西南科技大学植物生物技术研究中心
- 作品数：17 被引量：74H指数：4
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- 农杆菌介导的棉花遗传转化过程中诸因素对出愈率的影响被引量：1
- 2012年
- 研究了农杆菌介导的棉花遗传转化过程中影响外植体出愈率的一些相关因素.结果表明:卡那霉素(Kan)的浓度以50 mg/L或75 mg/L为最好,农杆菌菌株EHA105的浸染能力较强,7 d苗龄的棉花无菌苗下胚轴为最佳的遗传转化外植体材料,下胚轴外植体经预培养后再经农杆菌菌液浸染更有利于胚性愈伤组织的形成,同时农杆菌菌液浸染时间以3 min为最佳.
- 孙英坤代其林龚元亚田霞谢琳杨娟王劲
- 关键词：棉花外植体农杆菌出愈率
- GAPB基因原核表达载体的构建
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。
- 田霞代其林龚元亚孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：融合蛋白
- PRK基因原核表达质粒的构建被引量：1
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,扩增出PRK基因,构建重组质粒pET-28a(+)-PRK转化大肠杆菌DH5α。经PCR鉴定和酶切鉴定筛选出阳性克隆,将阳性克隆的质粒转化到大肠杆菌表达载体BL21中,构建PRK基因原核表达载体。测序结果表明pET-28a(+)-PRK载体构建成功。
- 龚元亚代其林田霞孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：PCR
- 甘蓝型油菜花粉超低温保存及其花粉活力的研究被引量：8
- 2010年
- 研究超低温方法保存油菜花粉过程中的预冻和解冻处理方式对油菜花粉的形态、大小及其活力的影响。结果表明:采用0℃(12h)→-4℃(12h)→-20℃(12h)→-80℃(12h)变温预冻处理和用-80℃(1h)→-20℃(1h)→4℃(1h)逐步解冻后对油菜花粉形态大小和活力影响最小。而经过25℃室温解冻法和42℃快速解冻法处理后油菜花粉出现破裂,破裂率分别达到7.6%和9.1%。同时液氮保存油菜花粉的时间长短对花粉的大小及活力影响不大。
- 刘婷婷代其林奉斌田霞龚元亚孙英坤王劲
- 关键词：花粉活力油菜
- 利用酵母双杂交系统筛选IrrE相互作用蛋白
- 2012年
- 本研究通过酵母双杂交技术,构建了IrrE蛋白为诱饵载体,从拟南芥cDNA文库中筛选与IrrE诱饵蛋白相互作用的功能蛋白.研究结果表明,在所获得的阳性克隆中,发现了一个与拟南芥基因Atlg01470所编码的蛋白有较高同源性的蛋白,即LEA14蛋白(晚期胚胎发育富集蛋白),同源性高达98%.推测IrrE转录因子在提高植物耐盐性的过程中起了重要作用.
- 田霞代其林龚元亚孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：酵母双杂交功能蛋白耐盐性
- IrrE基因转化甘蓝型油菜及其分子检测
- 2010年
- 为提高油菜的盐胁迫的耐受性,文章以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)下胚轴为转化材料,通过农杆菌介导法将耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans,DR)的IrrE基因导入甘蓝型油菜84100-18(玻里马细胞质雄性不育恢复系)中,经过卡那霉素的筛选培养,获得了抗卡那霉素的再生植株,对抗性植株进行PCR和实时荧光定量PCR检测。结果表明:部分抗性植株多次重复检测显示为阳性植株,初步证实了IrrE已整合到油菜基因组中并且IrrE基因已经在这些植株中进行mRNA水平的转录。
- 杜世章代其林谢林杨娟
- 关键词：甘蓝型油菜PCR检测
- 辐照对烟草抗氧化酶活性的影响被引量：4
- 2012年
- 以K326烟草植株为材料,研究了60Co-γ射线辐照对烟草叶片抗氧化酶活性及其基因转录水平的影响。结果表明,经300Gy60Co-γ射线辐照后0～48 h期间,烟草叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)三种抗氧酶活性以及其相应酶基因转录水平都逐渐提高,SOD、POD和CAT酶活性及其基因转录水平在12 h均达最大值,三者的活性及其基因转录水平随后都逐渐降低。我们的实验结果表明烟草叶片的抗氧化酶活性在其耐辐射能力起了重要作用。
- 杜世章刘婷婷代其林奉斌杨娟谢琳鲜先毅王劲
- 关键词：烟草抗氧化酶
- 转IrrE基因甘蓝型油菜农艺性状的分析
- 2010年
- 文章主要研究了转IrrE基因T1代甘蓝型油菜在自然条件与Nacl盐胁迫条件下的农艺性状,结果表明:以自然条件下的野生型油菜为对照,自然条件下的转IrrE基因油菜在株高、主花序长度、全株有效角果数差异极显著,而分枝部位高度和分枝个数差异不显著。300mMNaCl高盐胁迫条件下的转IrrE基因油菜,株高、主花序长度、全株有效角果数差异极显著,分枝数差异不显著。
- 奉斌代其林刘婷婷田霞龚元亚孙英坤王劲
- 关键词：甘蓝型油菜NACL胁迫
- NaCl胁迫对转IrrE基因烟草抗氧化酶活性的影响被引量：3
- 2010年
- 文章主要研究了转IrrE基因烟草幼苗对NaCl胁迫的耐受性应答情况。结果表明,在200mmol/LNaCl胁迫下,其中野生型烟草随着胁迫时间的延长,POD、SOD、CAT三种抗氧化酶活性和可溶性蛋白的含量逐渐升高,处理24h后达到一个峰值,然后又逐渐降低,叶片的相对含水量一直逐渐降低,而转IrrE基因烟草幼苗三种抗氧化酶活性和可溶性蛋白持续上升,相对含水量先有所降低然后逐渐升高,5个生理指标均高于野生型烟草。因此,IrrE基因作为一种转录因子可能调控了盐胁迫相关基因的表达,从而提高了植物对NaCl胁迫的耐受能力。
- 奉斌代其林刘婷婷田霞龚元亚孙英坤王劲
- 关键词：抗氧化酶烟草
- ^(60)Co γ射线辐照对转基因和非转基因烟草抗氧化酶活性的影响被引量：4
- 2011年
- 以转pprI基因烟草植株为材料,研究了60Coγ射线辐照后转pprI基因烟草抗氧化酶活性及其基因转录水平的变化。结果表明,经0、100、200、300、400和500Gy 60Coγ射线辐照后,转基因和非转基因烟草的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)3种抗氧化酶活性及其相应酶基因转录水平都逐渐提高,其中SOD酶活性及其基因转录水平在100Gy辐照后达最大值,而SOD和CAT活性在300Gy辐照后达到最大值,三种酶的活性及其基因转录水平随后都随剂量的增加逐渐降低,但转基因烟草的3种抗氧化酶基因转录水平和酶活性都显著高于非转基因烟草。说明把pprI基因转化到烟草植株体内后,pprI基因能有效地提高烟草在60Coγ射线辐照下SOD、POD和CAT等抗氧化酶基因的转录水平及其活性水平,从而提高了转基因烟草对辐照的耐受能力。
- 杜世章代其林刘婷婷奉斌田霞龚元亚孙英坤王劲
- 关键词：Γ射线辐照抗氧化酶
