海南医学院海南省药物临床前药理毒理学研究重点实验室
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全子宫切除术对BALB/c小鼠TDAR实验的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:通过建立BALB/c小鼠全子宫切除实验动物模型,考察和分析该术式对小鼠TDAR的影响。方法:平行对照组和手术组经腹行全子宫切除术,非手术组不予手术;非手术组和手术组腹腔注射KLH进行免疫;流式细胞技术分析B淋巴细胞亚群变化;ELISA法检测血清雌二醇和KLH Ig G抗体含量;HE染色观察卵巢组织学改变。结果:KLH能够刺激B淋巴细胞分化增殖,手术组和非手术组较平行对照组明显升高(P<0. 05);全子宫切除术能够影响KLH Ig G抗体生成,手术组较非手术组低(P<0. 05);全子宫切除小鼠雌二醇分泌明显低于非手术组(P<0. 05);全子宫切除小鼠卵巢组织出现体积缩小,成熟卵泡形态不规则,颗粒细胞松散、凋亡等。结论:全子宫切除术通过降低卵巢雌二醇分泌水平,对小鼠TDAR实验产生抑制效应。
- 常鹏环黄守国林铃于欣荣林莉香杨照新
- 关键词：子宫切除术卵巢雌二醇KLH
- 新化合物TDB通过PI3K/Akt通路抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡被引量：2
- 2020年
- 目的:观察新化合物TDB抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡的作用及其可能的作用机制。方法:采用不同浓度的TDB处理人肝癌SMMC-7721细胞48 h,以MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3、Akt和p-Akt等蛋白的表达情况。结果:TDB能呈浓度依赖性抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期于S期,诱导细胞凋亡;同时下调p-Akt、Bcl-2表达,上调Bax、Cleaved Caspase-3表达。结论:TDB具有抑制肝癌细胞增殖、阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡作用,其机制可能与抑制肝癌细胞PI3K/Akt通路,改变Bcl-2/Bax间的平衡,激活下游效应型Caspases发挥诱导凋亡作用有关。
- 林春华肖敏劳基通杨照新田树红符健(指导)
- 关键词：苯并噁唑SMMC-7721凋亡PI3K/AKT
- HIV-1流行株去糖基化修饰gp41突变体的构建及其表达和纯化
- 2019年
- 目的:构建HIV-1ⅢB标准株、中国大陆地区主要流行株CRF-BC和海南省流行株CRF-AE野生型和突变型gp41表达载体,获得gp41重组蛋白。方法:利用基因定点突变的方法,将HIV-1ⅢB、CRF-BC和CRF-AE流行株野生型gp41基因中特定的N611Q糖基化位点天冬酰胺Asn突变为谷氨酰胺Gln,使该位点去糖基化。利用基因工程技术构建野生型pc DNA3. 1-gp41和突变型pc DNA3. 1-Mgp41表达载体。取测序正确的重组质粒转染293 T细胞,重组蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后采用免疫杂交方法进行分析。结果:测序结果显示野生型gp41的N611糖基化位点均由天冬酰胺(Asn)的编码基因(AAU)突变为谷氨酰胺(Gln)的编码基因(GAA),成功构建了野生型和突变型gp41表达载体。琼脂糖凝胶电泳分析显示野生型和突变型HIV-1 gp41基因大小约为700 bp,Western blot免疫杂交结果显示在26 k D处出现目的条带,与预期一致。结论:成功构建了HIV-1流行株去糖基化修饰gp41突变体,为研究去糖基化修饰gp41蛋白与疾病发生发展的分子机制奠定基础。
- 邵继平符健
- 关键词：HIV-1
- HIV-1 CRF01_AE毒株gp41蛋白生物信息学预测被引量：2
- 2020年
- 目的:对HIV-1 gp41蛋白的膜外区和跨膜区进行预测,并分析该蛋白的结构和功能。方法:从NCBI GenBank数据库获取gp41基因及其蛋白编码序列,利用ExPASy ProtParam tool、ProtScale、SignalP 4.0 Server、TMHMM Server v.2.0、SWISSMODEL、PredictProtein等工具对gp41蛋白的生物学特性进行预测。结果:HIV-1 gp41基因ORF长度为666 bp,编码222个氨基酸,蛋白分子式为C1164H1815N317O325S6,等电点(isoelectric point,pI)=8.60,属于稳定、疏水性蛋白。该蛋白具有跨膜区,信号肽切割位点位于第20和21位氨基酸处。其二级结构由无规则卷曲、β折叠和α螺旋组成,属于全螺旋型蛋白。而且该蛋白具有N-端信号肽,能引导蛋白分泌到胞外。此外gp41蛋白具有4个蛋白质-蛋白质和1个蛋白质-核酸结合位点,这些位点能调控gp41蛋白的多种生物学功能。结论:对gp41蛋白的结构和功能进行了预测,为深入研究其参与疾病发生发展的分子机制奠定了基础。
- 邵继平谢学立刘莹郭燕子符健
- 关键词：HIV-1生物信息学预测
- HIV-1 gp41蛋白的主要特性及B/T细胞表位预测被引量：1
- 2019年
- 目的采用生物信息学方法分析HIV-1 gp41跨膜糖蛋白的基因序列及其编码蛋白的结构特征,并预测可能的B/T细胞表位,为艾滋病疫苗及多肽药物开发提供理论依据。方法从NCBI GenBank数据库获取gp41基因及其编码蛋白序列,综合运用ExPASy ProtParam tool、SOPMA、TMpred、Motifscan、ABCpred、Bepipred、CTLPred和IEDB等在线软件分别预测其低级结构、跨膜区、翻译后修饰位点、B/T细胞表位。结果 HIV-1 gp41基因ORF长度为666 bp,编码222个氨基酸。该gp41蛋白共3 627个原子,相对分子质量为25.642 5×10~3,分子式为C_(1164)H_(1815)N_(317)O_(325)S_6。理论等电点为8.60,是稳定的疏水性蛋白。gp41蛋白具有无规则卷曲55个,占24.77%;13个翻译后修饰位点,存在N-糖基化、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化、N-酰胺化、蛋白激酶C磷酸化等修饰。gp41蛋白N-末端存在跨膜螺旋区,分别位于第2-20,80-97和171-192位氨基酸处,这3个螺旋区的总评分为4 614。预测gp41蛋白含有23个B细胞抗原表位,优势表位依次是87-102、93-108、113-128、78-93、151-166等;含有NKTYKEIWD、VERYLRDQR和EPDRPERIE 3个优势CTL细胞表位,分别位于第103-111、70-78、213-221位氨基酸处。结论预测gp41蛋白的B/T细胞表位进行预测,可为艾滋病疫苗及多肽药物的开发提供了理论依据。
- 邵继平符健
- 关键词：HIV-1生物信息学
- 重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基在大鼠体内的药动学和组织分布特征
- 2020年
- 目的研究重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基(rhCNB)在大鼠体内的药动学和组织分布特征。方法利用双抗体夹心ELISA法,对组织样本中rhCNB检测的选择性、线性范围、精密度、回收率和稳定性等进行方法学验证。SD大鼠单次iv给予rhCNB 5,10和20 mg·kg^-1,多次iv给予rhCNB 20 mg·kg^-1,于给药前及给药后0.033,0.25,0.5,1,2,4,8和12 h采血,用ELISA法测定rhCNB浓度,用DAS3.0软件计算药动学参数。大鼠单次iv给予rhCNB 10 mg·kg^-1后,分别在0.25,1,2和8 h采集脑、心、肝、脾、肺、肾、全胃、睾丸或卵巢、体脂、骨骼肌、胸腺和血浆,用ELISA测定血浆和组织样品中rhCNB浓度。结果rhCNB 5,10和20 mg·kg^-1单次给药,主要药动学参数为:消除半衰期(t1/2)分别为0.95±0.28,0.85±0.27和(0.91±0.32)h;药时曲线下面积(AUC0-12 h)分别为41.0±4.3,59.5±9.1和(150.6±18.9)mg·h·L^-1;血浆峰浓度(Cmax)分别为44.6±14.4,62.7±15.7和(160.1±27.3)mg·L^-1;在5~20 mg·kg^-1剂量范围内,rhCNB的Cmax和AUC0-12 h比值随着剂量增加而增大。rhCNB多次给药主要药动学参数为:t1/2为(1.16±0.46)h;AUC0-12 h为(94.9±11.0)mg·h·L^-1;Cmax为(121.2±18.9)mg·L^-1。单次给药和多次给药的主要药动学参数无显著性差异。不同组织中rhCNB的分布由高到低的顺序为体脂>肺>肾>脾>睾丸/卵巢>心>肝>胸腺>胃>脑>骨骼肌。结论rhCNB在大鼠体内呈现线性动力学特征,多次给药后大鼠体内无明显蓄积并广泛分布于各个组织。
- 韩丽芳张彩云刘莹邵继平谢学立符健
- 关键词：药动学
- 基因工程抗癌新药重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基在食蟹猴体内的药动学研究
- 2020年
- 目的:研究重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基(rhCNB)单次和多次给药在食蟹猴体内的药动学。方法:按照2.5,5和10 mg·kg^-1剂量给食蟹猴单次静脉注射rhCNB,清洗2周后,10 mg·kg^-1剂量给食蟹猴多次静脉注射rhCNB。分别在9个时间点采血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血药浓度,并用DAS 3.0软件计算药动学参数。结果:rhCNB 3个单次剂量组主要药动学参数:t1/2分别为(0.97±0.20),(1.03±0.10)和(1.03±0.06) h;AUC0~12h分别为(15.66±4.54),(34.30±2.02)和(60.76±6.34)μg·h·mL^-1;rhCNB多次给药主要药动学参数:t1/2为(1.02±0.09) h;AUC0~12h为(56.59±3.13)μg·h·mL^-1。在2.5~10 mg·kg^-1剂量范围内,rhCNB的Cmax和AUC0~12h比值随着剂量增加而成比例增大。单次给药和多次给药的主要药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论:rhCNB在食蟹猴体内呈现线性动力学特征,rhCNB多次给药在食蟹猴体内无明显蓄积现象。
- 韩丽芳张彩云刘莹邵继平谢学立符健
- 关键词：酶联免疫吸附法食蟹猴药动学
