpG甲基化位点信息完整。结论:利用高通量的二代测序技术能够有效的对DNA甲基化的PCR产物进行检测,二代测序和克隆测序都是研究DNA甲基化的有效方法,但前者与克隆测序相比每一个读取序列(reads)都相当于一个单克隆,且二代测序每个区段得到成百上千个reads,因此二代测序结果更加精确。
- 贾梅兰王茂春徐园周宇荀李凯肖君华
- 关键词：启动子甲基化克隆测序
- 蛋白质反式剪接体系（protein trans-splicing system）的建立
- 蛋白质内含子（Intein）是镶嵌在宿主蛋白质序列中的插入序列,在宿主蛋白质翻译成熟过程中自我剪切去掉的蛋白质序列。蛋白质这一成熟过程称之为蛋白质的剪接（Protein Splicing）。在蛋白质剪接过程中,蛋白质内含...
- 胡芳徐玲玲齐兴酶刘相钦孟清
- 文献传递
- 酶促合成2′,3′-双脱氧双脱氢-5-氟胞嘧啶核苷的研究被引量：2
- 2007年
- 从瑞士乳酸杆菌Lactobacillus helveticus(ATCC8018)中提取了N-脱氧核苷转移酶进行催化合成抗病毒药物2′,3′-双脱氧双脱氢-5-氟胞嘧啶核苷(D-D4FC)的反应.考察了反应时间、反应液的pH值、缓冲液以及反应底物浓度对反应产率的影响.
- 戚娜傅绍军朱利民
